枣树愈伤组织培养中几种物质的变化研究

枣树愈伤组织在继代培养中,前期(第5～15天)淀粉、还原糖、蛋白质、核酸的含量都在增加;在第15～35天,淀粉和还原糖的含量下降,蛋白质和核酸的含量上升,并在第35天时达到最大值;第35天以后它们的含量都在减少.说明枣树愈伤组织继代培养中,快速增长期在第15～30天,第35天以后生长速度在逐渐减慢.由此确定枣树愈伤组织培养最佳的继代周期为第30～35天.     

雷竹鞭侧芽发育过程中核酸含量,过氧化物酶和淀粉酶同工酶的变化

雷竹鞭侧芽从潜伏芽、饱满芽发育为萌发芽、强萌发芽，核酸含量有规律地显著上升，潜伏芽与饱满芽过氧化物酶的活性和变化有相同的规律，总体活性较强，笋期后活性急剧上升，而和萌发芽、强萌发芽有显著差异；不同类型侧芽，过氧化物酶和淀粉酶同工酶明显不同，存在遗传信息顺序表达的规律，这种表达是内外环境相互作用的结果；从核酸含量、过氧化物酶的活性及其同工酶和淀粉同工酶变化看，从潜伏芽、饱满芽到（强）萌发芽，从萌发芽萌发到笋是两个较为独立的变化过程。     

在低温锻炼中毛白杨幼苗可溶性总蛋白、RNA、DNA、RNase及抗冻性的变化

低温锻炼不仅提高了毛白杨幼苗存活率和抗冻性以及RNA和可溶性总蛋白的含量 ,降低了RNase活性 ,而且能减轻低温胁迫引起的RNA和可溶性总蛋白含量的下降程度和RNase活性的提高 ,有利于幼苗在恢复过程中RNA和可溶性总蛋白水平的迅速回升以及RNase活性的降低 .进一步研究发现 ,DNA含量无论在低温锻炼中还是在低温胁迫下或是在随后的恢复生长期均保持相对稳定 ;低温锻炼所引起的RNA含量的增加 ,与RNase活性的降低呈明显的负相关 ,与可溶性总蛋白含量的增加以及幼苗抗冻性的提高成正相关 .这表明低温锻炼可能抑制RNase活性 ,有效地促进RNA含量的增加 ,而RNA可能参与了可溶性总蛋白的合成及抗冻性的诱导     

大豆功能因子连续提取技术

国家大豆深加工研究与推广中心、中国食品工业协会植物蛋白专业委员会中试基地——营口渤海天然食品有限公司完成了利用高、低温豆粕在一条生产线上连续提取大豆功能因子和浓缩蛋白生产     

小瓜虫抑动蛋白基因核酸疫苗制备

为防治水产养殖动物常见多发的小瓜虫病,本试验选取小瓜虫抑动蛋白基因,人工合成经物种优化后的抑动蛋白基因序列,以pVAX1为载体构建重组质粒,转入大肠杆菌DE3进行克隆表达。大量提取构建的重组质粒,通过肌肉注射免疫鱼体,注射剂量为125μg/尾,同时设立空载体对照组及空白对照组。首免后第4周进行二次加强免疫,分别于首免后第2、3、4周,二次加强免疫后第1、2、3、4、8、16周,抽样采集各组血液,分离血清,RT-PCR法检测抑动蛋白转录水平,同时检测血清抗体产生情况。二次加强免疫后第2周进行同居感染及人工感染试验,检测免疫保护效果。结果表明,质粒注射入鱼体后,所有抽查血液样本均检测到目的基因的转录;所有抽查免疫鱼血清样本均可以对小瓜虫幼虫产生制动效果,制动时间长达8周,空载体对照组和空白对照组无制动效果;同居感染及人工感染后,核酸疫苗免疫组存活率达到90%以上,而空载体组存活率为20%⁴0%,空白对照组全部死亡。表明构建的质粒作为核酸疫苗对小瓜虫病有较好的免疫保护效果,可显著降低死亡率。研究结果为小瓜虫核酸疫苗的研发与生产应用奠定了基础。     

鸡网状内皮细胞增生病的诊断试验

本试验将PCR扩增与核酸探针斑点分子杂交特异性诊断检测技术相结合,对部分疑似REV感染患病鸡群进行了外源性核酸特异性交叉检测诊断试验,提高了REV感染诊断的准确性。应用鸡REV地高辛核酸探针斑点分子杂交特异性诊断检测方法,对860余份血液DNA样本进行了REV感染特异性检测试验。结果表明,贵州地区鸡REV阳性感染率为:高产蛋鸡40.05%(164/390)、杂交肉鸡42.91%(106/247)、绿壳蛋鸡34.97%(57/163)、地方土鸡11.7%(7/60)。     

Development of Nucleic Acid Lateral Flow Immunoassay Detection Method for Foot-and-mouth Disease Virus

In this article, through the combination of nucleic acid probes and immune chromatography, a simple, sensitive and specific detection system——nucleic acid lateral flow immunoassay (NALFIA) for amplifing foot-and-mouth disease virus (FMDV) 3D RT-PCR products was established.An ultrasensitive nucleic acid biosensor (NAB) based on streptavidin-labeled gold nanoparticles dual labels and lateral flow strip biosensor (LFSB) were used in this system.The biotinylated goat anti-rabbit IgG was marked to the NC membrane as the alleged strip and the anti-digoxin antibody was labeled to the NC membrane to capture the digoxin probe.After assemblying gold-labeled strip and detecting RT-PCR products, the detection limit of NALFIA was 0.3×10^-3 to 3×10^-3 μg/μL.The NALFIA was compared with agar gel electrophoresis analysis, the results showed that the sensitivity of NALFIA was higher than agar gel electrophoresis.There was an excellent agreement between the two methods.NALFIA was a method with high sensitive, low cost and short time.In conclusion, this method provided a good alternative to detect FMDV.     

现代生物技术在水产养殖中的应用

核酸探针技术通过分析病原生物的遗传结构。根据这段基因结构的序列，就可以设计可与其互补的DNA探针，与病原生物的DNA进行杂交，以此来确定病原携带者和传播者的分子生物学技术。该技术具有灵敏度高、特异性强等优点，近年来在对虾病毒病的检测中倍受青睐。     

酵母核酸替代血浆蛋白粉在断奶仔猪中的应用效果

试验选取健康、体重相近(7.52±0.17kg)、28日龄断奶仔猪60头,随机分为2组(各3个重复,每个重复10头猪),试验设计为2个处理组(3%血浆蛋白粉基础饲粮和3%酵母核酸基础饲粮),每组随机接受1个处理,试验共28d,试验第14d称重。结果显示:0d～28d添加酵母核酸与血浆蛋白相比,日增重和日采食量分别提高了11.40%和2.69%(P>0.05),料肉比降低了8.84%(P>0.05),明显提高生产性能。在经济效益中,试验结束后饲料成本差异不显著,但添加酵母核酸比添加血浆蛋白有提高日增重、提高日采食量、降低料肉比,经济效益显著。综合比较,高性价比的酵母核酸是血浆蛋白的理想替代物。     

核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。