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口服鸡新城疫V_4株病毒免疫效果研究夏平安①侯安祖②李宏基③摘要经嗉囊接种108.5EID50鸡新城疫V4株病毒。后第4~8天,能从粪便中分离出病毒。5周龄鸡拌料一次口服108.5EID50鸡新成疫V4株病毒,半年内HI抗体平均效价为25左右,用10?.. 相似文献
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根据口蹄疫病毒(FMDV)与猪瘟病毒(CSFV)基因组序列高度保守区,设计合成2对引物,以CSFV和FMDV培养物提取RNA并反转录,进行RT-PCR特异性片段扩增,扩增片段大小分别为200 bp、141 bp.结果表明,扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致.通过特异性与敏感性试验,CSFV与FMDV培养物均可扩增至10-5倍稀释,最终建立的二联RT-PCR方法对上述2种病毒的敏感性亦可达10-4倍稀释,约10 pg的总RNA,证明本法对上述2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点. 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析 总被引:4,自引:4,他引:4
从河南郑州、新乡、周口不同地区猪场的急性病猪中分离到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV),分别命名为PRRSV Hn-1/06、PRRSV Hn-2/06和PRRSV Hn-3/06,细胞中和试验证实其血清型与美洲型一致。利用RT-PCR方法克隆了它们的ORF5基因,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的PRRSV毒株进行了同源性和亲缘关系比较分析,结果表明,3个分离株之间的ORF5基因及其推导的氨基酸均同源性均大于95.5%;与VR-2332标准北美洲株和疫苗株RespPRRS MLV间的同源性均低于与中国CH-1a毒株,而与流行的欧洲株间的同源性均低于54.5%。同时对推导氨基酸序列与6个北美洲型PRRSV株进行变异分析比较,证实其推导氨基酸序列发生了变异,特别是中和位点处第39位明显不同,表明河南省流行的PRRSV为北美洲型的变异株。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属的单股正链RNA病毒,是目前引起猪繁殖障碍的主要疫病之一,临床上以母猪发热、厌食、早产、流产和产木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖障碍及各种年龄猪的呼吸困难和仔猪的高死亡率为特征.根据抗原性差异和基因的同源性比较,一般将PRRSV分为欧洲型(原型毒株为LV)和美洲型(原型毒株为VR22332)两大类,病毒基因组大小约15 kb,包括8个开放性阅读编码框,其中ORF7编码的比较保守的非糖基化的核衣壳蛋白(N)具有较高的保守性,分子质量约15 ku,为病毒的优势结构蛋白,而且N蛋白具有良好的免疫原性和反应原性,能激发机体较强的免疫应答. 相似文献
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取0.5mlBHK-21新鲜健康细胞液和0.1ml狂犬病病毒细胞液在含小飞片青瓶中混合,培养24h制片,加抗狂犬病病毒兔抗体感作,用驴抗兔荧光抗体染色,通过荧光显微镜观察细胞浆内黄绿色结构判定病毒是否在细胞内增殖,从而建立了检测狂犬病病毒快速荧光技术法(RFAT)。并用RFAT检测了15批Flury-LEP株培养液,15批ERA株培养液,和15批鹿毒8202株培养液,TCID平均滴度分别为5.68、6.05、4.86,并同时进行了小白鼠脑内接种平行试验,MLD50平均滴度分别为5.50、5.65、4.25。从试验结果看,RFAT是取代MLD50测定法的理想方法 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病复合PCR诊断方法的建立及应用 总被引:5,自引:0,他引:5
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCC VR-2332)的部分ORF6及ORF7保守序列和已发表的猪圆环病毒株PCV-2(DQ195679)的ORF-2基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为426 bp和631 bp特异性基因片段,通过优化RT-PCR和PCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和PCV-2的复合PCR诊断方法。应用此方法分别对河南省不同地区送检的15头份病、死猪的血清、淋巴结、肺、肝等组织进行检测,结果8头份PRRSV阳性,5头份PCV-2阳性,其中3头份PCV-2和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和PCV-2复合PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,可用于兽医临床诊断。 相似文献
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夏平安 《郑州牧业工程高等专科学校学报》1995,(4)
应用鼠脑传代,从具有神经症状的病牛脑组织中分离获得5株病毒,经电子显微镜观察呈典型弹状病毒样粒子.用抗狂犬病毒CVS(狂犬病毒Ⅰ型代表株)免疫血清作ELISA检测及小鼠中和试验,证明分离株病毒为狂犬病毒.用狂犬病相关病毒Lagos bat(狂犬病毒2型)、Mokola(狂犬病毒3型)和Duvenhage(狂犬病毒4型)免疫血清对分离株病毒作交叉中和试验,结果发现分离株病毒与Duvenhage有较密切的抗原联系.而与Lagos bat及Mokola病毒没有抗原联系.用自制狂犬病毒“核蛋白”单克隆抗体作夹心间接ELISA检测分离株病毒的感染鼠脑均呈阳性反应,5株病毒与CVS及其互相之间没有明显差异.结论认为,由河南省黄牛分离的病毒为狂犬病毒. 相似文献
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对广东省几个地区发生疑似PRRSV感染的猪场送检的502份血清进行RT-PCR检测.将检测到的阳性血清接种到Marc-145细胞上并连续传代4~5次,收获出现明显细胞病变(CPE)的样品,利用蚀斑试验克隆纯化PRRSV.根据高致病性PRRSVNsp2基因缺失区的两端保守区设计了1对引物区分经典PRRSV和高致病性PRRSV.研究结果表明,成功分离到12株PRRSV并纯化出2株病毒.从502份血清样品中检测到156份阳性血清,PRRSV感染阳性率达32%,经鉴定均为高致病性PRRSV变异株.对分离毒株的Nsp2基因序列进一步分析,发现此次分离株Nsp2基因与VR-2332株(70.7%~74.6%)的核苷酸同源性较JXA1株(87.1%~100%)偏低;在系统进化树上分离株与JXA1变异株亲缘关系比较近,而与VR-2332株亲缘关系比较远.说明广东省地区普遍存在PRRSV的感染,并且病毒出现了不同程度的变异. 相似文献