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[目的]为了建立和完善以丹参叶柄为外植体的遗传转化体系.[方法]以丹参品系HLM为受体,以携带EDT1基因的表达载体pCB3000-EDT1为目的基因供体,采用农杆菌介导法进行遗传转化,对转化的关键因子进行分析.[结果]最佳的转化体系条件为以14 d叶龄叶柄为外植体,农杆菌液浓度D600=0.4浸染15 min,以MS... 相似文献
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豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得 总被引:22,自引:10,他引:22
利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cow-peaTrypsinInhibitor,CpTI)基因转移进入棉花(GosypiumhirsutumL.)。棉花幼苗的下胚轴与携带有CpTI基因和Npt-Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养,在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性(Kmr)愈伤组织。选择Npt-Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导,继而在分化培养基上进行植株分化,最终获得了再生棉花植株。经Npt-Ⅱ分析、PCR及Southern检测证明,外源CpTI基因和标记基因(Npt-Ⅱ基因)存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫(Heliothisarmigera)生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。 相似文献
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研究了以陆地棉(Chirsutum)晋棉7号、冀合321、冀棉713、珂字棉321、珂字棉201等品种为外植体的体细胞培养获得再生突变不育株的形态性状及减数分裂过程中染色体的行为。与再生可育株相比,不育株的株型、分枝、叶、花各器官均较小。花柱、柱头、花丝、花药小而呈萎缩干瘪状,花药不开裂。减数分裂不正常,染色体普遍丢失减少,不能正常配对,出现很多单价体和染色体桥。产生二分体、三分体和多分体,也有正常的四分体。雌配子体和雌配子发育也不正常,胚囊结构不完整,反足细胞迟迟解体,表现雌雄不育。 相似文献
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棉花无菌苗的制备和选择是农杆菌介导法转化中的先决条件之一,适宜的无菌苗龄和下胚轴部位是否能促进转化作用,提高转化效果,本文就此进行了研究和探讨。1材料和方法1.1材料 棉花品种为冀合321。外源基因为中国科学院遗传所提供的三价抗虫基因( BT+ CPTI+GNA)。1.2方法 农杆菌介导法将外源三价抗虫基因导入棉花中,种苗培养基为1/2MS+琼脂6. 0%pH5.8用常规法种无菌苗,其它转化方法同常规法。无菌苗龄的制备。隔天播种棉花无菌苗,连续播种 10d:2d、3d、4d、5d、6d、10d。 下胚… 相似文献
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