山合欢种子胰蛋白酶抑制剂纯化及部分性质研究

采用去离子水抽提、硫酸铵分步盐析、亲和层析和分子筛层析等方法,从山合欢种子中得到一种胰蛋白酶抑制剂.SDS-PAGE结果表明,该抑制剂由2条多肽链构成,分子量分别为14.5和5.5 kDa.MALDI-TOF测定该抑制剂的精确分子量为19768.23 Da.该抑制剂能与胰蛋白酶形成1∶1的复合物,并且它们的结合不受SDS的影响.该抑制剂的肽指纹图谱中有7个主要的信号簇.通过串联质谱测定该抑制剂的部分氨基酸序列,比对发现与其他Kunitz蛋白酶抑制剂有较高的同源性.     

肉仔鸡对胰蛋白酶抑制因子的耐受性研究

给15日龄AA肉仔鸡分别饲喂胰蛋白酶抑制因子(TI)9.01,6.45,3.74,1.80,1.39,0.34g/kg的日粮至35 d.肉仔鸡对饲粮中胰蛋白酶抑制因子的耐受性阈值为3.74g/kg.     

农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（cpti）在玉米中的遗传转化

在众多玉米转化方法中,农杆菌法是很有发展潜力的手段之一,它具有诸多优点:操作简便,一次性处理材料量大,成本低,可转化的外源DNA长,且外源基因大多为单拷贝插入.     

鲨鱼鳍软骨的胰蛋白酶水解及其"蜂窝式”降解机制

研究了胰蛋白酶水解鲨鱼鳍软骨的水解提取液中蛋白质含量、粘多糖含量和硫酸基含量的变化规律,并采用扫描电子显微镜分析了鲨鱼鳍软骨降解过程中的结构变化。探讨了胰蛋白酶和水解鲨鱼鳍办骨的主要过程和机理,首次提出了鲨鱼鳍软骨降解过程的“蜂窝式”降解理论。     

双抗植物表达载体的构建

用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂基因从质粒ｐＢｉｎ２０上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽Ｂ和抗菌肽Ｄ基因的植物表达载体ｐＤＢ３和ＸｂａＩ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有３个抗性基因的双抗植物表达载体ｐＤＢＴ。     

用缺失胰蛋白酶抑制剂豆粉喂猪可降本增速

众所用知,大豆中蛋白质含量约占40%左右,但因一些呈一组小分子量的营养限制因子(如胰蛋白酶抑制剂)的存在,而使其营养价值降低。为了钝化这些不利的胰蛋白酶抑制剂,西方传统的养猪法是,将大豆加热、挤压后的豆粕用于饲料蛋白成     

豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得

利用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂（Ｃｏｗ－ｐｅａＴｒｙｐｓｉｎＩｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＣｐＴＩ）基因转移进入棉花（ＧｏｓｙｐｉｕｍｈｉｒｓｕｔｕｍＬ．）。棉花幼苗的下胚轴与携带有ＣｐＴＩ基因和Ｎｐｔ－Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养,在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性（Ｋｍｒ）愈伤组织。选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导,继而在分化培养基上进行植株分化,最终获得了再生棉花植株。经Ｎｐｔ－Ⅱ分析、ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测证明,外源ＣｐＴＩ基因和标记基因（Ｎｐｔ－Ⅱ基因）存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ）生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。     

胰蛋白酶对叶蛋白水解作用的研究

以植物叶蛋白浓缩物为材料,用胰蛋白酶在不同条件下对其进行水解。结果表明,胰蛋白酶作用于植物叶蛋白,其最佳水解温度为４０℃;最佳水解ｐＨ值为９;水解程度随酶量和反应时间增加而增加;各种不同种类的植物叶蛋白在相同条件下被胰蛋白酶水解的程度基本一致,证明了植物叶蛋白易被动物体内蛋白酶分解。     

维生素B6对史氏鲟幼鱼胰蛋白酶活性的影响

试验研究了饲料中不同水平维生素B6对史氏鲟（Acipenser schrencki）幼鱼胰蛋白酶活性的影响。在温度为（20±0.5）℃、pH值为6.8～7.5的条件下,研究了低蛋白含量（28%）饲料中,添加不同水平的维生素B6（0、15、30、45、60、75mg/kg）对史氏鲟幼鱼[（34.07±3.44）g]胰蛋白酶活性的影响。结果表明,饲料中的维生素B6添加量为45～60mg/kg时,对幼鲟胰蛋白酶的激活作用最大,并可相应提高对饲料蛋白质的消化率。     

胰蛋白酶水解文蛤蛋白制备抗氧化小肽实验研究

采用胰蛋白酶水解文蛤蛋白以羟自由基清除率为指标制备抗氧化小分子肽。结果表明：胰蛋白酶解液G-15凝胶层析的分离组分在第3管有最大吸收峰,且在2个检测波长下,两者出现峰的位置基本一致。但不同洗脱峰对应的羟自由基清除率差异较大,最大羟自由基清除率为59%。可见最大洗脱峰与最大羟自由基清除率并无一致性。利用Tricine-SDS -PAGE聚丙烯凝胶电泳对各洗脱峰抗氧化小肽进行分离纯度检测表明第4管纯度佳,但其羟自由基清除率只有25%、分子量为460。