毛细管胶束电动色谱法测定血清中华法林浓度的评价

目的：毛细管电泳是近年发展起来的一种新的分离分析技术，其最大特点是分辨能力强，快速，样品和试剂消耗量小。该技术在体液药物分析领域的应用还有待进一步的开发。本文建立了毛细管胶束电动色谱分析血液中华法林药物浓度，并与反相高效液相色谱法进行了比较，旨在为血药浓度检测开辟一种新的途径。方法：ＢｉｏＦｏｃｕｓ３０００型全自动毛细管电泳仪，配有二极管阵列检测器，毛细管有效长４５．５ｃｍ。用二氯甲烷提取血清中华法林，有机溶剂于４０℃自然挥干，残渣用５０μｌ电泳缓冲液溶解。电泳缓冲液由２５ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸盐，２５ｍｍｏｌ／Ｌ十二烷基硫酸钠，１０ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钠（ｐＨ９．０）组成。５－乙基－５－ｐ－甲苯基巴比妥酸为内标，操作电压１５Ｋｖ，２１０ｎｍ波长检测。结果：华法林出峰时间为６．１ｍｉｎ，血中内源性物质不干扰测定。日内ＲＳＤ１．４％～６．２％，日间ＲＳＤ１．４％～４．７％，在０～１０ｍｇ／Ｌ范围内呈线性，最低血清华法林检测浓度为０．０３ｍｇ／Ｌ。测定结果与高效液相色谱法进行了比较，两种方法有很好的相关性，ｒ＝０．９９６７（Ｐ＞０．１）。结论：毛细管胶束电动色谱法精密度、准确度高、专一性强、快速，是一种较理想的血药浓度检     

广东医学院学报第三届编辑委员会

主　　　编： 梁念慈 　　　　副　主　编： 龙　尧(常务)　朱家勇　周克元 　　　　编　　　委： (排名不分先后) 莫丽儿　吴志华　李永全　周　磊　吕端远　刘　锋 孙　宏　王伯章　刘锡仪　王惠英　梁念慈　傅志刚 凌光鑫　周克元　陈　群　汤少明　朱家勇　罗少军 唐慰萍　王宗锐　孙　宁　周光纪　吴　铁　陈小毅 赖琴英　龙　尧　陈孝文　麦铁江　唐德　李英勇 林木生　郑德元　张光休　韩清韶　刘维藩　邢永前 李青南　刘国勋　孙显斌　莫振兆　陈铭珍　夏小明 李普云　阎亦农　樊翌明 　　本期执行编辑：邓丽琼　　　本期技术编辑、责任校对：陈庆山     

毛细管电泳法测定人血清中草酸浓度

在已报道的草酸测定方法中，主要有比色法、酶分析法、气相色进法及高效液相色谱法，而用毛细管电泳法测定人血清中草酸含量国内报道甚少，为此，笔者作了研究，现将结果报道如下：1材料与方法1．1仪器Bio-Rad3000毛细管电泳仪，石英毛细管柱25μm（id）×24cm（涂层、Bio－Rad公司）1．2样品预处理取血清1ml，加丙二酸作内标，加4满浓HCl，再加0．5gNaCl和0.1NHCl0．5ml到血清中，振荡后加入2ml乙酸乙酯，振荡1min，3000r／min离心，转移有机层，再用2ml乙酸乙酯重复萃取一次，合并两次有机层，在35C通空气吹干，残渣用10VI电泳缓冲…     

靶基因Bi-1RNAi重组慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建靶向人Bax Inhibitor-1（Bi-1）基因的shRNA慢病毒重组载体。方法借助siRNA设计工具,并结合文献资料选取Bi-1基因编码序列中有效的干扰靶点,根据连接载体中的酶切位点自行设计并人工合成干扰靶点的一对反义脱氧寡核苷酸链,先定向克隆到pU6载体（pU6-Bi-1-shRNA）,再经双酶切后克隆到慢病毒包装质粒LunIG,得到靶向Bi-1基因沉默的慢病毒包装重组质粒LunIG-Bi-1。重组质粒经PCR法进行初筛后,再通过双酶切电泳和目的基因沉默效果的检测保证插入序列的正确性。结果靶向沉默Bi-1基因的shRNA序列成功插入到慢病毒包装质粒LunIG中。结论靶向Bi-1基因沉默的慢病毒shRNA包装重组质粒构建成功。     

提高《生物化学与分子生物学实验课》教学质量的孔见

本文分别从培养学生的学习兴趣、培养学生良好的学习习惯和开设设计性实验三方面,就如何提高生物化学与分子生物学实验教学质量和教学效果进行了阐述。