中华鳖白底板病病原的分析

从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过滤液均可导致中华鳖发病死亡,TS6-1和TS6-2的LD50分别为3.2×107CFU/mL和1.0×108CFU/mL。以患病鳖肝、脾组织的过滤液注射健康鳖后,3～5天内所有鳖全部死亡。通过对细菌形态、生理生化特性的测定,判定TS6-2属于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。同时对TS6-1进行了16S rRNA分子鉴定,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与迟缓爱德华氏菌的16S rRNA基因具有较高的同源性(99%),该序列在GenBank上的登录号为DQ884466。结合细菌的生理生化特性,判定TS6-1属于迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tard)。由此认为中华鳖白底板病由病毒和嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌混合感染引起。药敏试验结果表明,TS6-1对先锋V、丁胺卡那敏感,TS6-2对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那敏感。     

中华鳖胚胎组织原代细胞培养技术的研究

基于当前市场上中华鳖商业化细胞缺乏,不利于开展其病害防控研究的现状,以中华鳖胚胎为对象,采用组织块原代培养技术,从孵育15～20 d的受精卵中获得适宜的胚胎组织,经抗生素、乙醇消毒,通过无菌条件下将组织块均匀分散贴壁在细胞瓶中,然后于30℃恒温培养箱中贴壁培养4 h后加入无血清M199培养基多次清洗,从而获得了中华鳖胚胎组织原代细胞;在此基础上分别对中华鳖胚胎细胞传代培养条件、冻存与复苏等进行系统性研究,初步确定中华鳖胚胎细胞培养温度为26℃,M199或L-15培养基,血清浓度为15%(体积分数),通常7 d传代1次;二甲亚砜冻存保藏后,细胞复苏生长状况正常。     

中华绒螯蟹“腹水病”及“抖抖病”并发病病原的研究

于1998～1999年对中华绒螯蟹主要细菌性疾病“腹水病”、“抖抖病”并发病病原进行研究。结果表明经细菌学鉴定6株病原菌，其中5株为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)，1株为拟态弧菌(Vibrio mimicus),用细菌人工感染蟹，其LD     

富硒女贞子对奶牛血液指标和HSP70的影响

为了探索富硒女贞子对奶牛热应激的干预作用,试验选用40头年龄、胎次、产奶量相近的中国荷斯坦奶牛随机分为4组,其中组1~组3每头每天拌料饲喂60g、40g、20g剂量的富硒女贞子,组4每头每天拌料饲喂40g普通女贞子。通过试验期间每旬前3天下午15时1次/d给药,检测血常规和血清中内分泌、抗氧化性能、细胞因子、热应激休克蛋白的变化。结果发现:用药后,组2的ACTH水平和皮质醇水平显著下降(P0.05),T3恢复到正常水平。组1、组2的热应激休克蛋白含量显著升高(P0.05),组2和组4的SOD和GSH-PX水平显著提高(P0.05)。组1、2、4的IFN-γ水平显著提高(P0.05),表明富硒女贞子可以有效改善热应激期间奶牛的内分泌、抗氧化能力、免疫能力,促进HSP70分泌,显示良好的抗热应激效果。     

乌鳢诺卡氏菌病的防治

浙江省桐乡市大麻镇水产养殖示范园区共有乌鳢连片养殖池i155亩，在2005年的养殖生产中，乌鳢发病面积687亩，发病率59．5％，死亡率3．6％，总损失105．7万元，平均亩损失914．5元，病害已成为乌鳢养殖业的重要制约因素。我站于2006年和浙江省淡水水产研究所合作，进行乌鳢细菌性病害防治技术研究，     

WSSV单抗的制备及其在红螯螯虾病毒病检测中的应用

将提纯的感染红螯螯虾的WSSV,免疫BALB／c小鼠,三次免疫后取其脾细胞与SP2／0融合．间接ELISA筛选,阳性克隆经3次亚克隆后,共获得7株针对WSSV的特异性单抗,分别命名为E2、C2、E3、G3、C4、D5以及F10．细胞上清ELISA效价为1：1600—1：6400．抗体亚类鉴定结果表明：E2、G3、C4属于IgG1,C2、D5、F10属于IgG3,E3属于IgG2a亚类;单抗热稳定性试验表明7株单抗均是热稳定的．选取单抗G3和F10进行病毒中和试验,结果表明：在适宜的抗原浓度下,两株单抗均有较好的中和能力．选取单抗G3作为一抗建立了间接ELISA方法,通过对人工感染红螯螯虾WSSV的测定,初步证实该单抗可用于WSSV的检测．     

河川沙塘鳢致病真菌的特性及分子生物学鉴定

从发病河川沙塘鳢(Odontobutis potamopgila(Gunther))的亲鱼及卵上取病灶样品,经培养分离得到相同的一株水霉菌FD07,对其形态、生理特性进行研究,并进行ITS rDNA分子鉴定.结果显示:该菌的最适生长温度为20℃,在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)上生长良好,主要形态特征是菌落结构...     

淡水鱼类细胞库的构建↑（*）

以几种淡水养殖鱼的组织和胚胎为材料，经12一24个月的继代培养，先后建立T鲢尾鳍细胞晕(简称SCF)、鳙吻端细胞系(简称BHS)、团头鲂尾鲔细胞系(简称WCF)、银鲫囊胚细胞系(简称CGB)、鲤胚胎细胞系(简称CE)和太鳞副泥鳅胚胎细胞系(简称LB)。上述细胞的最适培养温度是25—28℃，细     

养殖大黄鱼低温弧菌病病原的研究

浙江沿海深水网箱养殖大黄鱼冬天发生大量死亡，从病鱼体内分离出致病力较强的细菌GYC0227。人工感染试验证实这株菌为大黄鱼的病原菌。对细菌进行了形态、生理生化特性的测定，并进行了16S rRNA分子鉴定。PCR扩增获得了GYC0227菌株大小约1．5kb的16S rDNA部分基因片段，产物经回收纯化，克隆到pMD18-T载体，转化大肠杆菌TG1，对阳性克隆子进行酶切及PCR鉴定，并测序，将测定的序列递交NCBI进行BLAET同源序列比对，与溶藻弧菌的标准菌株的16S rDNA具有96％的同源性。结合菌株的生理生化特性，GYCD227菌株属于溶藻弧菌。该菌适应于低温生长，生长温度范围为7—25℃，并测定了其对14种药物的敏感性。     

饲喂枯草芽孢杆菌对银鲫等水生动物肠道菌群及消化酶活性的影响

应用产酶(蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶)能力较强的枯草芽孢杆菌B115制成微生物添加剂，饲料中添加量为2‰。经35d投喂试验，测定翘嘴红鲐、银鲫、日本沼虾胃肠道消化酶活性、肠道微生物菌群和生长的变化。结果表明，添加枯草芽孢杆菌B115，可显著提高鱼虾肠道消化酶的活性。从银鲫整个肠道的平均值看，试验组比对照组的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性分别提高19．8％、22．7％和11．03％；从翘嘴红鲐整个肠道的平均值看，试验组比对照组分别提高13．1％、15．8％和13．9％。日本沼虾试验组胃的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性分别高于对照组13．69％、10．05％和10．44％，试验组肠的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性分别高于对照组8、8％、15．5％和8．43％。微生物添加剂组对鱼虾的生长有促进作用，同时能增加肠道中有益菌群如乳杆菌和双歧杆菌，对气单胞菌、肠杆菌和肠球菌的量基本没有影响。