吉林黄牛引入牦牛血液杂交改良效果

采用含有1／2野牦牛血液的冻精为吉林当地10头黄牛输配。结果，受配牛妊娠率为100％，产犊成活率为100％，杂种后代牛在采食性能、抗寒暑能力及生长速度方面都优于本地黄牛。初步表明利用含1／2野牦牛血液的冻精改良本地黄牛有较强的种间杂种优势，可为生产利用。     

绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立

为了建立检测绵羊家畜衣原体血清抗体的间接ELISA方法,本试验构建pET-28b-ompA重组表达质粒,经诱导表达和纯化后,对重组主要外膜蛋白(MOMP)进行Western blot鉴定;以MOMP为包被抗原,通过反应条件筛选建立绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、重复性和符合性,并进行临床样品检测。结果显示,MOMP以包涵体形式表达,经Western blot鉴定重组蛋白具有良好的反应原性。优化反应条件为：抗原包被浓度为1 mg/L,37℃静置孵育1 h;血清抗体稀释倍数为1∶100,37℃反应1 h;酶标二抗稀释倍数为1∶5 000,37℃孵育1 h;底物显色条件为37℃避光5 min。利用52份绵羊血清确定ELISA方法的阳性判定临界值为P/N=2.156。该方法的敏感性、特异性和重复性较高。用该方法与间接血凝试验对86份血清进行检测,两者符合率为73.2%。用该方法对临床采集的205份绵羊血清样品进行检测,阳性率为34.1%。结果表明,本试验建立的绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法具有较高的特异性和敏感性,可应用于临床检测。     

萨福克肉羊胚胎移植效果

羊的胚胎移植技术是一项先进的家畜繁殖控制技术,该技术可以使优秀母羊的繁殖潜力得以充分发挥。吉林省长岭县14号种羊场,是吉林省首批从澳大利亚直接引进萨福克肉用种羊超百只的纯种繁育场,为了加快萨福克肉用种羊的纯种扩繁速度,从2003年起开始利用引进的萨福克肉用种羊做供体,     

非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位定位

【目的】制备非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）p30蛋白的单克隆抗体（monoclonal antibodies,MAbs）并初步分析其所识别的线性抗原表位,为ASFV及其抗体检测方法的建立及p30蛋白结构和功能的研究奠定基础。【方法】将原核表达并纯化的p30重组蛋白作为免疫原,免疫6—8周龄BALB/c雌鼠,每两周免疫1次,共免疫3次,首次免疫是抗原与等体积的弗氏完全佐剂乳化后免疫,第二次和第三次免疫与等体积的弗氏不完全佐剂乳化,3次免疫后1 w断尾采血,间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清抗体效价,选择血清效价最高的小鼠进行加强免疫,3 d后取小鼠脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按照4﹕1的比例使用PEG进行常规细胞融合。利用重组p30蛋白作为包被抗原,间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,有限稀释法进行克隆纯化,直至筛出能够稳定分泌抗体的MAbs。将ASFV接种于猪肺泡巨噬细胞,以筛选的MAbs为一抗、兔抗鼠HRP-IgG为二抗,进行间接免疫荧光试验（IFA）。将感染和未感染ASFV的细胞沉淀处理后进行 SDS-PAGE并转印至硝酸纤维素膜,分别以IFA鉴定为阳性的MAbs上清为一抗、兔抗鼠HRP-IgG为二抗,进行Western blotting分析,筛选获得p30 MAbs。根据已知序列设计引物扩增p30ab与p30bc两段截短基因,其中p30ab代表由第86—153位氨基酸残基的截短体,p30bc代表由第120—187位氨基酸残基的截短体,原核表达部分重叠的截短p30蛋白,最终获得重组蛋白GST-p30ab与重组蛋白GST-p30bc。分别以GST-p30ab和GST-p30bc融合蛋白为包被抗原,以5株MAbs为一抗,以兔抗鼠HRP-IgG为二抗, 通过间接ELISA方法初步定位p30蛋白的抗原表位。【结果】以纯化的重组蛋白为包被抗原,经间接ELISA试验筛选出25株可分泌抗重组 p30蛋白的杂交瘤细胞株。IFA结果显示,5株MAbs（8F4、1D3、1H2、6C3和8E11）与ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞IFA 试验呈阳性;Western blotting结果显示,5株MAbs均能够与ASFV感染的细胞呈阳性反应,与未感染病毒的细胞呈阴性反应。试验构建的p30截短体重组蛋白GST-p30ab以可溶和包涵体两种形式表达,而GST-p30bc仅以包涵体形式表达,以两组截短体融合蛋白为包被抗原,通过间接ELISA检测出MAbs 8F4、1H2和6C3与两个重组蛋白均能有效结合,证明MAbs 8F4、1H2和6C3抗原识别区域为两组截短蛋白重叠区域,即第120—153位氨基酸;MAbs 8E11与1D3则只能与GST-p30ab蛋白结合, 证明MAbs 8E11与1D3抗原识别区域为两个重组蛋白的非重叠区域,即第86—119位氨基酸。【结论】本研究可溶性地表达了p30蛋白的第86—153位氨基酸截短体重组蛋白,制备了5株p30 MAbs,定位到2个p30蛋白抗原表位。结合ELISA和IFA,可建立十分可靠的ASFV及其抗体的检测手段。     

国内外肉牛生产现状及发展对策

分析了国内外肉牛业的生产现状与特点，以及我国肉牛业自身的发展优势，并根据多年的科研与实践经验，就我国未来肉牛业的发展提出建议．     

引进肉羊胚胎移植技术应用的研究

利用胚胎移植技术对引进优质肉羊品种进行快速繁育,是加速育种进程与迅速提高我国绵羊肉用品质的捷径。本次非繁殖季节胚胎移植平均每只供体羊冲出可用胚4.8枚,最高为21枚,鲜胚移植妊娠率86.67%,总体达国内领先水平。     

不同类型牛舍保温性能的研究

通过对3种不同结构及墙壁厚度的牛舍保温对比试验,对牛舍保温性能影响最大的是墙壁厚度,在舍外气温为-20℃的情况下,与墙壁厚度24、37和50cm相对应的舍内最低温度分别为-6.97、-2.03和5.57℃,极差达12.5℃,其作用强度占全部因子作用总和的59.78%;棚顶类型是第二因素,极差为5.67℃,其影响强度占27.05%,其中以塑料膜暖棚顶(夜间加保温层)的保温效果最好;试验误差的影响很小,只占全部因素总和的3.96%。经方差分析检验,墙壁厚度对畜舍保温性能的影响显著。     

不同除草剂防除豆科草地杂草效果研究

在当年播种的公农1号紫花苜蓿和白牧1号草木樨人工草地上进行了精禾草克、精稳杀得、拿捕净及豆草特4种除草剂的除草效果试验。结果表明:4种除草剂灭杀效果排序为:精禾草克>精稳杀得>拿捕净>豆草特。豆草特不仅对一年生禾本科杂草有灭杀作用,而且对苍耳、苋菜等阔叶杂草也有较强的灭杀作用。因此,在对以禾本科为主要杂草的豆科牧草人工草地进行除草时,应首选精禾草克,对以苍耳等阔叶杂草为主的豆科牧草人工草地应使用豆草特。4种除草剂对翌年豆科牧草的生长和产草量没有影响。     

低温保存萨福克种公羊鲜精效果研究

肉用种公羊鲜精低温(2～5℃)保存,是根据精子的代谢活动随着温度的降低而逐渐减弱,当降至10℃以下时基本受到抑制的特点,延长鲜精的利用时间。2009年8月16日与22日,分2次在吉林省长岭县14号种羊场,对6头萨福克纯种肉用种公羊采精后作低温保存技术处理,用处理后的鲜精进行24、48 h活力评定,按五级评分法,活力均达4～5分。选择90只东北细毛羊2岁母羊经同期发情处理后进行人工授精,受精率达60.61%～63.63%。