北京油鸡肠道肽转运蛋白PEPT1表达载体的构建及在293-T细胞的表达

本试验通过分子生物学手段建立了北京油鸡PEPT1细胞模型。根据GenBank的原鸡PEPT1保守区序列设计引物,从北京油鸡肠道粘膜组织中扩增出PEPT1基因,将其与pGEM-T载体连接并测定核苷酸序列,成功获得到测序正确的2145bp的基因,并将北京油鸡肠肽转运载体PEPT1基因克隆到真核表达载体pcDNA3.0,构建了真核表达载体pcDNA3-PEPT1。采用脂质体介导将表达质粒pcDNA3-PEPT1转染293-T细胞,同时转染pcDNA3.0-EGFP荧光蛋白进行转染体系荧光监测,流式细胞术检测转录后16、20、24h的荧光强度。分别在16、20、24、44h收集等量转染细胞,抽提转染细胞总RNA,DNAseⅠ处理残留的DNA污染,反转录合成cDNA,以构建不同稀释度的pGEM-T-PEPT1质粒为模板,建立SYBERGREEN实时荧光定量标准曲线,检测PEPT1在293-T细胞中的转录水平。结果表明,在质粒转染入293-T细胞后,在16、20、24、44h均有稳定的转录水平。从而建立了在293-T细胞表达北京油鸡PEPT1的外源模型,同时为研究该转运蛋白性质,进一步调控动物肠道肽的吸收奠定了基础。     

营养介导的TOR信号传导研究进展

TOR(target of rapamycin)是一种结构和功能高度保守的蛋白激酶,它能够通过整合营养、能量、生长因子等信号调节细胞的增殖、体积增大及细胞周期进程。作者综述了TOR激酶的上下游信号传导途径及氨基酸和能量等营养状况对这些信号传导通路和细胞生长的影响,为探讨营养调控体蛋白合成的机制及精准营养供给技术的建立提供宝贵的理论基础和开创性思路。     

羽毛降解菌的筛选及其降解特性研究

本试验旨在从实验室保藏菌株中筛选出可用于羽毛降解的菌株并优化其培养条件,应用于羽毛的生物降解。以酪蛋白培养基进行菌株初筛,以羽毛为唯一有机营养源制作的羽毛培养基进行菌株复筛;通过细菌形态学观察和16S rDNA序列测定进行菌株鉴定,并对所筛菌株在羽毛培养基中的培养条件进行优化研究。结果表明:1)通过酪蛋白培养基筛选出8株能产生降解圈且透明度高的菌株。2)通过单根羽毛培养基和羽毛降解液指标测定联合方法筛选出1株可3 d降解羽毛、产可溶性蛋白的菌株NLG1。3)经鉴定并命名为贝莱斯芽孢杆菌NLG1(Bacillus velezensis NLG1)。4)菌株NLG1培养优化条件为羽毛底物浓度2.5%(m/v),初始pH 10,接种活菌数109CFU/mL,温度27℃,外加碳源为可溶性淀粉,发酵时间3 d。5)优化条件下降解羽毛,测得发酵液中可溶性蛋白含量为(32.76±0.07)μg/mL,水解氨基酸总量由27.41 mg/g提升到112.18 mg/g,测得游离氨基酸及衍生物的种类由25种增加至31种(增加的氨基酸为胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、α-氨基丁酸、β-氨基异丁酸、β-丙氨酸),总量提高到66.33 mg/g。综上所述,本试验筛选出1株可降解羽毛的天然菌株——贝莱斯芽孢杆菌NLG1,并明确了该菌株降解羽毛培养优化条件,在此条件下降解羽毛,提高了发酵液中水解氨基酸、游离氨基酸及衍生物总量,改善了羽毛的营养价值。     

硫甙脱毒菌株的筛选及其发酵菜籽粕的效果

本试验旨在筛选可用于菜籽粕脱毒的菌株并探讨其发酵菜籽粕的效果。以菜籽粕中主要抗营养因子硫甙为唯一碳源,从发酵青贮与土壤混合液中分离出54株在筛选培养基上生长情况良好的菌株进行分离纯化,以硫甙降解率为因变量进行复筛,初步得到5株硫甙降解率大于30%的菌株。通过菜籽粕固态发酵培养基进行单菌株发酵试验,得到1株硫甙降解率达23.69%的菌株A9,对菌株A9进行形态学观察和16S r DNA序列测定与分析,确定菌株A9为嗜酸乳杆菌,并将其与酿酒酵母、枯草芽孢杆菌进行菜籽粕混菌发酵。结果表明,混菌发酵后的菜籽粕硫甙含量由37.48μmol/g降低到25.96μmol/g,降解率为30.73%;粗蛋白质含量由38.41%提高到45.44%(P0.05);蛋白质结构发生改变,蛋白质分子质量变小,多肽含量由0.84%提高到2.62%(P0.05);混菌发酵后的菜籽粕呈黄褐色蓬松状,有浓郁的酸香味,总酸含量由1.01%提高到3.91%(P0.05)。由此可见,混菌发酵后的菜籽粕营养价值与风味得到了有效地改善。     

植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌混菌发酵饲料对肉鸡生长性能、屠宰性能和肠道结构的影响

本试验旨在研究发酵饲料在肉鸡饲料中的使用方法和添加比例。在肉鸡饲料中添加0、10%、20%发酵全价饲料,正常制粒,研究其对肉鸡生长性能、屠宰性能及肠道等相关指标的影响,为发酵饲料在肉鸡饲料中的应用提供参考。选择1日龄爱拔益加（AA）健康肉仔公鸡180只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。3个处理组分别饲喂含发酵全价饲料0（F0组）、10%（F10组）、20%的日粮（F20组）,饲养时间42 d。结果表明,从全期来看（1~42日龄）,10%发酵饲料替代组显著降低了料重比（P<0.05）,平均日增重有增加的趋势（P=0.05）。42日龄时,发酵饲料对屠宰性能无显著影响（P>0.05）;20%发酵饲料替代组肉鸡的回肠隐窝深度显著高于对照组和10%替代组（P<0.05）;20%和10%发酵饲料替代组肉鸡十二指肠绒毛长度、十二指肠和空肠的绒毛长度/隐窝深度（V/C）显著高于对照组（P<0.05）。以上结果提示,肉鸡饲料中以10%的发酵全价饲料替代可以降低料重比,提高平均日增重,并对肠道发育有一定的影响。     

丁酸梭菌对肉鸡钙磷代谢和胫骨指标的影响

试验通过在基础日粮中添加丁酸梭菌,研究其对肉鸡钙磷代谢和胫骨指标的影响。选择1日龄180只健康AA肉鸡,随机分入3个处理组,每个处理组6个重复,分别为对照组、抗生素组（ATB）和丁酸梭菌组（CB）。对照组饲喂基础日粮,ATB组在基础日粮中添加5 mg/kg黄霉素、75 mg/kg金霉素和20 mg/kg吉他霉素,CB组在基础日粮中添加2.5×10⁸ CFU/kg丁酸梭菌,试验期42 d。结果显示,与对照组相比,①CB组肉鸡血清钙（Ca）、磷（P）含量差异不显著（P>0.05）,21日龄ATB组肉鸡血清钙含量显著提高（P<0.05）;②21日龄CB组肉鸡胫骨强度显著提高（P<0.05）;42日龄CB组肉鸡胫骨磷含量极显著提高（P<0.01）;③21日龄CB组肉鸡排泄物中磷含量极显著降低（P<0.01）,并与ATB组无显著差异;42日龄CB组肉鸡排泄物中钙含量极显著提高（P<0.01）,排泄物中磷含量显著提高（P<0.05）。综合上述结果,在AA肉鸡基础日粮中添加2.5×10⁸ CFU/kg丁酸梭菌有利于改善肉鸡的胫骨发育,改善肉鸡对钙、磷的吸收利用,能有效降低21日龄肉鸡钙、磷排泄量,但并未降低42日龄肉鸡排泄物中钙、磷含量。     

硼对肉仔鸡脂类代谢和生产性能的影响

选用168只1日龄健康的艾维茵肉仔鸡(公母混养),采用单因子随机化试验设计,分成7组,每组3个重复,每个重复8只鸡,其中第2～7组在基础日粮的基础上分别添加20、40、60、80、100、120mg/kg无机硼,第1组为对照组,研究不同水平的硼对肉仔鸡生产性能和脂类代谢的影响。试验结果表明:(1)不同水平的硼均能不同程度地降低血清总胆固醇、总脂、甘油三酯的含量,其中以20mg/kg添加量对0～6周龄肉仔鸡的效果最显著(P<0.05);(2)不同水平的硼添加均有促进生长的效果,其中以60mg/kg添加量对0～6周龄肉仔鸡效果最显著(P<0.05)。     

我国饲用小麦营养指标的变异度分析

试验选择全国16个省份(直辖市、自治区)的97个小麦样品作为研究对象,测定其9项营养指标并分析各项指标在不同省份间的变异度。结果表明,全国范围内变异度较大的指标为半纤维素、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维,变异系数分别达到18.34%1、4.69%和13.58%;总能变异系数最小,仅有1.33%;水分、粗脂肪、粗蛋白和灰分的变异系数均在10%左右。同一营养指标在不同省份间存在不同程度的变异,变异系数在0.16%～31.39%之间。同一省份内的各营养指标也存在较大变异,变异系数多集中在15%之内。