褪黑素对羊精液低温保存效果的影响

为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。     

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。     

葡萄籽原花青素对猪精液冷冻保存效果的研究

在猪精液冷冻基础液中分别添加0μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL的葡萄籽原花青素,通过对冷冻-解冻后猪精子的动力学参数、生理参数以及生化参数的检测,旨在研究其对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明,当葡萄籽原花青素添加浓度为20μg/mL和50μg/mL时,解冻后精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性、质膜完整性和酶活性都显著高于对照组(P0.05),但是两组间比较差异不显著(P0.05)。与对照组和其他实验组相比,当葡萄籽原花青素添加浓度为40μg/mL时,精子畸形率降低了9.30%,精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性和质膜完整性分别提高了12.59%、11.78%、14.27%、12.53%和11.96%(P0.05)。当葡萄籽原花青素的添加量为40μg/mL时,MDA的量最低为1.16nmol/mg,SOD和GSH-Px酶活性最大分别为77.36U/mg、35.21U/mg。结果显示,在猪精液稀释液中添加一定浓度的葡萄籽原花青素,可以显著提高冷冻-解冻后猪精子品质和抗氧化能力。当葡萄籽原花青素的添加量为40μg/mL时,其对猪精子冷冻保存效果最好。     

L-肉碱对猪精液冷冻保存效果的研究

本试验用5%二甲基甲酰胺(DMF)替代甘油作为冷冻保护剂,研究不同浓度(0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/mL)L-肉碱对猪精液冻后常规指标(精子活率、线粒体活性、顶体完整性、质膜完整性)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化酶(T-AOC)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:添加0.04和0.06 mg/mL的L-肉碱可有效改善猪精液冷冻后效果。0.04 mg/mL组可显著提高精子冻后活率和线粒体活性(P<0.05);0.06 mg/mL组可显著提高顶体完整性和质膜完整性(P<0.05)。添加0.06 mg/mL L-肉碱可显著提高冷冻后精子内T-AOC酶活性并且抑制MDA的产生(P<0.05),但CAT活性与0.04 mg/mL组差异不显著。在冷冻稀释液中添加0.06 mg/mL L-肉碱可以提高猪精液冷冻保存效果。     

白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响

为研究白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响，实验通过假阴道法采集健康黑头山羊精液，在基础稀释液中分别添加0、25、50、100、200μmol/L白藜芦醇溶液，常温保存过程中检测精子活力、质膜完整率、顶体完整率、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果表明：与0μmol/L组相比，在基础稀释液中添加白藜芦醇能提高黑头山羊常温保存精子的活力、质膜完整率和顶体完整率(P<0.05)，并提升精液T-AOC水平，降低ROS及MDA含量(P<0.05)；其中黑头山羊精液常温保存时白藜芦醇的适宜添加浓度为25μmol/L。本研究证实了在精液稀释液中添加白藜芦醇可改善黑头山羊常温保存的精液品质，保存3 d对母羊受胎率无显著影响。     

还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽（GSH）对西门塔尔牛精液低温保存（0℃）的影响。在精液稀释液中分别添加0（对照组）、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛（MDA）水平、三磷酸腺苷（ATP）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组（P<0.05）;在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组（P<0.05）,MDA水平低于其他组（P<0.05）。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。     

Gln对猪精液常温保存效果的影响

L-谷氨酰胺具有增强免疫力和抗氧化等生物学作用。为了探究猪常温稀释液中添加L-谷氨酰胺(Gln)对保存效果的影响,本试验在自配基础稀释液中添加0、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L的L-谷氨酰胺,在常温保存过程中,检测精子活率、顶体完整性、质膜完整性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)浓度等指标,分析Gln对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:常温保存的过程中,在基础稀释液中添加4 mmol/L的Gln,精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其他组(P0.05),保存第5天时,精子活率为59%、质膜完整率为47.05%、顶体完整率为74.40%、T-AOC浓度为4.34 IU/m L、MDA浓度为1.51 nmol/m L。因此,添加4 mmol/L的Gln能够提高猪精液常温保存效果,延长猪精液常温保存时间。     

原花青素对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响

为研究原花青素（PC）对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响,本实验采用假阴道法采集5只2岁成年吐鲁番黑羊公羊精液,在精液基础稀释液中添加不同浓度（0、10、20、30、40μg/mL）的PC进行低温保存,每隔24 h检测精子活率、活力、曲线速率（VCL）、直线速率（VSL）、畸形率、质膜完整率等指标,在保存24、72、120 h时检测总抗氧化能力（T-AOC）活性和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：各PC添加组的精子活率、活力、VCL、VSL、质膜完整率、T-AOC和CAT活性均高于对照组（P<0.05）,畸形率低于对照组（P<0.05）,其中20μg/mL PC添加组的精子质量高于其他各组（P<0.05）。综上所述,在基础稀释液中添加PC可以显著提高精液品质,且PC添加浓度为20μg/mL时对吐鲁番黑羊精液低温保存效果最佳。     

维生素P对低温保存猪精液的影响

在猪精液稀释液(Zorlesco)中分别添加0,40,80,120,160,200μg/mL的维生素P,研究其对猪精子低温保存的影响。结果表明,维生素P的添加显著延长了猪精子低温保存时间,在各试验组中,维生素P的最适添加浓度为160μg/mL。在该浓度下,维生素P并对第3天时精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性作用效果不明显(P0.05)。在第6天时,维生素P显著地提高了精子的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率(P0.05),但对精子线粒体活性没有显著影响(P0.05)。在保存第9天时,猪精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性与对照组相比具有显著的提高(P0.05)。     

不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响

为了探讨在冷冻稀释液中添加不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响，试验将6头沂蒙黑猪的精液混合后分成6组，分别为对照组(冷冻保存液)和在冷冻保存液中添加100,200,300,400,500 mg/L维生素E的试验组，先用液氮保存，然后将每组精液解冻后检测精子活力及运动参数、顶体完整性、质膜完整性、DNA完整性、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)水平，以此来评估维生素E对精液品质的影响。结果表明：与对照组相比，200 mg/L组和300 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著提高(P<0.05),其中300 mg/L组提高最显著；100 mg/L组和400 mg/L组精子运动参数也提高，而500 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著降低(P<0.05)。与对照组相比，100 mg/L组、200 mg/L组和300 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性及MMP水平均显著提高(P<0.05);而500 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性及MMP水平均显著降低(P&l...     

谷氨酰胺对湖羊精液4℃保存效果的影响

为研究湖羊稀释液中添加谷氨酰胺(Gln)对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的基础稀释液中添加0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mg/L的Gln, 4℃条件下保存96 h,每隔24 h检测精子活力、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量指标。结果显示:添加0.5、1.0、2.0、4.0 mg/L的Gln可以有效提高4℃保存条件下的精子活力、顶体完整率和T-AOC水平,并有效抑制MDA的生成(P<0.01),且4.0 mg/L添加浓度保存效果最好,而8.0 mg/L的添加浓度则不利于精液保存。提示:在湖羊精液稀释液中添加4.0 mg/L Gln可有效提高湖羊精液4℃保存的效果。     

羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

牛血清白蛋白对犬精液冷冻保存效果的影响

为了研究牛血清白蛋白(BSA)对犬精液冷冻保存效果的影响,试验配制含有不同浓度(0、3%、5%、7%)BSA的精液冷冻稀释液用于保存犬精液,测定冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及线粒体膜电位(MMP)等指标。结果表明：3%和5%BSA组冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC均显著高于对照组(P<0.05);3%BSA组MDA含量显著低于其他各组(P<0.05),线粒体膜电位值显著高于其他各组(P<0.05);除精子活力外,7%BSA组和对照组之间各项指标均差异不显著(P>0.05)。说明在犬精液冷冻稀释液中添加BSA能有效改善冷冻-解冻后精液品质,对提高精子抗氧化能力及代谢能力都有显著效果,BSA的最适添加浓度为3%。     

安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响,本实验采集3只1～2岁健康成年湖羊精液,混匀后取5份等量精液,按1:9的比例加入不同安石榴甙浓度（0、5、15、30、45μmol/L安石榴甙）的稀释液,4℃保存7 d。检测精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）活性等指标。结果显示：保存4～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子活率、活力显著高于其他各组;保存2～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子的MMP显著高于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组精子ROS含量显著低于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液MDA含量显著低于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液CAT活性显著高于其他各组。本研究结果表明,在稀释液中添加30μmol/L安石榴甙可以显著提高精液保存质量。     

维生素E对湖羊精液低温保存效果研究

为研究维生素E对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的湖羊精液稀释液中添加不同质量浓度(0.0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mg/mL)的维生素E用于湖羊精液冷藏试验,检测湖羊精子活率和顶体完整率,以及精液中总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。结果表明:维生素E的添加显著减少MDA的生成,提高了总抗氧化能力(T-AOC);但维生素E的添加对精子活率和顶体完整率无显著提高,本试验中0.6 mg/mL的添加质量浓度保存效果与对照组无显著差异,但质量浓度过高或过低保存效果欠佳。因此,在4℃保存条件下,在湖羊精液稀释液中添加维生素E不能提高精液保存质量。     

聚维酮碘对常温保存猪精子质量的影响

通过在猪鲜精和17℃保存精液中添加聚维酮碘(PVP-Ⅰ),探讨其杀灭精液有害细菌的效果和对精子质量的影响,从而达到阻断病原菌垂直传播的目的。保存后不同时间时取样精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测精液中细菌菌落总数,并用MicroScanA/S4细菌鉴定仪鉴定细菌种类。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率、活力,低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测线粒体活性和考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,用PVP-Ⅰ消毒猪精液时,在0～0.27g/L随着PVP-Ⅰ质量浓度的增加杀菌效果越好。精液中添加0.20g/L和0.27g/L PVP-Ⅰ能杀死棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌(作用1h),但不能杀死变形杆菌。在猪精液稀释液中添加质量浓度0～0.20g/L的PVP-Ⅰ对17℃保存猪精子质量无影响。结果表明,聚维酮碘在质量浓度0.20g/L能杀死猪精液中的棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌,并且对17℃保存猪精子质量常规指标(活率、活力、线粒体活性、质膜完整性和顶体完整性)无影响。     

精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响

为了研究精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响,试验以低倍稀释(1∶2)为对照组,研究以高倍稀释(1∶10,高倍稀释组)和离心洗涤(洗涤组)两种方式去除精浆后的精子保存效果,再人为添加不同浓度精浆(0、10%、20%,30%、40%)于低温保存稀释液中,测定精子活率、运动速率、顶体完整性、质膜完整性及线粒体活性等精液品质指标。结果表明:高倍稀释组在各时间段内的精子活率、运动速率[直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)及平均路径速率(VAP)]、质膜完整率均显著高于对照组和洗涤组(P0.05);高倍稀释组的精子顶体完整率和线粒体活性与对照组和洗涤组相比无显著差异(P0.05);在外源添加不同浓度精浆的试验中,10%、20%精浆组的精子活率、质膜完整率及运动速率均显著高于其他组(P0.05),而10%、20%精浆组之间无显著差异(P0.05),但20%精浆组的各项精子质量指标略高于10%精浆组。说明在低温保存山羊精液时存在一定浓度的精浆可以有效提高保存效果,在本试验条件下10%～20%的精浆添加量比较适宜,但20%精浆组的保存效果相对更好。     

Mito-tempo对绵羊精液低温保存效果的影响

实验旨在探究不同浓度的Mito-tempo对绵羊精液低温保存效果的影响。采集8只湖羊种公羊精液，分别用含0、15、30、45、60μmol/L Mito-tempo稀释液进行8倍稀释，5℃冷藏120 h。分别在24 h和120 h检测精液品质指标（活力、活率、平均路径速度、曲线运动速度、直线运动速度、质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性和线粒体活性）及抗氧化指标（总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量）。结果表明：在低温保存期间，30μmol/L Mito-tempo处理组精子活力、活率、平均路径速度、DNA完整性、顶体完整性、线粒体活性、超氧化物歧化酶含量和总抗氧化能力均高于对照组及60μmol/L Mito-tempo处理组（P<0.05）；在低温保存过程中，30μmol/L Mito-tempo处理组丙二醛含量低于对照组和其余各试验组（P<0.05）。由此可见，在稀释液中添加30μmol/L Mito-tempo可有效提高低温保存后绵羊精液质量。     

红景天多糖对藏猪精液冻后品质及精子基因组DNA甲基化的影响

在藏猪精液的冷冻液中添加不同质量浓度的红景天多糖(0,2,4,6,8,10mg/L),制成高密度细管冻精,以冷冻解冻后精子活率、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为精液品质的评价指标,筛选最适红景天多糖添加质量浓度;用甲基化荧光定量法检测3组(鲜精组、未添加组、最适添加组)精子基因组DNA甲基化的水平。结果显示:添加红景天多糖质量浓度为6mg/L组的精子活率显著高于其他组(P<0.05),该组精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率也显著好于未添加组(P<0.05);这3组精子基因组的DNA甲基化水平(0.610 5±0.080 0,0.945 7±0.043 7,0.680 2±0.051 0)中,最适添加组虽显著高于鲜精组(P<0.05),但却显著低于未添加组(P<0.05)。结果表明:在藏猪精液冷冻液中添加质量浓度6mg/L的红景天多糖不仅可以明显改善藏猪精液冻后品质,而且可以明显减少冷冻对藏猪精子基因组DNA甲基化水平的影响,这将为提高藏猪精液冷冻保存效果的进一步研究提供参考。     

Sch B对猪精液常温保存效果的影响

为了研究五味子乙素(Sch B)对猪精液常温保存效果的影响,本实验设计6个猪精液常温保存稀释粉配方,在筛选出的最佳自配基础稀释粉配方中添加了0、1、5、10、15μmol/L的Sch B,通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整性以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,分析Sch B对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:6号基础稀释粉猪精液常温保存效果最佳,有效保存时间为4d,精子活率为0.63,质膜完整率为59.33%,顶体完整率为78.29%,均显著高于其他处理组(P0.05);在6号自配基础粉中加入10μmol/L Sch B猪精液的有效保存时间为5d,精子活率达到0.61,T-AOC浓度为4.85 U/mL,显著高于其他处理组(P0.05),并使MDA浓度显著降低为1.44nmol/mL(P0.05)。因此,基础稀释粉中添加Sch B可提高猪精液常温保存品质,延长精子有效保存时间,其最佳添加量为10μmol/L。