Sch B对猪精液常温保存效果的影响

为了研究五味子乙素(Sch B)对猪精液常温保存效果的影响,本实验设计6个猪精液常温保存稀释粉配方,在筛选出的最佳自配基础稀释粉配方中添加了0、1、5、10、15μmol/L的Sch B,通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整性以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,分析Sch B对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:6号基础稀释粉猪精液常温保存效果最佳,有效保存时间为4d,精子活率为0.63,质膜完整率为59.33%,顶体完整率为78.29%,均显著高于其他处理组(P0.05);在6号自配基础粉中加入10μmol/L Sch B猪精液的有效保存时间为5d,精子活率达到0.61,T-AOC浓度为4.85 U/mL,显著高于其他处理组(P0.05),并使MDA浓度显著降低为1.44nmol/mL(P0.05)。因此,基础稀释粉中添加Sch B可提高猪精液常温保存品质,延长精子有效保存时间,其最佳添加量为10μmol/L。     

维生素P对低温保存猪精液的影响

在猪精液稀释液(Zorlesco)中分别添加0,40,80,120,160,200μg/mL的维生素P,研究其对猪精子低温保存的影响。结果表明,维生素P的添加显著延长了猪精子低温保存时间,在各试验组中,维生素P的最适添加浓度为160μg/mL。在该浓度下,维生素P并对第3天时精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性作用效果不明显(P0.05)。在第6天时,维生素P显著地提高了精子的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率(P0.05),但对精子线粒体活性没有显著影响(P0.05)。在保存第9天时,猪精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性与对照组相比具有显著的提高(P0.05)。     

Gln对猪精液常温保存效果的影响

L-谷氨酰胺具有增强免疫力和抗氧化等生物学作用。为了探究猪常温稀释液中添加L-谷氨酰胺(Gln)对保存效果的影响,本试验在自配基础稀释液中添加0、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L的L-谷氨酰胺,在常温保存过程中,检测精子活率、顶体完整性、质膜完整性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)浓度等指标,分析Gln对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:常温保存的过程中,在基础稀释液中添加4 mmol/L的Gln,精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其他组(P0.05),保存第5天时,精子活率为59%、质膜完整率为47.05%、顶体完整率为74.40%、T-AOC浓度为4.34 IU/m L、MDA浓度为1.51 nmol/m L。因此,添加4 mmol/L的Gln能够提高猪精液常温保存效果,延长猪精液常温保存时间。     

海藻糖对民猪精液冷冻保存的影响

为研究海藻糖在民猪精液冷冻中的作用,获得最佳民猪精液冷冻液成分,本试验在BTS、Modena和Zorlesco 3种稀释液基础上添加0.15 mol/L海藻糖,及在Zorlesco稀释液中分别添加0 mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L和0.2 mol/L的海藻糖,研究海藻糖在不同稀释液中及其不同浓度对冷冻的民猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位的影响。结果表明,在Zorlesco稀释液中添加0.15 mol/L海藻糖可明显提高民猪冷冻精子的质量,使精子活率、质膜完整性、顶体完整率和线粒体活性分别达到(44.0±2.4)%、(58.2±2.4)%、(53.2±2.1)%和(51.3±2.3)%,为各组最佳(P<0.05)。将0.15 mol/L海藻糖分别添加在BTS、Modena和Zorlesco3种稀释液中发现,其中在Zorlesco稀释液添加海藻糖效果优于其他两组(P<0.05)。但海藻糖对冷冻前精子的保护作用不明显(P>0.05)。因此,在Zorlesco稀释液中添加1.5 mol/L的海藻糖能够明显提高民猪精子冷冻后质量,是民猪冷冻保存的适宜保护液。     

羧甲基纤维素钠对4℃保存藏猪精液指标的影响

试验旨在研究羧甲基纤维素钠(CMC)对藏猪精液4℃保存效果的影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,添加不同浓度的CMC(0、6、12、18和24μmol/L),将藏猪种公猪新鲜精液稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率和精子顶体完整率为评价精液品质指标,探讨CMC对藏猪精液4℃保存效果的影响。结果显示:12μmol/L CMC添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率均极显著好于其他试验组(P0.01)。总之,在改进的猪精液稀释液中添加CMC 12μmol/L可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的影响

为探究不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对猪精液常温保存效果的影响,该试验通过在猪精液常温保存基础稀释液中添加0、5、10、20、30、40、50μmol/L EGCG,检测保存过程中精子活率、质膜完整率、顶体完整率等指标.结果表明:⑴猪精液常温保存基础稀释液中添加EGCG可以显著提高精子活率、质膜完整率和顶...     

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。     

壳聚糖、维生素C及庆大霉素对猪精液保存效果的比较分析

随着猪人工授精技术的广泛应用,精液保存技术也迅速发展。为了提高猪精液常温保存的效果,本研究通过向猪精液常温保存稀释液中分别添加0.1 g/L壳聚糖、0.25 g/L庆大霉素、0.068 g/L维生素C,检测1～6 d的精子活力、质膜完整性、顶体完整性和凋亡水平,并与庆大霉素组和维生素C组进行比较。结果表明,在保存6 d后,三组的保存质量显著高于对照组(P0.05),其中添加庆大霉素组的保存质量显著高于其他组(P0.05),稀释液中添加壳聚糖组的保存质量显著高于维生素C组(P0.05),维生素C组的顶体完整率在6 d与对照组无显著差异(P0.05),而添加壳聚糖组6 d的精子活力、质膜完整率和顶体完整率达到61.67%、68.67%、72.67%。稀释液中添加壳聚糖组和添加庆大霉素组,两者之间在保存2 d内差异不显著(P0.05)。壳聚糖组合庆大霉素组的质膜完整率和顶体完整率均高于对照组和维生素C添加组(P0.05)。因此,稀释液中添加0.1 g/L的壳聚糖可达到庆大霉素等传统添加剂的效果,其有效保存时间可达到6 d。     

葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响

为提高精液低温保存质量,在山羊精液低温保存基础稀释液中分别添加浓度为0、10、30、50、70 mg/L葡萄籽原花青素,检测精液保存过程中各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性、T-AOC、MDA等精子质量评定指标,探讨葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响及最适添加浓度。结果表明:一定浓度葡萄籽原花青素可提高精液保存质量,且最适添加浓度30 mg/L。在30 mg/L处理组中,精液各项指标(MDA除外)在保存期间均最高,且5 d时精子活率、顶体完整率.、线粒体活性、T-AOC显著高于其他组(P0.05),其精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%。     

辅酶Q_(10)对湖羊精液常温保存效果的影响

本实验旨在探究辅酶Q_(10)对湖羊精液常温保存效果的影响。选取3只1～2岁的健康湖羊采集精液,在基础稀释液中添加0、5、50、250、500μmol/L的辅酶Q_(10),检测在20℃保存过程中的湖羊精子活力、活率、曲线速度、质膜完整率、顶体完整率和活性氧(ROS)含量等指标。结果表明:随着在常温保存稀释液中添加辅酶Q_(10)浓度的提升,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,当辅酶Q_(10)浓度为50μmol/L时,精子活力、质膜和顶体完整率显著提高,ROS含量显著降低。本实验条件下,在湖羊精液常温保存稀释液中添加50μmol/L辅酶Q_(10)能够提高湖羊精液常温保存效果。     

没食子酸对猪精液常温保存的效果及浓度筛选

本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1～3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。     

褪黑素对羊精液低温保存效果的影响

为研究精液低温保存稀释液中添加不同浓度褪黑素对羊精液低温保存效果的影响,本试验将不同浓度褪黑素(0、10、20、40、80mg/L)添加到羊精液低温保存稀释液中,通过分析5d内各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性等精子质量评定指标的差异。结果表明:经过5d的保存,20mg/L试验组对山羊精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率以及线粒体活性均显著高于其他试验组(P0.05)。说明适度浓度(20mg/L)的褪黑素有利于提高精子保存品质;但随着添加褪黑素浓度的升高(至80mg/L),精子低温保存效果下降明显。     

蛋氨酸碘对常温保存猪精液品质的影响

为探讨蛋氨酸碘杀灭病原菌的效果和对精子质量的影响,以达到阻断病原菌垂直传播的目的,本试验以大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌为试验菌株,通过肉汤二倍稀释法研究蛋氨酸碘的抑菌作用;利用不同浓度的蛋氨酸碘溶液处理猪精液,在保存后不同时间点取样进行精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测细菌菌落总数,采用显微镜镜检法检测精子活力、精子快速染液染色检测顶体完整性和低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性。结果显示,蛋氨酸碘对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为100μL/L;用蛋氨酸碘消毒猪精液时,在0~400μL/L随着蛋氨酸碘溶液体积浓度的增加杀菌效果越好,保存4、5、6 d时100、200、400μL/L处理组与对照组相比细菌菌落数低,且差异显著(P0.05);在猪精液稀释液中添加体积浓度0~100μL/L的蛋氨酸碘对17℃保存猪精子质量无影响,保存3、4、5、6 d时200、400μL/L的处理组与对照组相比,精子活力、质膜完整率和顶体完整率明显降低(P0.05)。表明蛋氨酸碘在体积浓度100μL/L能很好地抑制病原菌的生长,且对17℃保存猪精子质量常规指标(活力、质膜完整率和顶体完整率)无显著影响。     

安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响,本实验采集3只1～2岁健康成年湖羊精液,混匀后取5份等量精液,按1:9的比例加入不同安石榴甙浓度（0、5、15、30、45μmol/L安石榴甙）的稀释液,4℃保存7 d。检测精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）活性等指标。结果显示：保存4～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子活率、活力显著高于其他各组;保存2～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子的MMP显著高于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组精子ROS含量显著低于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液MDA含量显著低于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液CAT活性显著高于其他各组。本研究结果表明,在稀释液中添加30μmol/L安石榴甙可以显著提高精液保存质量。     

两种稀释剂不同稀释倍数对猪精液保存效果的研究

为探讨课题组研制的猪精液17℃常温保存稀释剂在高倍稀释下对猪精子的保护效果,试验以BTS稀释剂为对照组,分别将原精进行1,3,5,10和15倍稀释,以精子有效存活时间内的活力、质膜完整性和顶体完整性为评价指标,研究课题组研制的稀释剂对高倍稀释的猪精液常温保存效果的影响。结果表明,配方组在5倍和10倍稀释时精液有效保存时间分别为8.77 d和8.43 d,在15倍稀释时配方组中精液有效保存时间明显下降,仅为4.56 d。而对照组中,精液最长有效保存时间为3倍稀释下的3.1 d;配方组采用10倍稀释,保存至第3天精子质膜完整率为82%,顶体完整率达87%,与对照组相比差异显著(P 0.05)。试验结论是课题组研制的稀释剂能够使猪精子耐受高倍稀释并具有较好的保护作用。     

水蛭素对猪精液低温保存的影响

为了改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度(0,0.50,1.00,1.50,2.00 mg/mL)的水蛭素,研究在4℃低温保存条件下其对猪精液品质的影响。试验采用PI荧光染色检测精子活率,利用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活力,Diff-Quik染色检测精子畸形率,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整率及采用低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整率。猪精液保存7 d,每天检测上述指标,试验重复5次。结果表明:稀释液中添加一定浓度的水蛭素在一定时间内有利于维持精子的活率、活力,降低精子的畸形率,提高精子的顶体完整率和质膜完整率,并且水蛭素浓度越高,保存效果越好。因此,在本试验条件下,2.00 mg/mL是水蛭素在猪精液低温保存时的最佳添加浓度。     

添加咖啡因、亚牛磺酸对牛精子功能的影响

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因(0、2.5、5.0、7.5mmol/L)或亚牛磺酸(0、5、10、20、40μmol/L)的获能处理液中,且每个处理组加入约200μL的精液,在CO_2培养箱里经上游处理45min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组(P0.05),且2.5mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组(P0.05),且20μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5mmol/L咖啡因组和对照组(P0.05)。因此,20μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。     

锰苯甲酸卟啉对猪精液冷冻保存效果的影响

本实验旨在探究锰苯甲酸卟啉（MnTBAP）对猪精液冷冻保存的影响,从而筛选出适用于猪精液冷冻的MnTBAP浓度。实验一共分为6组：新鲜组、冷冻对照组、不同浓度MnTBAP组（在冷冻液I中添加50、100、150、200μmol/LMnTBAP）,对冷冻后猪精子动力学参数以及活率进行检测,从而筛选出适用于猪精子冷冻的最佳MnTBAP浓度。实验二共分成3组：新鲜组、冷冻对照组、最佳MnTBAP浓度组,对冷冻后猪精子质膜完整率、顶体完整率、DNA碎片指数（DFI）、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）进行检测。结果表明：与其他浓度的MnTBAP组相比,100μmol/L MnTBAP对动力学参数以及活力改善最显著;与冷冻对照组相比,100μmol/L MnTBAP组猪精子质膜完整率、顶体完整率、MMP和抗氧化酶显著升高,DFI、ROS显著降低。综上所述,在冷冻液稀释中添加MnTBAP可以改善猪精液冷冻后的质量,且最适添加浓度是100μmol/L。     

白藜芦醇、绿原酸对新疆驴精液低温保存效果的影响

为探究白藜芦醇、绿原酸对新疆驴精液低温保存效果的影响,本实验在自配稀释液中分别加入白藜芦醇(0、25、50、100、200μmol/L)、绿原酸(0、0.03、0.06、0.09、0.12 g/L),检测精子在此环境下的精子活率、质膜完整性、顶体完整性和超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标。结果表明：随着低温保存时间的延长,100μmol/L白藜芦醇组的精子活率、质膜完整性和顶体完整性高于0μmol/L白藜芦醇组(P<0.05),SOD活性提高(P<0.05);0.06 g/L绿原酸组的精子活率、质膜完整性和顶体完整性显著高于0 g/L绿原酸组(P<0.05),SOD活性提高(P<0.05)。因此,精液稀释液中分别添加100μmol/L白藜芦醇、0.06g/L绿原酸能够显著改善精子质量,提高新疆驴精液的低温保存效果。     

白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响

为研究白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响，实验通过假阴道法采集健康黑头山羊精液，在基础稀释液中分别添加0、25、50、100、200μmol/L白藜芦醇溶液，常温保存过程中检测精子活力、质膜完整率、顶体完整率、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果表明：与0μmol/L组相比，在基础稀释液中添加白藜芦醇能提高黑头山羊常温保存精子的活力、质膜完整率和顶体完整率(P<0.05)，并提升精液T-AOC水平，降低ROS及MDA含量(P<0.05)；其中黑头山羊精液常温保存时白藜芦醇的适宜添加浓度为25μmol/L。本研究证实了在精液稀释液中添加白藜芦醇可改善黑头山羊常温保存的精液品质，保存3 d对母羊受胎率无显著影响。