| 鸡 CVH启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体的构建及鉴定 |
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| 作者姓名： | 张传生 耿立英 杜立新 陈红菊 沈萍 付志新 |
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| 作者单位： | 耿立英,Geng Liying(河北科技师范学院生命科学系,河北昌黎,066600);张传生,Zhang Chuansheng(河北科技师范学院动物科学系,河北昌黎,0666001;中国农业科学院畜牧研究所国家畜禽分子遗传育种中心,北京,1001931);杜立新,Du Lixin(中国农业科学院畜牧研究所国家畜禽分子遗传育种中心,北京,1001931);陈红菊,Chen Hongju(山东农业大学动物科技学院,山东泰安,,271018);沈萍,付志新,Shen Ping,Fu Zhixin(河北科技师范学 |
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| 基金项目： | 河北科技师范学院博士启动基金，河北省自然科学基金? |
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| 摘 要： | 探索建立一种用绿色荧光蛋白对鸡原始生殖细胞进行标记分离的方法.克隆并测序鸡原始生殖细胞特异表达基因cvh1.6kb启动子序列.序列分析表明它含有类似于TATAbox和CAATbox的元件,在其远端上游区域还有多个GC富含区.将cvh基因启动子亚克隆到绿色荧光蛋白表达栽pegfp-1的多克隆位点,成功构建表达栽体pcvh-egfp.重组质粒在脂质体Lipofectamine<''TM>2000介导下分别转染鸡X期胚盘细胞和鸡胚成纤维细胞,并于转染后12h在荧光显微镜下观察转染效果.实验结果显示:在胚盘细胞转染后12h可观测到绿色荧光表达,转染后24h荧光细胞增多,细胞形态均呈圆形、体积较大;在鸡胚成纤维细胞未检测到gfp表达.实验结果说明,由cvh基因启动子控制下的gfp可在X期胚盘细胞特异表达,为利用流式分离技术PGCs标记分离、纯化研究奠定基础.
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| 关 键 词： | cvh基因 鸡原始生殖细胞 启动子 绿色荧光蛋白 胚盘细胞 |
Construction and identification of GFP reporter vectors driven by chicken CVH gene promoters |
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| Authors: | Geng Liying Zhang Chuansheng Du Lixin Chen Hongju Shen Ping Fu Zhixin |
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