免疫应激对仔猪理想氨基酸平衡模式影响的研究

采用氨基酸部分扣除法研究了人工诱导免疫应激条件下仔猪可消化赖氨酸（DLys）、蛋氨酸（DMet）、色氨酸（DTrp），苏氨酸（DThr）之间的平衡比例。结果表明：仔猪处于正常和免疫应激条件下的理想氨基酸模式存在差异，应激条件下，以可消化氨基酸为基础的这4种氨基酸的平衡比例为DLys100、DMet27、DTrp29、DThr59；正常条件下为DLys100、DMet30、DTrp21、DThr61。     

小檗碱对脂多糖致肠黏膜微血管内皮细胞NO分泌的影响

小檗碱属于异喹啉类生物碱，也称黄连素，常用其盐酸盐，为毛莨科黄连属植物黄连、黄柏的根茎提取物的主要成分，临床上用于治疗菌痢、肠炎、急性扁桃体炎和急性支气管炎等多种疾患。关于小檗碱的抗炎机制目前尚不清楚。本试验采用体外细胞培养技术，观察了小檗碱对肠黏膜微血管内皮细胞NO分泌的影响，以期从细胞水平探讨其抗炎机理。     

鸡白痢沙门氏菌脂多糖的保护性作用

用被动保护试验的方法,通过比较抗脂多糖（ＬＰＳ）血清组与ＬＰＳ中和抗鸡白痢血清组的ＬＤ５０,证明了ＬＰＳ的保护性作用。与攻菌对照组的ＬＤ５０相比,抗ＬＰＳ血清组有非常显著的差异（０．００２＞Ｐ＞０．００５）,ＬＰＳ中和抗鸡白痢血清组有显著差异（０．０２＞Ｐ＞０．０５）。试验证明,ＬＰＳ是鸡白痢沙门氏菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌａｐｕｌｏｒｕｍ）菌体主要的保护性抗原之一。     

金荞麦对脂多糖诱导小鼠小肠炎症的保护作用

为探究金荞麦对脂多糖（LPS）诱导的小鼠小肠炎症的保护作用,试验使用雌性ICR小鼠,前期14 d饮水添加不同浓度金荞麦和阳性对照品——芦丁（Rutin）,随后腹腔注射LPS（10 mg/kg）构建小肠急性炎症模型,通过观察小鼠行为变化、血常规检测、组织切片和炎症相关基因定量检测等评估效果。结果发现,腹腔注射10 mg/kg的LPS可成功诱导小鼠急性肠炎;添加金荞麦能够剂量依赖性地降低LPS诱导的肠炎小鼠体重损失。血常规检测显示,腹腔注射LPS后导致小鼠血液白细胞数（WBC）、红细胞数（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板数目（PLT）显著下降,添加金荞麦或芦丁能一定程度缓解由于LPS引起的血常规异常。小肠切片HE染色结果显示,腹腔注射LPS后小肠固有层中间出现大量灶性的炎性细胞浸润,腺上皮可见少量的炎性细胞浸润,肠道细胞排列紊乱,可见核分裂及核碎裂,同时黏膜充血、出血严重;添加金荞麦或芦丁能一定程度抑制炎性细胞浸润和黏膜出血。实时荧光定量PCR结果显示,腹腔注射LPS能显著促进小肠促炎性因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达,添加金荞麦能剂量依赖性下调TNF-α和IL-1β的表达水平。以上结果表明饮水添加金荞麦和芦丁可以有效缓解LPS诱导的小鼠小肠炎症,金荞麦浓度为12%的添加剂量在部分指标上可达到或接近灌胃100 mg/kg芦丁的效果。     

不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖对鲤免疫活性的比较

采用不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖（ＬＰＳ）作为抗原、对鲤注射免疫后，通过测定受免鲤血清中凝集抗体效价、沉降抗体、白细胞吞噬活性和进行强毒攻击的方法，比较了不同方法提取ＬＰＳ的免疫原性，结果表明，Ｂｏｉｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法较ＥＤＴＡ法提取ＬＰＳ的免疫原性强，而Ｂｉｏｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法提取ＬＰＳ的免疫原性则没有明显差别。     

N-乙酰半胱氨酸对仔猪空肠黏膜氧化损伤的缓解作用

试验主要研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激仔猪空肠黏膜所致氧化损伤的保护作用。试验分体外试验和体内试验两部分。体外试验:采用2×2因子试验设计,LPS刺激和NAC添加量(0、5 mM)为2个主效应,共4个处理组。选取两头健康仔猪,分别腹膜注射100μg/kg BW的LPS和相应剂量的灭菌生理盐水。12 h后屠宰,取空肠细胞,在加有0或5 mM NAC的KHB缓冲液中孵育30 min后,检测细胞存活率和氧化状态。体内试验:选用18头健康仔猪,随机分为3个组(对照组、LPS组、LPS+NAC组)。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,LPS+NAC组饲喂基础饲粮+0.05%NAC。在试验第17 d,LPS组和LPS+NAC组仔猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水。6 h后屠宰,刮取空肠黏膜,检测其氧化状态。结果显示:①体外试验,LPS刺激降低空肠细胞存活率(P<0.01),在缓冲液中添加NAC可提高空肠细胞存活率(P<0.01);LPS刺激增加了空肠细胞丙二醛(MDA)水平(P<0.01),添加NAC后MDA的水平显著降低(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)活性有提高的趋势(P<0.1);②体内试验,LPS刺激降低仔猪空肠黏膜超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.05),饲粮中添加NAC后,SOD活性提高(P<0.05),MDA水平有降低的趋势(P<0.1)。以上结果表明,NAC可有效缓解仔猪空肠黏膜的氧化损伤。     

宰前免疫应激对肉鸡抗氧化性能与肉品质的影响

 研究旨在探讨细菌脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)诱导的宰前免疫应激对肉鸡抗氧化性能和肉品质的影响。24只体重相近的39 d肉仔鸡随机分为3组, 两个试验组分别在39 d、40 d和41 d腹部皮下注射LPS生理盐水稀释液(1 000和2 000 μg/kg BW),对照组注射等量生理盐水。结果表明,与对照组相比,胸肌pH24h极显著下降（P<0.01）,失水率极显著增高（P<0.01）,4 ℃保存3 d b*值和6 d的L*值显著升高（P<0.05）;腿肌pH45min及pH24h均极显著下降（P<0.01）,4 ℃保存3 d b*值显著升高（P<0.05）;血浆、胸肌和腿肌MDA含量均显著升高（P<0.05）,血浆T AOC极显著降低（P<0.01）。本研究表明宰前免疫应激会引起肉鸡机体氧化损伤和抗氧化机能下降,进而导致肉鸡生长性能和肉品质显著下降,而且这些负面效应的大小取决于应激强度。     

1,25-( OH)2D3及LPS对2型糖尿病肾病尿毒症患者单核细胞维生素D受体表达的影响

目的 探讨1,25-(OH)2D3及TLR4配体(脂多糖,LPS)对2型糖尿病(T2DM)和糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)尿毒症患者血清干预的单核细胞维生素D受体(VDR)表达的影响,进一步探索1,25-( OH)2D3在T2DM和DN炎症性免疫反应中的作用.方法 分离研究对象(健康对照组、T2DM组和DN尿毒症组)外周血血清,孵育THP-1单核细胞,然后于含或不含10-7 mol/L的1,25-(OH)2D3培养液中培养48 h后,再用终浓度为1μg/ml的LPS干预24h,收集单核细胞和培养上清.采用RT-PCR检测VDR mRNA表达,Western blot、免疫荧光检测THP-1单核细胞内VDR蛋白表达.ELISA法检测细胞培养上清IL-6和IL-10浓度.结果 与正常对照组比较,在LPS的刺激下T2DM组和DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR mRNA水平下调[对照组(0.99±0.25);T2DM组(0.65±0.24);DN尿毒症组(0.62±0.27),P＜0.05];DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR蛋白表达比正常对照组和T2DM组显著下调[对照组(0.48 ±0.05);T2DM组(0.50±0.06);DN尿毒症组(0.20±0.01),P＜0.01],且LPS增强以上患者血清孵育的THP-1单核细胞炎症细胞因子IL-6的分泌[对照组(15.13±1.61);T2DM组(24.06 ±2.92);DN尿毒症组(70.77 ±5.48),P＜0.05];而1,25-(OH)2D3可部分阻断上述作用.结论 LPS能下调T2DM和DN尿毒症患者单核细胞VDR mRNA和蛋白的表达,引起促炎和抗炎细胞因子失调.1,25-(OH)2D3可部分逆转LPS的作用,对T2DM和DN尿毒症可能具有一定的保护作用.     

SHP1在PRRSV诱导的抗病毒免疫反应中的作用

为了探究SHP1在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)诱导的抗病毒免疫中的作用,本研究采用200个TCID50的PRRSV感染猪肺巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM),分别培养12,24,36,48h后收集细胞及上清,分别设正常细胞对照组,聚肌胞(polyinosinic-polycytidylic acid,polyI:C)刺激对照组,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激对照组。采用ELISA方法检测PRRSV感染的PAM培养上清中SHP1的蛋白表达情况。用实验室已经建立的实时荧光定量PCR方法对PRRSV感染组和各个对照组PAM细胞中IRF3、IRF7、TRAF6、NF-κB、SHP1和IFN-β的mRNA转录水平变化进行定量分析。结果显示:激活的SHP1对PRRSV感染后PAM中IRF7、NF-kB和IFN-β的转录有促进作用,对IRF3和TRAF6的转录有抑制作用。LPS及Poly(I:C)刺激PRRSV感染的PAM细胞均促进了IRF3、IRF7、TRAF6、NF-κB、SHP1和IFN-β的转录。结果表明,激活的SHP1会通过TLR介导的信号通路或未知通路来调节PRRSV诱导的抗病毒免疫反应水平。LPS和Poly(I:C)刺激PRRSV感染的PAM细胞能够增强抗病毒细胞因子的转录水平。     

谷氨酰胺对脂多糖应激仔猪生长性能及血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加谷氨酰胺(Gln)对断奶仔猪不同阶段生长性能的影响,以及其对脂多糖(LPS)诱导肠道损伤后断奶仔猪血清生化指标和生长性能的影响。选用24头28日龄健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,Gln+LPS组饲喂添加了1%的外源性Gln的基础饲粮;在试验第22、25、28、30天,LPS组和Gln+LPS组腹腔注射100μg/kg BW LPS,对照组则注射相同剂量的生理盐水。试验期30 d。结果表明:1)LPS处理前(试验第1~21天),与对照组相比,Gln+LPS组显著提高了试验第1~7天断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)(P0.05),显著提高了试验第8~14天和第1~21天断奶仔猪的ADFI(P0.05)。2)LPS处理后(试验第22~30天),对照组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均显著高于LPS组和Gln+LPS组(P0.05),Gln+LPS组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均高于LPS组(P0.05)。3)LPS组断奶仔猪的小肠长度显著低于对照组和Gln+LPS组(P0.05),而对照组和Gln+LPS组之间无显著差异(P0.05)。4)与对照组相比,Gln+LPS组断奶仔猪的血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低(P0.05),而Gln+LPS组与LPS组之间无显著差异(P0.05);Gln+LPS组和LPS组断奶仔猪的血清免疫球蛋白M(Ig M)含量显著提高(P0.05)。由此可见,饲粮中添加1%的Gln能够显著提高仔猪断奶后第1~7天的生长性能,之后效果不明显。饲粮中添加1%的Gln能够调节应激仔猪的血清生化指标,改善其生长性能和小肠长度,从而缓解仔猪断奶应激。