单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制

利用柠檬酸钠还原氯金酸,形成胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒标记单克隆抗体4E8,用兔抗鼠二抗喷洒在硝酸纤维素膜上作为对照线,用另一株单抗5E6作为检测线,制备成胶体金试纸条。用试纸条检测120份泄殖腔样品,结果与病毒增殖后HA法测得的结果符合率为95.8%,HA效价在1∶2以上,试纸条均能检测为阳性,与其他病毒的阳性血清没有交叉反应,且室温下可有效保存6个月。试纸条应用方便、快速,适合临床推广以及流行病学调查。     

EM制剂对海兰蛋鸡免疫和蛋品品质的影响

用微生态制剂将饲料充分发酵,发酵料按20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的比例与未发酵料混合全过程饲喂海兰蛋鸡,并设只饲喂未发酵料的对照组。分别在免疫传染性喉气管炎疫苗和新城疫Ⅳ系苗后测定T细胞在淋巴细胞中的比例和抗体水平。在此次试验中对照组与试验组及试验组间免疫器官重量差异不显著,这一点与以往的试验结果有所差异,但是T细胞在淋巴细胞中的比例和抗体水平上试验组与对照组却存在显著差异,这方面与以往试验结果相符。另外发现各处理组鸡蛋中脂肪含量和胆固醇含量差异显著,发酵饲料占总饲料量80%~100%时胆固醇含量下降到最低;对鸡蛋内蛋白质、干物质重和蛋重进行了测定,结果各处理组间其含量差异不显著;发酵饲料的脂肪含量和胆固醇含量都显著下降。但是随着发酵饲料比例的增大,蛋鸡的生产性能降低,全部饲喂发酵饲料的产蛋率比对照组下降了40%,甚至有的鸡只不产蛋,同时有较多的啄羽现象出现。     

Race法扩增4株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析

利用3′RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3′末端真实序列,包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3′端非编码区(untranslated region,UTR)和poly(A)尾巴.测序结果表明,扩增的特异性片段长度为597 nt(不包括polyA尾巴).各毒株3′UTR均为315 nt,位于终止密码子TGA之后,比对分析结果表明各毒株间的同源性较高;4株DHV 3′末端核苷酸序列(不包括polyA尾巴)之间的同源性为96.3%～100%,而与参考毒株之间的同源性为93.5%～99.7%.在系统发生进化树上,各毒株亲缘关系较近.     

鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌双型融合菌株的构建

以耐药标记的鸭疫里默氏杆菌TXRA1(Chlr,Erys)和大肠杆菌ZBO78(Eryr,Chls)作为亲本菌株,在DnaseⅠ始终存在的条件下,采用Lysozyme-EDTA法制备2菌株的原生质体,原生质体制备率分别达到了92.00%和91.94%,再生率分别达到了38.77%和37.29%。通过PEG法进行2菌株原生质体融合,成功获得31株具有双亲本耐药性(Chlr,Eryr)的融合菌株,并应用双重PCR方法对融合株的部分外膜蛋白A(ompA)基因进行扩增,其中有11株融合菌株能够表达2亲本的ompA基因,有20株仅表达亲本大肠杆菌的ompA基因。融合菌株的形态、染色特性和生化特性等介于2亲本菌株之间,连续传15代后融合菌株的上述性状仍能够稳定遗传。     

J亚群禽白血病研究进展

J亚群禽白血病病毒是上世纪90年代初从商品代肉鸡中分离鉴定出来的新的ALV亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病(myloid leucosis,ML)。2009年,J亚群禽白血病在我国呈高发态势。我国于1999年首先在肉用型鸡群分离鉴定出ALV-J的中国株,随后相关研究依次展开。论文就ALV-J的流行病学、检测方法、病毒变异、免疫抑制及与其他免疫抑制疾病共感染等几个方面进行了简要介绍。     

鸡新城疫病毒与大肠杆菌内毒素的相互作用

利用细胞培养、鸡胚及 8周龄幼鸡对鸡新城疫病毒 ( NDV)与大肠杆菌内毒素的相互作用进行了研究。这些相互作用通过在宿主系统中诱导产生的特异性或非特异性反应 ,以及在鸡胚和鸡体内产生的病毒滴度得到评价。1　大肠杆菌内毒素可导致活鸡法氏囊萎缩给鸡静脉注射大肠杆菌内毒素诱导产生的血液抗病毒活力成分称为干扰素 ,与在水泡性口炎病毒蚀斑减少试验中所检出的结果相同。因在鸡胚成纤维细胞 ( CEF)上 NDV蚀斑形成的数量没有发生变化 ,所以内毒素不对鸡胚成纤维细胞造成毒害 ,也不导致任何抗病毒效应。鸡群感染 NDV前 3d注射大肠杆菌…     

小反刍兽兽疫的检疫

小反刍兽兽疫(peste des petits ruminants, PPR)又称小反刍兽假性牛瘟或羊瘟,是由副黏病毒科麻疹病毒属小反刍兽兽疫病毒引起的一种急性接触传染性疾病.主要感染小反刍兽,特别是山羊高度易感,野生动物也可偶然发生.     

牛海绵状脑病的卫生检疫

牛海绵状脑病（Bovinespongiformencephalopathy，BSE）是由非常规的传染性因子引起、潜伏期很长、病势逐渐加重并以死亡为转归的牛的一种中枢神经系统疾病。其病理学特征为中枢神经系统的灰质形成海绵样空泡。据此将本病命名为牛的海绵状脑病。英国于1986年首先发现BSE，这种病的原始型是山羊和绵羊的痒病（ScraPie）。本病在美国、爱尔兰、瑞典、法国、瑞士、丹麦、阿曼苏丹、福克兰群岛都有发生。1992年5月，国际兽疫局（OIE）召开的第60次会议上，将BSE列为重点疫病，放在牛的卫生检疫上，对BSE进行充分了解和监视是十分必要目…     

6株H9N2禽流感病毒分子进化及对小鼠的致病性

2009年从山东不同地区的规模化肉鸡场中分离到6株H9N2亚型流感病毒,对其分子特征进行分析,发现6株病毒可以分为2个不同的基因型,并且其中一个基因型是CK/SH/F/98（H9N2）和CK/SH/Y2/2008（H9N2）的重组病毒。为阐明H9N2流感病毒对哺乳动物致病性,分别以106 EID50剂量攻毒6周龄BALB/c雌性小鼠,6株病毒都能在小鼠肺脏中复制,而且2株病毒能在攻毒7d后引起小鼠死亡。结果表明,H9N2亚型流感病毒对哺乳动物毒力有增强趋势。     

猪细小病毒NS1基因低温诱导表达及间接ELISA方法的建立

利用PCR技术从猪细小病毒的DNA模板中扩增了NS1的基因片段,将PCR产物克隆至pET32c载体,将构建好的重组质粒pET32c-NS1,转入表达宿主茵BL21中,利用低温诱导表达的方法,避免了包涵体的形成.West-ern-blot结果显示,表达产物有良好的生物活性.纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被质量浓度为2.5 mg/L、血清最佳稀释度为1∶200.表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂用于检测PPV,且能很好的区别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪.