锯缘青蟹血清凝集素的特性和盐析提取研究

对锯缘青蟹(Scylla serrate)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果显示:锯缘青蟹血清凝集素对人、兔、鼠、鸽子、中华鳖、鲫红细胞均有凝集作用,其中对小鼠红细胞凝集活性最强,血凝活性可达29;凝集素活性最适pH 6.0~7.4;盐度对凝集活力有较大影响,NaC l浓度在0.4~0.5 mol/L时基本失活;未纯化血清凝集素对Ca2+、Mg2+未表现出依赖性;凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺特异性抑制。对青蟹血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区,该组分凝集比活比血清高27.44倍,SDS-PAGE结果表明主要蛋白带型为79 ku、75 ku、72 ku。     

小麦条锈菌(Puccinia striiformis)在几个慢锈品种叶组织中的扩展

 在温室条件下,以条中17、22、23和25号小种分别接种5叶龄的平原50等慢锈品种,对接种后不同时间的受侵叶片进行了整体透明加染色的组织学观察,并在接种后第14~19天测定了日产孢量。发现慢锈品种受侵组织中不同程度地发生了细胞坏死,其面积随时间进展而扩大,感病对照品种燕大1817中未发现任何坏死现象,各供试慢锈品种中菌丝扩展面积及产孢量均小于感病对照。对以上两项观察结果在慢锈性上的生物学意义及其在慢锈性鉴定中应用的可能性进行了探讨。     

光合细菌的鉴定、生长特性及其应用

光合细菌HZPSB株分离自淡水养殖池塘底泥,经富集与纯化培养,菌落形态、培养特征和菌体形态学观察,细胞吸收光谱及生理生化特性测定,鉴定为类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides).测定了HZPSB株的最佳培养条件,其最佳培养条件为29℃、3000Lux、pH7.0和1‰盐度.测定了光合细菌对池塘水质(溶氧、pH、氨氮、亚硝酸盐氮、COD)影响;添加于饲料后对鱼血清中溶菌酶活力的影响;同时进行了光合细菌的大田应用试验.结果表明:光合细菌对池塘水的溶解氧、pH没有影响;降低水中氨氮、亚硝态氮、有机物(COD);饲料中添加光合细菌饲喂鲫鱼、罗非鱼,鱼血清中溶菌酶的活性明显高于对照组.光合细菌分别在湖州、绍兴、杭州、嘉兴、上海等进行大田应用试验,取得了较好的应用效果.养殖虾蟹的发病率有明显的减少,与不使用光合菌的池塘相比,发病率降低了25%以上,提高了虾蟹产量.     

罗氏沼虾无病毒苗种繁育技术

罗氏沼虾肌肉白浊病又称为白体病、白尾病,是近年来发生于罗氏沼虾苗种阶段的一种疾病,患病虾体出现肌肉白浊、白斑或白尾症状,可在数天内发生大量死亡,死亡率可高达60%以上,成为当前罗氏沼虾育苗、养殖的主要危害.     

白斑综合征病毒单克隆抗体的制备及BA-ELISA方法的建立

白斑综合征病毒(white spot syndrom virus,WSSV)是甲壳类动物的重要病原,作者采用提纯的WSSV免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,共得到3株能特异分泌抗WSSV的单克隆抗体(Mab)的杂交瘤细胞(1E9、1E10、4F5)。将3株杂交瘤细胞注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1∶104~105。1E9、4F5的抗体亚型均为IgG1,1E10的抗体亚型为IgG2b。特异性实验表明:3株单抗与虾类病原桃拉综合征病毒(TSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)、哈维氏弧菌(V.harveyi)均无交叉反应。Western bolt分析表明:单抗1E9与病毒28kD外膜蛋白特异性结合。采用生物素标记纯化后的单抗1E9,并建立了生物素-亲和素酶联免疫吸附法(Biotin-Adivin ELISA,BA-ELISA)用于WSSV的检测,该方法对提纯病毒的检测灵敏度约为4 ng,对病虾血淋巴的检测灵敏度达1∶25000。     

利用大学生结构设计竞赛促进土木工程学科实践教学改革

从1994年清华大学成功举办大学生结构设计竞赛以来,大学生结构设计竞赛已经发展成为我国各高校、各地区乃至国际间土木工程及相近专业最重要的学科竞赛.根据结构竞赛的宗旨、内容和形式以及北京及全国各地区结构设计竞赛的开展情况,从调动学生实践兴趣、培养学生创新能力、促进实践教学等方面分析了结构设计竞赛对培养专业工程人才和促进实践教学的作用,提出了借助于结构设计竞赛来深化教学改革的措施,着力培养大学生的创新设计能力与专业实践技能,为学生将来走向社会打下坚实的基础.     

罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用

罗氏沼虾肌肉白浊病（whitish muscle disease of Macrobrachium rosenbergii）是一种发生在罗氏沼虾苗种阶段的流行病，发病虾苗出现肌肉白浊、白斑或白尾症状，死亡率高达60％以上，作者所在实验室在确定其病原是罗氏沼虾诺达病毒（Macrobrachiium rosenbergii Nodavirus，MrNV）的基础上，用MrNV免疫BALB／c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2／0鼠骨髓瘤细胞融合，用间接ELISA筛选阳性孔，经有限稀释法克隆，得到12株能特异分泌抗MrNV的单兜隆抗体（Mab）的杂交瘤细胞。注射小鼠，制备腹水单克隆抗体，ELISA效价为1：10^5～10^6。亚型鉴定结果表明，有6株单抗为IgG1型，4株甲抗为IgG2a型，2株单抗为IgG2b型。12株单抗与对虾白斑综合征病毒（WSSV）和桃拉综合征病毒（TSV）均无交叉反应：挑选效价高的腹水单抗2B5，建立了检测罗氏沼虾诺达病毒的三抗体夹心酶联免疫吸附测定（TAS—ELISA）法，该方法检测灵敏度达0．98ng左右。Wesrtem blot分析表明，2B5能与MrNV 43kD的外膜蛋白特异性结合。     

罗氏沼虾苗种肌肉白浊病诺达病毒的分离和特性研究

本实验在以往罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)苗种肌肉白浊病病毒致病性的基础上对病毒特性进行深入研究。病虾除菌过滤液以1：50和1：250浸泡感染可复制出典型的症状，病毒对氯仿抵抗；用PEG法浓缩病毒后，35000r／min超速离心部分纯化病毒，在电镜下可观察到大量直径24nm的球形病毒颗粒，无囊膜，此外还观察到大小为14nln的病毒粒子；采用Trizol试剂对病毒进行了核酸提取，电泳结果发现有4条核酸条带，分别为3．0kb、1．3kb、0．8kb、0．75kb，对RNA核酸酶、S1核酸酶敏感，对DNA酶抵抗．为单链RNA病毒。用罗氏沼虾诺达病毒核酸探针进行分子杂交，探针可与提纯核酸及病虾样品匀浆液反应，Southern杂交表明3．0kb、1．3kb条带分别属于诺达病毒的RNAl和RNA2。对不同的发病样品进行了核酸电泳，4个典型症状的样品均存在诺达病毒条带，2个样品还存在小病毒核酸。上述结果表明，诺达病毒是引起罗氏沼虾苗种肌肉白浊病的主要病原。14nm小病毒与罗氏沼虾肌肉白浊病中的关系有待进一步的研究。     

中华绒螯蟹“腹水病”及“抖抖病”并发病病原的研究

于1998～1999年对中华绒螯蟹主要细菌性疾病“腹水病”、“抖抖病”并发病病原进行研究。结果表明经细菌学鉴定6株病原菌，其中5株为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)，1株为拟态弧菌(Vibrio mimicus),用细菌人工感染蟹，其LD     

罗氏沼虾育苗后海水的净化及重复使用试验

对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)育苗后的废海水生物净化及重复使用进行研究.采用自行设计的整体式生物过滤器,通过生物膜处理废水.结果表明:处理后的废海水中的NH+4-N和NO-2-N分别为0.47～1.21 mg/L和0.036～0.100 mg/L,符合罗氏沼虾幼体生长要求.2008年试验池水体12.76 m3,育苗各阶段使用50%～80%净化海水,虾苗产量达8万尾/m3,成活率96.2%,虾苗规格0.90 cm,与原配制海水无明显差异,节约净化海水57.52%.