| 白斑综合征病毒单克隆抗体的制备及BA-ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘问,钱冬,严小军.白斑综合征病毒单克隆抗体的制备及BA-ELISA方法的建立[J].大连水产学院学报,2009(Z1). |
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| 作者姓名： | 刘问 钱冬 严小军 |
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| 作者单位： | 宁波大学生命科学与生物工程学院;浙江省淡水水产研究所鱼病研究室; |
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| 基金项目： | 浙江省重大科技攻关项目(2005C12038); 浙江省科技厅院所重点资助项目(2006F12005) |
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| 摘 要： | 白斑综合征病毒(white spot syndrom virus,WSSV)是甲壳类动物的重要病原,作者采用提纯的WSSV免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,共得到3株能特异分泌抗WSSV的单克隆抗体(Mab)的杂交瘤细胞(1E9、1E10、4F5)。将3株杂交瘤细胞注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1∶104~105。1E9、4F5的抗体亚型均为IgG1,1E10的抗体亚型为IgG2b。特异性实验表明:3株单抗与虾类病原桃拉综合征病毒(TSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)、哈维氏弧菌(V.harveyi)均无交叉反应。Western bolt分析表明:单抗1E9与病毒28kD外膜蛋白特异性结合。采用生物素标记纯化后的单抗1E9,并建立了生物素-亲和素酶联免疫吸附法(Biotin-Adivin ELISA,BA-ELISA)用于WSSV的检测,该方法对提纯病毒的检测灵敏度约为4 ng,对病虾血淋巴的检测灵敏度达1∶25000。
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| 关 键 词： | 白斑综合征病毒 单克隆抗体 BA-ELISA |
Preparation and establishment of BA-ELISA of monoclonal antibodies against white spot syndrome virus |
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| LIU Wen,QIAN Dong,YAN Xiao-jun.Preparation and establishment of BA-ELISA of monoclonal antibodies against white spot syndrome virus[J].Journal of Dalian Fisheries University,2009(Z1). |
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| Authors: | LIU Wen QIAN Dong YAN Xiao-jun |
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| Institution: | LIU Wen1,2,QIAN Dong2,YAN Xiao-jun1(1.Faculty of Life Sicence , Biotechnology,Ningbo University,Ningbo 315211,China,2.Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries,Huzhou 313001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | white spot syndrome virus(WSSV) monoclonal antibodies BA-ELISA |
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