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鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法。根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670 bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性;将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌;建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带。结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值。 相似文献
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鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
为了表达鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A(ompA),参照其已知的全基因序列设计1对特异性引物,经PCR扩增得到目的片段约1 200 bp,然后克隆入pET-28a(+)载体中,经测序比较,与标准序列的核苷酸同源性达99.8%;同时经诱导表达后,SDS-PAGE结果显示,ompA得到高效表达,Western-blotting检测,RA1,RA2,RA 10,RA11型全菌兔血清呈阳性,而阴性兔血清不反应。说明表达蛋白具有高度免疫反应特异性。 相似文献
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霍翠梅 《河南畜牧兽医(综合版)》2005,26(10):50-50
2005年1月15日山东省金乡县一养殖户猪场内猪只突然连续发生急性死亡。病死猪在死亡前没有发现明显临床症状,往往是突然倒地而死。经过临床调查、剖检变化、实验室诊断,诊断为链球菌感染,立即采取得力措施控制了疫病的进一步发生。1发病情况2005年1月15日金乡县一养殖户主诉:养 相似文献
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用微生态制剂将饲料充分发酵,发酵料按20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的比例与未发酵料混合全过程饲喂海兰蛋鸡,并设只饲喂未发酵料的对照组。分别在免疫传染性喉气管炎疫苗和新城疫Ⅳ系苗后测定T细胞在淋巴细胞中的比例和抗体水平。在此次试验中对照组与试验组及试验组间免疫器官重量差异不显著,这一点与以往的试验结果有所差异,但是T细胞在淋巴细胞中的比例和抗体水平上试验组与对照组却存在显著差异,这方面与以往试验结果相符。另外发现各处理组鸡蛋中脂肪含量和胆固醇含量差异显著,发酵饲料占总饲料量80%~100%时胆固醇含量下降到最低;对鸡蛋内蛋白质、干物质重和蛋重进行了测定,结果各处理组间其含量差异不显著;发酵饲料的脂肪含量和胆固醇含量都显著下降。但是随着发酵饲料比例的增大,蛋鸡的生产性能降低,全部饲喂发酵饲料的产蛋率比对照组下降了40%,甚至有的鸡只不产蛋,同时有较多的啄羽现象出现。 相似文献
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