一株凝结芽孢杆菌的分离筛选及生物学特性研究

研究采用改良MRS培养基,从土壤中分离一株能抑制常见病原菌的产酸芽孢杆菌。该菌株对大肠杆菌(EscherichiacoliO139、E.coliK88、E.coliK99)、伤寒沙门氏菌[Salmonella typhimurium O4H(iSTO4Hi)]、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等均有较强的抑制作用,经生理生化试验和16SrDNA序列分析鉴定为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。该菌株模拟胃液处理30min后存活率为91%,耐胆盐浓度达3.0%,小鼠急性毒性试验结论为无毒无害物质。研究结果表明,该菌株可以顺利通过胃酸进入小肠后开始作用,改善肠道微生态环境,具有作为微生态制剂菌株的应用潜力。     

微生物固体发酵物作复合酶饲料添加剂的研究

微生物固体发酵物作复合酶饲料添加剂的研究华中农大微生物科技系刘亚力，梁运祥，闫淳泰复合酶饲料添加剂是饲料添加剂中新兴的一员，近年来研究、发展得很快。但目前研究中使用过或市场上已有的复合酶（包括进口产品），基本上是由几种纯酶制剂按一定配方复配、稀释而成...     

苎麻酶法脱胶的研究

用果胶酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶进行苎麻酶法脱胶，分别进行每种酶的单一酶脱胶和3种酶联合脱胶实验，研究这3种酶对脱胶的作用。     

固体发酵复合酶在肉鸡生产中的应用

当前，用作饲料添加剂以复合酶，多为几种纯酶按一定配方复配、稀释而成。成本高，酶系不全面。我们采用固体发酵方法，将几种业已应用于食品酿造行业的微生物菌株（安全菌株），直接发酵，一次生产而成复合酶，其成本低，投资少，酶系全面又有所侧重，可满足饲料成分复杂性的需要，为验证其使用效果，进行了对肉鸡生产性能影响的试验研究。1材料与方法1.l复合酶制剂固体发酵法生产的微生物培养物，其中含13种胞外水解酶，已测出活性的有10种，活性较高的是：半纤维素酶（2293.34U）、β—l.4葡聚糖酶（965.53U）、酸性蛋白酶（2103.30U）…     

生物强化生态系统处理养殖沼液的研究

在养殖场构建生物强化生态系统处理沼液,主要通过利用特异性微生物和滤食性鱼类,建立高效的沼液营养—微生物（饵料）—鱼转化系统,达到治理沼液和资源化利用沼液的双重目的。本研究解决了传统方法占地面积大的应用瓶颈问题,达到在保持原有方法操作简单、运行费用低廉的基础上,由传统的一头猪需要10m2水面降低到1～2m2水面,根据沼液氮、磷、COD（化学需氧量）含量高等特点,选择高效矿化微生物加强对沼液有机质分解,选择硝化、反硝化微生物加强对氮的脱除,选择乳酸菌加强对大肠杆菌等病原菌控制,选择光合细菌加强对氮磷的生物转化,选择放养滤食性鱼种加强对浮游生物的转化。经过生物转化后,其排放指标达到国家污水处理二级排放标准,部分指标达到国家污水排放一级标准,而且养鱼经济收益超过运行成本且有盈余,为沼液治理及其资源化利用提供切实有效方法。     

黑曲霉木聚糖酶基因（xynA）在大肠杆菌中的表达及酶学分析

从黑曲霉(Aspergillus niger)F19中克隆得到木聚糖酶基因xynA.将不带原基因信号肽编码序列的xynA基因段以正确的阅读框架克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-28a(+)上,并转化E.co-li BL21,获得重组工程菌BLX1.经过IPTG诱导,xynA获得特异性表达,其表达产物以包涵体和胞内可溶性蛋白2种形式存在.经过SDS-PAGE分析,重组蛋白分子质量约为24 ku.酶学分析表明,最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.0,在酸性条件下具有较好的稳定性.     

提高耐热链霉菌转化泰乐菌素能力的分子改造与育种

BIB0830是将泰乐菌素转化为乙酰异戊酰泰乐菌素(AIV)的耐热链霉菌(Streptomyces thermotolerans)工业菌株。以pIJ8600为载体分别构建了acyB1-B2基因整合型表达载体pBIB425和带红霉素突变启动子ermEp*的红霉素抗性ermE基因整合型表达载体pBIB304。通过大肠杆菌(Escherichia coli)-链霉菌属间接合转移分别将pBIB425、pBIB304和pBIB308(耐热链霉菌的nsdA基因中断载体)导入工业菌株BIB0830,抗性筛选分别得到接合子BIB425、BIB304和BIB308。经PCR验证均为阳性克隆。摇瓶发酵结果表明,与出发菌株BIB0830相比,BIB425和BIB308泰乐菌素转化率分别提高了14%和22%,而BIB304则无明显影响。     

1株热带假丝酵母发酵木糖产乙醇的特性研究

对1株热带假丝酵母Candida tropicalis在不同的发酵条件下发酵木糖产乙醇的特性进行研究。结果表明:溶氧浓度对乙醇的产量和产率有很大影响,适中的溶氧浓度有利于菌体生长和乙醇的积累;较高的起始菌体浓度和尿素添加量对乙醇的生产积累有促进作用;在碳源和氮源充足的情况下,延长发酵时间,乙醇的产量最高达到25.58 g/L的稳定状态,菌体生长也趋于平稳,浓度为6.54×108/mL。     

泉古菌Sulfolobus islandicus PCNA1的原核表达及其多克隆抗体的制备

泉古菌Sulfolobus islandicus中PCNA有3个同源类似蛋白,本研究选取PCNA1作为研究对象,为获得可溶性表达的PCNA1蛋白,制备多克隆抗体,深入了解PCNA1基因的功能,将PCNA1基因片段克隆到组氨酸标签融合的表达载体pET30a中,利用IPTG诱导,金属螯合亲和层析进行纯化分析表明,融合蛋白大部分可溶。紫外分光光度法测定纯化蛋白的纯度可达90%以上,浓度约为2 mg/mL。免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗血清效价可达1∶10 000以上,Western印迹检测证明抗体特异性良好。     

响应面法优化紫红红球菌的发酵培养基

采用响应面法优化腈水合酶产生紫红红球菌的发酵培养基。以天冬酰胺、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、酵母抽提物、脲素、氯化钴为影响因子,以菌体干质量和酶活为响应值,进行多元二次响应回归分析,结果显示,最优培养基为:天冬酰胺含量0.04%、磷酸氢二钾0.05%、磷酸二氢钾0.03%、酵母抽提物(FM818)5.48%、脲素0.55%、氯化钴0.01%;在摇瓶中进行验证试验,优化条件下菌体干质量为33.98mg·mL-1、酶活为167.57U·mL-1;对照条件下菌体干质量26.6mg·mL-1、酶活为125.63U·mL-1,此优化培养基使干质量、酶活分别提高了27.74%和33.38%。