坝上长尾鸡保种技术方案

为有效保护坝上长尾鸡的遗传多样性,文章针对坝上长尾鸡的保种目标、保种方法和效果监测提出技术方案,以期为坝上长尾鸡保种和今后的开发利用服务。     

坝上长尾鸡品种资源调查报告

坝上长尾鸡是坝上人民经长期选育,逐步形成的体型外貌和生产性能相对稳定的优质蛋肉兼用型地方品种,因分布于河北北部的承德、张家口坝上地区而得名,外形偏于蛋用型鸡,体型小,体躯较长,尾羽高翘,背线呈V形,主要特征是尾羽较长,公鸡有2～3根大翘羽,所测得的数据中最长达52 cm。母鸡尾羽上翘,主尾羽长15～20 cm,分两侧呈八字形。蛋白透明、口感弹性细腻,蛋黄大,呈金黄色,该鸡具有野外觅食力强、耐粗饲、抗病力强、肉嫩味美等特点。通过本次调研将坝上长尾鸡数量最多的沽源县长梁乡、平定堡镇和康保县丹清河乡作为重点保种基地,设立保种场,进一步建立保种核心群。同时,对坝上长尾鸡进行系统选育,巩固和提高其原有优良性状与特性。     

山羊MyoG基因Csp6Ⅰ酶切多态性分析

采用限制性内切核酸酶Csp6Ⅰ对山羊MyoG基因的959bp扩增产物进行PCR—RFLP多态性分析,检测到3种基因型,其酶切位点分别由2种共显性基因控制;对该片段的纯合型（AA、BB）分别测序发现,BB型在1791位点发生了T—C的突变。上述结果为首次试验证实山羊MyoG内含子二区域存在多态性。     

山羊MyoC基因Csp6I酶切多态性分析

采用限制性内切核酸酶Csp6I对山羊MyoG基因的959 bp扩增产物进行PCR一RFLP多态性分析,检测到3种基因型,其酶切位点分别由2种共显性基因控制;对该片段的纯合型(从、BB)分别测序发现,BB型在1791位点发生了TT→C的突变.上述结果为首次试验证实山羊MyoG内含子二区域存在多态性.     

细胞色素b基因标记绵羊种内亲缘关系的初步研究

[目的]从群体的角度,初步探讨细胞色素b（Cytb）基因标记绵羊种内亲缘关系。[方法]用PCR方法扩增出滩羊和洼地绵羊2个地方绵羊品种共112个个体的线粒体DNA（m tDNA）Cytb基因,用限制性内切酶EcoRΙ对其进行限制性长度多态性（RFLP）分析。[结果]在56个滩羊样品中,有51个个体检测到1个酶切位点,5个个体没有检测到切点,呈现出2种限制性态型。在56个洼地绵羊样品中均能检测到酶切位点,表现为1种限制性态型。[结论]受试绵羊品种线粒体DNA多态性较贫乏,且m tDNA Cytb基因在绵羊品种内、品种间都有很强的保守性。因此,Cytb基因标记绵羊种内亲缘关系有一定的局限性。     

芯片和重测序在猪遗传结构研究中的应用比较

旨在比较芯片与测序SNP分型技术、标记密度对遗传多样性、系统发生树和近交系数等分析结果的影响，探讨遗传结构分析中低成本、高效的分型方法和适宜的SNP密度。本研究以35头枣庄黑盖猪的CAUPorcineSNP50芯片数据和重测序数据为基础，以重测序数据为“原材料”构建了随机34K、均匀34K、均匀340K和均匀3 400K 4个SNP面板，利用CAUPorcineSNP50芯片和各SNP面板的SNP标记分析了枣庄黑盖猪的遗传多样性、系统发生树和基因组近交系数。结果表明：1)利用芯片SNP标记分析的观察杂合度(observed heterozygosity,H_O)(0.385 9 vs. 0.320 0～0.324 1)、期望杂合度(expected heterozygosity,H_E)(0.381 3 vs. 0.333 5～0.334 6)、遗传距离(0.305 7 vs. 0.279 8～0.280 6)等遗传多样性指标值均高于各测序SNP面板，利用芯片SNP标记构建的系统发生树与各测序SNP面板存在较大不同，这可能是由于芯片设计中倾向于选...     

网络教学在生物化学教学中的实践

计算机的普及与发展使得教学方法日趋丰富.在传统的教学基础上,以计算机为工具的网络技术为教学搭建了新的平台.在生物化学教学中,应用网络对学生进行学习指导,为提高学生的学习兴趣和进行自主性学习提供了可能.虽然网络教学在生物化学教学中具有传统教学不可替代的优势,但是也存在一些不足.本文就生物化学网络教学的建设、优势、不足及对...     

山羊MyoG基因启动子区序列分析与结构预测

为探明山羊MyoG基因的启动子序列与结构及转录调控机制,本研究设计了1对引物,采用PCR扩增、测序以及序列比对分析,从波尔山羊基因组中扩增出一段长度为969bp的山羊MyoG基因的5′侧翼序列,其GC含量为50.6%。经过生物信息学分析,确定了其转录起始位点及活性区域;发现在转录起始位点上游-24bp处存在1个TATA-box,另外还发现了1个GC-box、2个CAAT-box、2个E-box和1个富含A-T碱基的模体结构;该序列还包含HSF、ADR1和cap等转录因子结合位点。通过比对分析,所得山羊MyoG基因5′侧翼序列与牛、马鹿、人、小鼠和鸡同源序列的相似性在37.22%～96.85%之间,说明不同物种间该序列具有一定的保守性。本研究为进一步探讨山羊MyoG基因的表达和调控机制奠定了理论基础。     

坝上长尾鸡育成期生长发育规律研究

为研究坝上长尾鸡育成期生长发育规律,选取660只坝上长尾鸡(公鸡331只,母鸡329只)进行试验。结果表明,坝上长尾鸡育成期体重逐渐增加,其中8~20周龄白羽、黑羽、麻羽、白花公鸡与母鸡体重差异极显著(P0.01),10~20周龄银灰公鸡与母鸡体重差异极显著(P0.01),8周龄银灰公鸡与母鸡体重差异显著(P0.05),芦花公鸡与母鸡育成期体重差异不显著(P0.05);8~20周龄不同羽色公鸡体重差异不显著(P0.05),8~20周龄芦花母鸡体重显著大于白羽、黑羽、麻羽、白花、银灰母鸡(P0.05),10~20周龄银灰母鸡体重显著小于白羽、黑羽、麻羽母鸡(P0.05),18~20周龄银灰母鸡体重显著小于白花母鸡(P0.05)。随着周龄的增加体重绝对生长值、相对生长率减小;育成期体斜长、龙骨长、胫围、胸宽、胸深、胫长、骨盆宽呈增加趋势,公鸡的累积生长值极显著大于母鸡,其中体斜长、龙骨长、胸宽、骨盆宽的绝对生长值先增加后降低,体斜长和胸宽的绝对生长值在16周龄达到最大,龙骨长和骨盆宽在14周龄达到最大;胸深和胫长绝对生长值呈下降趋势;胫围在育成后期绝对生长值增加;所测得的公鸡20周龄主尾羽长度多数达21 cm以上,最长达43 cm,母鸡尾羽上翘,主尾羽长约10~21 cm,分两侧呈八字形。     

北京油鸡和来航鸡脾脏差异表达microRNA的鉴定与分析

【目的】明确北京油鸡和来航鸡脾脏重量、组织结构及其miRNA表达谱的差异,筛选与两个鸡种免疫应答能力差异相关的候选基因,为家禽抗病育种研究奠定基础。【方法】选取1日龄同期孵化的北京油鸡和来航鸡母雏各45只作为试验材料,在相同营养水平和环境条件下饲养,42日龄测量体重和脾脏重。每个品种随机选取3只个体（体重接近群体均值）,取其一半脾脏组织制作石蜡切片,利用H.E.染色,显微镜下观察脾脏组织结构、脾小体的数量和动脉周围淋巴鞘厚度。提取另一半脾脏组织中的小RNA,等量混合组成2个RNA池,构建cDNA文库,利用Solexa平台进行高通量测序。测序结果与参考基因组数据库比对获得表达基因。利用Mireap软件预测新miRNAs基因。利用RPKM（reads per kb per million reads）方法计算基因的表达量,根据FDR（false discovery rate）＜0.001和|log₂ ratio(T/CK)|≥1的标准筛选差异表达的基因。利用TargetScan和Pictar软件预测差异表达miRNA的靶基因,并对其进行GO和KEGG数据库功能注释。利用DAVID软件对靶基因蛋白进行富集分析。将预测靶基因与已知脾脏重和脾脏指数相关QTL区域注解的基因取交集。【结果】在42日龄,北京油鸡的体重和脾脏重均显著高于来航鸡（P＜0.01）。组织学观察显示,两个鸡种的脾脏组织结构发育完整,可见清晰的白髓、红髓、脾小结和动脉周围淋巴细胞鞘。与来航鸡相比,北京油鸡脾小体的数量更多、动脉周围淋巴鞘更厚,鞘内淋巴细胞也更为密集。高通量测序在两组样本共鉴定出486种已知miRNA 、130个候选miRNA 和216个共表达miRNA 。两组间显著差异表达的miRNA共计35种,其中在北京油鸡中有8个表达上调,27个表达下调,它们的变化倍数在1.002-10.41之间。差异基因表达丰度在前5位的miRNA是miR-2954、miR-6606-5p、miR-146b-5p、miR-21-3p和miR-21-5p,对其2 767个靶基因的生物信息学分析结果显示,它们参与了T和B淋巴细胞的分化、免疫器官的发育、蛋白质磷酸化和细胞形态发生等生物学过程,并在泛素介导的蛋白水解、凋亡和磷脂酰肌醇信号系统等14个通路中显著富集。miR-6606-5p、miR-146b-5p的共同靶基因BLM和miR-2954的靶基因IRF8均定位于脾重或脾指数相关的QTL区域。【结论】（1）42日龄北京油鸡和来航鸡脾重、组织结构及其miRNA表达谱的确存在一些差异。（2）某些重要的差异高丰度表达miRNA(如miR-2954、miR-6606-5p、miR-146b-5p 、miR-21-3p和miR-21-5p ) 可能通过对靶基因调控,来参与调节T、B淋巴细胞分化、增殖、激活等过程,进而影响脾脏的重量、组织结构及其免疫应答能力。