利用CRISPR/Cas9技术构建PRVGD株gI和gE缺失毒株及其生物学特性研究

本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对本实验室分离得到的PRV GD株的gI和gE基因进行基因敲除,经蚀斑纯化结合PCR鉴定的方法获得gI和gE基因缺失毒株,命名为PRV GD-delgI/gE。试验测定了该基因缺失病毒在PK-15细胞中培养的一步生长曲线及其对小鼠的致病力。试验结果表明,与亲本毒株PRV GD株相比,PRV GD-delgI/gE在PK-15细胞中的繁殖能力有轻微降低,对小鼠的毒力明显降低,且该基因缺失病毒遗传稳定,可作为新型PRV疫苗的候选毒株,并为针对变异毒株的控制和新型疫苗的研制奠定了一定的基础。     

鸭鹅伪结核病的分析诊断和防治方案

伪结核病是由伪结核耶尔森菌引起的一种接触性传染病。其特征性病变为多个器官中形成类似结核病的干酪样结节。伪结核病广泛分布于世界各地,其易感动物以家兔、鼠等啮齿动物为主,哺乳动物和禽类也可感染。虽然鸭鹅伪结核病发生较少,但也有报道。北京某麻鸭养殖场曾暴发本病,发病率为22.70%,死亡率为13.60%。需要养殖者给予一定重视。本文从病原、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和鉴别、预防措施和治疗方法等方面对鸭鹅伪结核病进行了介绍。     

安徽省猪伪狂犬病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性、热性传染病。自2011年底以来,PRV发生了变异,传统的PRV弱毒疫苗已不能对PRV变异株提供完全保护,这给我国PR防控带来了巨大挑战。为了解安徽省PRV流行特征及其主要毒力基因遗传变异情况。利用PCR技术、细胞接种试验、电子显微镜观察、间接免疫荧光试验及兔体接种试验等方法,对安徽省临诊病例中疑似PRV感染的病猪进行病原检测及PRV分离鉴定,并通过设计6对特异性引物对PRV分离株主要毒力基因(gE、gI、TK、gB、gC、gD)进行克隆及测序分析。2016—2018年安徽省临诊病例中共分离鉴定15株PRV;PRV分离株主要毒力基因序列均与2011年后国内PRV变异株同源性较高;与2011年前国内PRV经典株序列比对,PRV分离株gE、gB、gC及gD基因存在多个位点的一致性替换、插入或缺失,且gE、gC基因多位点突变位于其重要的抗原表位区。本研究分离的15株PRV均为变异株,变异株已成为安徽省主要的流行毒株。15株PRV分离株的gI、TK基因序列较为保守,而gE、gC蛋白抗原表位区域氨基酸的突变可能导致其毒力及抗原性发生改变。部分PRV分离株与邻近地区PRV序列同源性均为100%,可能与频繁跨省调运生猪、跨区引种等原因有关。     

一例猪弓形虫病与伪狂犬病混合感染诊治

猪弓形虫病为重要人畜共患性寄生虫病,伪狂犬病可引起仔猪腹泻、呕吐及神经症状,对养猪业危害巨大。近期,河南省遂平县某小型养猪场繁殖母猪出现高热、流产及死胎等症状,仔猪腹泻、呕吐及神经症状,部分仔猪死亡。通过观察发病猪群临床症状及病理变化,结合实验室诊断技术,确诊为猪伪狂犬病和弓形虫病混合感染所致。根据诊断结果,对发病猪群进行隔离,部分发病严重猪群进行扑杀及无害化处理,对全场猪群紧急免疫接种伪狂犬病毒疫苗(HB-98株)及磺胺类药物治疗等措施。3周后回访,该猪场疫情得到有效控制,效果显著。     

云南省永德县猪伪狂犬病血清学调查

为了解云南省永德县猪伪狂犬病流行情况,以永德县养猪示范基地、散养户、公猪站为对象,采集2个乡镇229头种母猪血液和30头种公猪精液,采用ELISA和PCR方法分别检测猪伪狂犬病毒gB免疫抗体、gE感染抗体和病原。结果表明永德县种公猪伪犬病抗原检测结果均为阴性,种母猪伪狂犬病免疫抗体阳性率为53.28%,感染抗体阳性率为3.06%,为永德县猪伪狂犬病流行病学调查和防控提供数据参考。     

引起猪便秘、肠阻塞症状的常见病的诊断

1猪瘟 猪的急性、热性、接触传染性疾病,由猪瘟病毒引起。病猪体温升高,病初便秘,随后下痢,有时呕吐。少数病猪可发生惊厥,常在数小时或数天内死亡。除急性型外,尚有慢性型、迟发型和温和型猪瘟。2伪狂犬病本病是由伪狂犬病毒引起的急性传染病。临床表现为体温升高,新生仔猪表现神经症状,消化紊乱,2周龄内哺乳仔猪以发热、呕吐、下痢、厌食,间歇性痉挛,后躯麻痹为特征。