鸡cENS-2基因 U3-R序列的克隆分析与表达载体的构建

克隆并测序了1．2kb的鸡cENS-2（chicke nnormastem cell gene-2，cENS-2）基因3’端U3-R样结构调控序列。经序列分析和同源性比较表明，所克隆的U3-R序列包含多个转录因子结合位点如AP-1、GATA-1等，同时还包括一个重要的顺式调控元件B区，该区域在鸡正常的胚胎于细胞中有特异的增强子活性。该序列经pMD-18T载体过渡后，定向连接于切去启动子的pEGFP-N1载体的上游，构建了鸡cENS-2基因U3-R样序列调控的绿色荧光蛋白基因报告载体，为下一步对鸡胚胎于细胞（CES）细胞标记研究打下基础。     

鸡 CVH启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体的构建及鉴定

探索建立一种用绿色荧光蛋白对鸡原始生殖细胞进行标记分离的方法.克隆并测序鸡原始生殖细胞特异表达基因cvh1.6kb启动子序列.序列分析表明它含有类似于TATAbox和CAATbox的元件,在其远端上游区域还有多个GC富含区.将cvh基因启动子亚克隆到绿色荧光蛋白表达栽pegfp-1的多克隆位点,成功构建表达栽体pcvh-egfp.重组质粒在脂质体Lipofectamine<''TM>2000介导下分别转染鸡X期胚盘细胞和鸡胚成纤维细胞,并于转染后12h在荧光显微镜下观察转染效果.实验结果显示:在胚盘细胞转染后12h可观测到绿色荧光表达,转染后24h荧光细胞增多,细胞形态均呈圆形、体积较大;在鸡胚成纤维细胞未检测到gfp表达.实验结果说明,由cvh基因启动子控制下的gfp可在X期胚盘细胞特异表达,为利用流式分离技术PGCs标记分离、纯化研究奠定基础.     

波尔山羊MyoG基因的鉴定和序列分析

为了探明山羊MyoG基因的序列结构及其对肌肉的分化调控机制,用PCR产物直接测序的方法获得了波尔山羊MyoG基因2 363 bp长的DNA序列,并对该序列进行了分析.结果表明,波尔山羊MyoG基凶包括3个外显子、2个内含子及部分5'UTR(74 bp)和3'UTR(260 bp)区,编码序列长675 bp,共编码224个氨基酸.结构分析表明,该序列所编码的肽链没有信号肽,第1～138个氨基睃为波尔山羊MyoG基因的bHLH结构域.通过比对分析波尔山羊与已知的GenBank中的人类及其它物种MyoG基因发现,该基因编码区核苷酸以及推测的氨基酸同源性和物种间的亲缘关系相一致,无根系统进化树的聚类结果与这些物种本身的生理特性以及传统分类学中已知的生物分类结果相一致.波尔山羊MyoG基因的鉴定及序列分析为山羊肌肉发育调控的机理以及肉质改良等的研究提供了很好的生物学基础信息.     

坝上长尾鸡与海兰褐鸡肌肉营养成分对比研究

坝上长尾鸡是河北省唯一被列入《中国畜禽遗传资源志》的地方家禽品种。为了更好地保护和开发利用坝上长尾鸡资源,本试验选取相同饲养管理条件下200日龄的该鸡种和海兰褐鸡各180只,每组随机分为5个重复,每个重复36只。在同一条件下常规饲养,于230日龄每组挑选10只鸡屠宰,对肌肉中主要营养成分进行了比较分析。结果显示:1)坝上长尾鸡肌肉中的粗蛋白质和粗脂肪含量与海兰褐鸡相比差异不显著(P0.05)。2)2个鸡种间胸肌、腿肌中的必需氨基酸含量差异不显著(P0.05);坝上长尾鸡肌肉中的呈味氨基酸(谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸)含量显著高于海兰褐鸡(P0.05),腿肌中的苦味氨基酸——苯丙氨酸含量显著低于海兰褐鸡(P0.05)。3)坝上长尾鸡腿肌中的不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸和总脂肪酸含量显著低于海兰褐鸡(P0.05);坝上长尾鸡腿肌中的花生四烯酸和二十二碳六烯酸含量显著高于海兰褐鸡(P0.05)。4)坝上长尾鸡胸肌中的镁(P0.01)和铁(P0.05)含量显著或极显著高于海兰褐鸡,腿肌中的钠(P0.05)、镁(P0.01)和铁(P0.05)的含量显著或极显著高于海兰褐鸡。由此可见,坝上长尾鸡和海兰褐鸡的肌肉均品质优良,且坝上长尾鸡肌肉品质优于海兰褐鸡。     

鸡TLR1A基因正选择nsSNP与沙门氏菌易感性的关联性研究

为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联，挖掘其潜在的功能性位点，本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析，筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点，深入分析其与鸡沙门氏菌易感性之间的相关性。结果显示，rs739087452(I388L)和rs313678806(C815R)在种上及种内均受到正选择作用，且rs739087452(I388L)位点的变异使其蛋白稳定性降低。rs313678806(C815R)与鸡沙门氏菌的易感性显著相关（P<0.001）,C/C基因型为沙门氏菌抵抗型，表明rs313678806(C815R)可能是影响鸡沙门氏菌易感性的重要功能性SNP。本实验结果可为TLR1A基因标记在鸡抗病育种中的利用提供参考依据。     

依据锌指基因内含子序列构建羊、牛种系发生树的研究

为了研究绵羊和山羊的分歧时间,试验采用PCR方法扩增并克隆测定了大尾寒羊、小尾寒羊、鲁北白山羊、波尔山羊Zfy和Zfx基因最后一个内含子部分片段,结合已发表的欧洲牛的相应序列构建了3种反刍动物种系发生树.结果表明:(1)Zfy基因内含子具有独特遗传特征,可应用种属水平以上的分类阶元的种系发生分析,是研究反刍动物系统进化...     

德州驴的品种特性及开发利用

德州驴具有体格高大、结构匀称、适应性强等优良特性 ,是我国优良的大型良种驴。不仅可以负担各种劳役 ,而且可用于改良各地驴种 ,同时也是培育肉用驴的良好素材。驴肉是我国城乡居民喜食的肉食品之一 ,我国民间素有“天上龙肉 ,地下驴肉”之说。近年来随着市场经济的发展和人们膳食结构的变化 ,驴及驴肉的市场需求不断扩大 ,适时的发展肉驴业成为一项很有前途的项目。然而 ,目前缺乏专门的肉驴品种 ,因此加强肉用驴品种的培育和肥育十分重要。1　原产地及产地的自然条件德州驴产于鲁北平原沿渤海各县 ,以德州、无棣为中心产区 ,又称“无棣…     

山羊MyoG基因内含子Ⅱ变异及其在体质量上的遗传效应分析

旨在研究M yoG基因内含子Ⅱ多态性与波尔山羊及其级进杂交后代部分生长性状的关系.以纯种波尔山羊及波尔山羊与唐山奶山羊级进杂交一代(F1)、二代(F2)和三代(F3)为研究对象,采用测序和PCR-RFLP方法对山羊MyoG基因遗传多态性进行分析,并研究基因型对初生体质量、1月龄体质量和断奶体质量的影响.结果在MyoG基因内含子Ⅱ的1 823 bp处(依据序列号:FJ607135)发现了1个SNP(C→T),且存在3种基因型(AA、AB和BB),这3种基因型在波尔山羊和波唐级进杂交后代4个群体中的分布基本一致,B等位基因为优势等位基因.通过对有效等位基因数(Ne)、群体杂合度(H)、Shannon's信息指数(Ⅰ)和多态信息含量(PIC)等群体遗传参数的计算,发现此SNP是1个中、低多态位点.最小二乘分析结果表明,AA基因型与其它2种基因型比较有较小的初生体质量且达到显著水平(P＜0.05),而对于1月龄体质量和断奶体质量,3种基因型间虽未达显著水平(P＞0.05),但具AA基因型个体的表型值明显低于具其它2种基因型个体的表型值,AA、AB和BB 3种基因型在这3个生长性状的大小排列顺序均为BB＞ AB＞ AA.推测MyoG基因对山羊生长性状存在一定影响,提示选择带有B等位基因的个体有望提高山羊体质量相关的生长性状.     

奶牛OLR1 3′UTR A223C多态的生物学信息分析

[目的]探索氧化型低密度脂蛋白受体OLR13′UTR A223C多态与奶牛乳脂率高低紧密关联的分子机制。[方法]用miRanda（1.0）软件装载牛microRNA数据库,预测OLR13′UTR潜在的microRNA。[结果]共预测16个microRNA靶标,OLR13′UTRA223C突变定位于bta-miR-370靶标种子序列的互补区。[结论]由于OLR13′UTRA→C突变导致bta-miR-370靶标的消失,为OLR13′UTR A223C多态与奶牛乳脂率高低紧密关联的分子机制深入研究提供依据。