壳多糖转化为壳聚糖的反应条件的研究

在实验室条件下研究了碱浓度、反应温度和时间对壳多糖转化为壳聚糖脱乙酰度的影响。脱乙酰度随碱浓度、温度和时间的增高而增大。结果表明,壳多糖用40％NaOH,在100℃处理6.5～7小时,其脱乙酰反应产     

转染抑癌基因PTEN对人乳腺癌ZR-75-1细胞的细胞周期和增殖能力的影响

目的：观察PTEN（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten，第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因）对人乳腺癌细胞ZR-75-1细胞增殖和细胞周期的影响。方法；利用脂质体介导法将携带有野生型和突变型PTEN cDNA的真核表达载体pBP—wt—PTEN和pBP—G129R—PTEN导八人乳腺癌ZR-75-1细胞（质粒转染成功后实验分为C—WT—PTEN组、CG129R—PTEN组和未转染质粒组即对照组）后，以RT—PCR、Western blot分析目的基因的表达，并采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。结果：C—WT—PTEN组、C—G129R—PTEN组细胞PTEN mRNA及PTEN蛋白出现明显的高表达。C—WT—PTEN组细胞生长的抑制率可高达42．7％，与对照组比较．差异有显著性（P〈0．05）。但C—G129R—PTEN组细胞生长的抑制率与对照组比较，差异无显著性（P〉0．05）。流式细胞术显示C—WT—PTEN组细胞周期从G1期到S期已发生抑制。结论：野生型PTEN可依赖其磷酸酶活性抑制肿瘤细胞的增殖,并最终诱导细胞凋亡。     

玫瑰茄化学成分的研究

锦葵科木槿属草本植物玫瑰茄广泛栽种于世界各热带,亚热带地区,我省亦见栽培。玫瑰茄的叶、花,花萼及种子含有多糖,有机酸(除常见的乙醇酸、柠檬酸外,尚有一种于植物界罕见的“木槿酸”)、天然色素、蛋白质及维生素 C 等多种化学成分。其花及花萼广泛用作食品添加剂、饮料(如玫瑰茄可乐型饮料)及酿酒(如红玫香槟酒)等的原料。近年来,玫瑰茄的促进机体免疫与新陈代谢和降低血压的功效,亦不乏报道。由于它在食品工业和制药     

PTEN磷酸酶活性对人乳腺癌ZR-75-1细胞的迁移及粘着斑激酶磷酸化水平的影响

目的:探讨PTEN磷酸酶活性对ZR-75-1人乳腺癌细胞迁移及粘着斑激酶磷酸化水平的影响。方法:用有和无磷酸酶活性的两种PTEN表达质粒(W t和G 129)转染人乳腺癌细胞株ZR-75-1,用人工基底膜侵袭试验检测其转染前后的迁移能力,以W estern-b lot检测未转染的ZR-75-1和两种表达质粒的ZR-75-1磷酸化粘着斑激酶水平。结果:转染后有磷酸酶活性、无磷酸酶活细胞与未转染ZR-75-1细胞间侵袭抑制率、运动抑制率差异有显著性(P<0.01)。各组细胞间总FAK(粘着斑激酶)水平无明显差异,而W T-PTEN与G 129和ZR-75-1组FAK 397位酪氨酸磷化水平有明显差异。结论:PTEN具有抑制乳腺癌细胞ZR-75-1转移的作用,其机制可能与PTEN使FAK去磷酸化有关。     

野生型PTEN基因重组腺病毒表达载体构建的改进及其鉴定

目的为改进构建野生型抑癌基因PTEN重组腺病毒表达载体的方法。方法用抑癌基因PTEN与带有绿色荧光蛋白基因的穿梭载体pAdTrack-CMV重组后转化含腺病毒骨架载体pAdEasy1的E.coliBJ5183(Ad-1 cells),以获得重组腺病毒质粒,经限制酶PacⅠ线性化后,转染293细胞,检测PTEN蛋白的表达,并以Ad-PTEN感染人乳腺癌MCF-7细胞后,测其感染率。结果获得PTEN基因的重组腺病毒表达载体(Ad-PTEN),受Ad-PTEN转染的293细胞发生肿胀或圆缩的形态改变,经PCR对传代的Ad-PTEN分析证实得到目的基因PTEN,荧光显微镜下能观察到293细胞内有绿色荧光。通过Western blot可检测到293细胞中PTEN蛋白高效表达。Ad-PTEN感染的人乳腺癌MCF-7细胞,感染率达80%~90%。结论PTEN重组腺病毒表达载体可在细菌体内进行同源重组而构建,方法较简便、快速,且生成的病毒滴度高、感染率高。     

基因治疗乳腺癌的研究进展

乳腺癌是一种常见的妇科肿瘤,约占全身恶性肿瘤的7%~10%,近20年来在我国的发病率逐渐升高,已严重威胁女性健康,仅次于宫颈癌。针对早期(Ⅰ、Ⅱ期)乳腺癌的治疗方法有外科手术切除、放疗、内分泌治疗以及使用抗肿瘤药物进行治疗(如紫杉醇、维甲酸类等),但对晚期乳腺癌的治疗效果     

PTEN信号途径与肿瘤相关研究进展

PTEN是一种抑癌基因表达蛋白,具有双特异性磷酸酶活性,参与多种信号途径的调节。PTEN活性的缺失与人类多种疾病相关,特别是在肿瘤的发生上极为常见。近年来,研究人员对PTEN的研究主要集中在自身的转录调控和不依赖于PIP3激酶的信号途径上。本文就PTEN在信号途径及其与肿瘤相关中的研究进行综述。     

抑癌基因PTEN与细胞凋亡关系的研究进展

PTEN是近期发现的一种新型肿瘤抑制基因,现已证明PTEN基因是第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,不仅参与细胞周期的调控,而且调节细胞的正常生长和发育,最终促进细胞凋亡。PTEN基因是继p53之后,另一个在肿瘤细胞中突变与缺失较为广泛,与细胞的生长及凋亡关系密切的抑癌基因,现就其与细胞凋亡的研究进展作一综述。     

用PCR－单链构象多态性分析HLA－DRB基因

用ＰＣＲ－单链构象多态分析法对９例ＨＬＡ－ＤＲ血清学特异性不同的血痕样本作ＨＬＡ－ＤＲＢ基因分析，结果显示各个样品均具独特的电泳图型。对ＤＲ血清学特异性一定的样品，电泳图型具有良好的重复性。