大豆黄酮对泌乳后期奶牛相关乳成分的影响

选用14头产奶水平相近的泌乳后期黑白花奶牛,随机分为对照组、试验组。试验组日粮添加10mg/kg的大豆黄酮,持续30d。结果发现:与对照组相比,试验组奶牛乳蛋白有所升高,乳脂率有所下降。试验第15d乳中GH的含量显著升高(P<0.05),E2、T3和T4的含量均有升高的趋势。提示大豆黄酮可能通过调节内源性激素水平而间接地影响奶牛乳成分。     

16.乳腺分泌物中体细胞的研究进展

泌乳与哺乳是哺乳动物繁殖周期的最后一个阶段,乳腺分泌的乳汁不仅为新生幼仔提供营养,而且还为其提供免疫保护和代谢信息.     

牛Musclin基因片段克隆与序列分析

[目的]对牛Musclin基因片段进行克隆与序列分析。[方法]通过电子克隆技术克隆牛Musclin基因,并通过软件分析牛Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡的同源性。[结果]通过电子克隆技术成功克隆了牛Musclin基因;分析结果表明,牛Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡同源性分别为81．0％、80．8％、90．0％、89．1％和62．4％,预测的氨基酸序列含有“KKKR”结构和与小鼠ANP、BNP、CNP蛋白的同源性区域,并将克隆的牛Musclin基因片段注册GenBank（EF646361）。[结论]该试验为进一步研究Musclin在牛骨骼肌中的生物学功能提供了基础资料。     

PRRSV GP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达

参照包含猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) VR2332株完整ORF5基因的载体pMD18T-ORF5的核酸序列设计引物,扩增全长的PRRSV ORF5基因片段,同时以SOE-PCR技术扩增缺失信号肽和跨膜区的ORF5核酸片段ORF5NC,分别克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBac-HTA,获得重组转移载体pFastBacHTA-ORF5及截短表达的重组转移载体pFastBacHTA-ORF5NC。将供体质粒分别转化DH10Bac细胞,获得重组穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,在Sf9细胞中分别成功表达了全长的GP5重组蛋白和缺失信号肽、跨膜区的截短GP5重组蛋白。2种重组蛋白经纯化后,免疫小鼠制备抗血清,ELISA方法检测免疫GP5全长和截短重组蛋白的小鼠血清中抗体滴度分别为1∶800和1∶1 600,表明重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验为进一步分析重组蛋白诱导中和抗体产生的能力以及为PRRSV基因工程亚单位疫苗的研究奠定基础。     

不同饲养模式对奶牛血液生化指标及激素含量的影响

本试验旨在研究不同饲养模式对奶牛血清生化指标及激素含量的影响。分别选择粗放饲养（EP）、集约化饲养（CP）和不完全集约化饲养（IP）模式下体重、胎次、泌乳日龄相近的健康奶牛各30头,采集血样,检测血液中各项生化指标及代谢相关激素,分析其与奶牛不同饲养模式的关系。结果表明,CP型、IP型奶牛血液中血糖（GLU）、白蛋白（ALB）、非酯化脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHB）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、脂多糖（LPS）和组胺（HIS）含量与EP型相比有升高的趋势,而血液中免疫球蛋白（IgG、IgA）、多胺（TA）含量则显著低于EP型（P<0.05）;CP型、IP型奶牛血液中胰岛素（INS）、胰岛素/胰高血糖素（INS/GC）、甲状腺素（T3）、生长激素（GH）含量与EP型相比有升高趋势,而血液中胰高血糖素（GC）含量则低于EP型。综上所述,不同饲养模式对奶牛血液生化指标及相关激素分泌有不同程度的影响,其中以CP型饲养模式较好,且CP型>IP型>EP型。     

CD147基因在家兔肠道的克隆与结构预测

基于电子延伸序列,克隆并分析兔CD147基因.采用兔十二指肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR反应,测序并进行结构预测.克隆的兔CD147基因包含一个完整的开放阅读框架,全长为810 bp,编码由270个氨基酸残基组成的CD147前体蛋白,推导的氨基酸序列信号肽为1～16个氨基酸.氨基酸序列与牛、人、褐鼠、野猪的同源性分别为62.5%,65.9%,59.5%和66.3%,三级结构预测表明CD147具有2个免疫球蛋白类似区.试验成功克隆了兔CD147基因,注册到GenBank(Accession.EU650668),并预测其三级结构,为进一步研究其生物学功能奠定基础.     

猪硫辛酸合成酶基因的克隆及组织表达

本试验通过电子延伸及RT-PCR技术克隆猪硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase,Lias)基因,并进一步研究了该基因在猪体内组织的表达分布。基于电子延伸序列设计1对引物,成功克隆了猪Lias基因(GenBank登录号:JN797612.1),并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了Lias基因的组织表达规律。克隆的猪Lias基因长度为1119 bp,包括1个完整的开放阅读框,编码372个氨基酸;克隆的猪Lias基因与小鼠、褐鼠、人、牛的核苷酸序列同源性分别为71.5%、69.0%、77.3%、70.4%;推导的cDNA编码区(CDS)的氨基酸序列与小鼠、褐鼠、人、牛的同源性分别为91.5%、79.4%、89.4%、88.2%;构建的系统进化树结果显示,猪与小鼠、褐鼠的亲缘关系最近;组织表达分布结果表明,Lias基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠、直肠、回肠、脂肪、皮肤和肌肉中都有表达;Gel-Pro软件分析结果表明,Lias基因在肾脏和脂肪组织中表达丰度最高,其次是直肠和回肠。     

奶山羊不同锌源的消化吸收规律及适宜添加量

明确奶山羊日粮中不同锌源的适宜添加量及消化吸收率,为配制饲料选择合适的锌源提供指导。本研究以安装消化道三位点瘘管的关中奶山羊为试验对象,采用连续灌注的方法,从瘤胃分别灌注不同梯度的硫酸锌（ZnSO4）溶液和复合氨基酸螯合锌（Zn-AA）溶液,分别采集十二指肠食糜、回肠食糜、粪和血清样品,检测锌含量,计算奶山羊肠道的消化率,确定不同锌源的适宜添加水平。结果表明：1）奶山羊对2种锌源的消化率表现为先升高后降低的变化趋势,Zn-AA的全肠道消化率高于ZnSO4,分别为（70.01±1.8）%和（65.41±8.2）%;2）奶山羊对锌的主要吸收部位在小肠,大肠也有一定的吸收能力,血清锌与食糜锌水平的消化率变化同步,而与不同锌源的消化率呈负相关;3）ZnSO4的适宜添加水平为40mg/kg（RM）（瘤胃内容物）,选择添加范围为40～60mg/kg（RM）;Zn-AA的适宜添加水平为60mg/kg（RM）,选择添加范围为40～80mg/kg（RM）。奶山羊小肠和大肠对2种锌源均可消化吸收,相同水平下奶山羊对Zn-AA的消化率高于ZnSO4,血清锌水平与添加的锌水平和锌源有关,消化道对Zn-AA有更高的耐受量。