冷冻奶牛胚胎移植黄牛研究

采用国产试剂、器械超数排卵22头黑白花奶牛,超排成功率72.7％(16/22)。采集胚胎143枚,其中可用胚占70％(100/143),超排母牛采集胚数和可用胚数头均6.5枚和4.5枚,按采得胚母牛计算采集胚数和可用胚数头均8.9枚和6.3枚。胚胎移植经冷冻—解冻后68.2％(30/44)可用,胚胎移植18头同期发情黄牛受体,3头妊娠。其中两头受体双胎6个月时流产,1头受体黄牛产下1头黑白花公犊。     

延边黄牛胚胎移植及诱发双胎试验

为了研究适于延边黄牛的超数排卵及胚胎移植技术,选择2头供体牛和7头受体牛,进行了FSH-PG超数排卵和胚胎移植试验.结果表明,供体获得7枚可用胚胎,其中诱发双胎(人工授精后移植胚胎)3枚,单胚移植4枚,妊娠5头,移植率71.4%,诱发双胎率66.7%.     

肉羊胚胎移植技术应用初探

为了发展肉用羊生产提供优质种羊,推进肉用羊产业快速发展,利用萨福克肉羊开展胚胎移植,本试验采用PG+FSH方法,对20只萨福克羊进行了超数排卵处理,超排有效率为100%,共冲胚158枚,平均采胚8.3枚/只,最高采配25枚;采用2次PG注射法,对100只本地哈萨克绵羊进行同期发情处理,24h发情率为95%;胚胎移植后妊娠率76.47%,实际产羔率48.24%。     

波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究

1999～2000年,在成都波尔山羊种羊场进行了波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究.对12只供体用FSH减量法进行超排处理,回收胚胎257枚,平均21.4±11.1枚,其中可用胚206枚,平均17.2±8.33枚.将170枚可用胚移植给同期发情的78只雅安奶山羊受体,其中2只在妊娠2个月后流产,49只受体羊妊娠到期产下纯种波尔山羊羔88只,移植受体妊娠率65.4%(51/78),产羔受体比率62.8%(49/78),胚胎成羔率51.8%(88/170).平均每只波尔山羊供体通过胚胎移植增加纯种后代7.33只.其中RB52号波尔山羊获16枚胚胎,移植给8只奶山羊(双胚),全部妊娠,产下13只纯种波尔山羊,胚胎成羔率达81.3%.结果表明,波尔山羊胚胎移植奶山羊能获得较高的妊娠率和胚胎成羔率,已可从研究阶段发展到产业化应用.     

供体母羊及与配公羊个体对波尔山羊胚胎移植效率的影响

对135只波尔山羊供体母羊进行超排处理,回收卵总数2504枚,平均18.55±7.63枚,其中可用胚2182枚,平均16.16±7.46枚.将2127枚鲜胚移植给1182只受体,妊娠率为63.03%(745/1182),移植胚胎成羔率为52.1%(1108/2127).试验结果表明,供体各个体之间所获得的胚胎移植成羔率存在着显著差异(P＜0.05),胚胎成羔率大于80%的供体平均每只获胚胎移植羔羊14.8±4.27只,胚胎成羔率小于20%的供体平均每只获胚胎移植羔羊1.83±1.17只,其中个体获得羔羊最多的为21只(21/26).有9.63%的供体胚胎移植成羔率大于80%,有4.44%的供体胚胎移植成羔率小于20%.14只公羊配种的135只供体获得的胚胎可用率同样存在着显著差异(P＜0.05).     

杜泊绵羊胚胎移植技术与分析

杜泊肉用绵羊（DORPER）是世界公认的肉用羊之一，但是从国外购进纯种杜泊绵羊价格昂贵，为了加速扩大种群，降低成本，超大东营畜牧分公司于2002年10月至2003年4月与莱阳农学院、新西兰胚胎移植专家合作进行胚胎移植应用试验。使用CIDR栓＋FSH等对8只供体杜泊棉羊进行超数排卵处理。在放入阴道栓的第12～15天，连续均量早晚肌注FSH，6只供体羊发情、配种、采胚，共采胚47枚，可用胚41枚，可用胚率87．23％（41／47），将41枚3日龄可用胚移植给28只受体小尾寒羊，妊娠率为71．4％。2003年3月20只妊娠受体羊共产活羔32只，产羔率为160％。选择以青年杜泊母羊做供体，可降低胚移生产成本30％以上，选择经产小尾寒羊做受体，可提高初生重，降低难产率。     

杜泊绵羊和波尔山羊冷冻胚胎引进移植扩大试验

从南非引进杜泊绵羊(218枚)和波尔山羊(104枚)冷冻胚胎,以本地小尾寒羊(165只)和奶山羊(114只)为受体,经同期发情处理,分别向受体羊子宫角内植入1～2枚解冻的可用胚胎。结果表明:绵羊受胎率为36.7%,其中单胚受胎率为23.3%,双胚受胎率为46.8%。山羊受胎率为31.3%,其中单胚受胎率为25.0%,双胚受胎率为45.8%。胚胎移植绵羊和山羊双胚的受胎率均高于单胚(P<0.05)。而且与自然繁殖的羔羊相比,1～3月龄体重和平均日增重基本一致(P>0.05),羔羊的生长发育正常,经济效益显著。     

不同因素对西藏阿旺绵羊胚胎冷冻与移植效果的影响

为探究西藏阿旺绵羊推行胚胎移植及胚胎冷冻技术的可行性,以阿旺绵羊为供体,澳湖羊为受体,探讨发情期内不同月份对阿旺绵羊超排效果的影响、不同发育阶段鲜胚和移植数量对母羊受胎率及产羔率的影响,以及冷冻方法对胚胎移植的影响。结果显示：发情期7月超排组平均可用胚数(3.95±4.23)显著低于10月超排组(5.45±4.03);阿旺绵羊胚胎移植2枚桑椹胚的受体妊娠率最高,达到81.81%,产羔率达57.58%,具有显著性差异;阿旺绵羊胚胎程序化冷冻组受体妊娠率为35.48%,显著优于玻璃化冷冻组受体妊娠率13.63%。以上结果表明,西藏推行阿旺绵羊胚胎移植技术的可行性较高。     

湖南农学院山羊胚胎移植技术研究通过专家鉴定

由湖南农学院牧水系副教授黄允基主持,西北农业大学、浏阳县畜牧水产局等单位协作完成的“山羊胚胎移植技术研究”课题,于1992年9月10日在湖南省科委和农业厅共同主持下通过省内外专家教授的鉴定。该项研究系统地研究了山羊胚胎移植、胚胎冷冻、冻胚移植等技术。对12只供体山羊先进行同期发情,后用FSH+LH进行超排处理,超排效果达到91.67%(11/12),平均每只羊排卵13.55士8.62枚,回收可用胚4.09枚。超排成功率和排卵数达到国内外同类试验的先进水平。     

牛胚胎移植技术

牛胚胎移植是指对生产性能优良和遗传性稳定的母牛,经过超数排卵处理后,将多出自然排卵数几倍的受精卵取出,分别移植到生产性能较低和遗传性差的母牛子宫内,使其着床、妊娠,并产出优良后代的技术。2000～2009年,台安县畜牧技术推广站对牛胚胎移植技术的各个环节深入试验研究,共超排供体牛10头,冲胚100枚,引进加拿大纯种胚胎300枚,     

杜泊绵羊冷冻胚胎移植

介绍了从新西兰引进的冷冻杜泊羊胚胎解冻后移植到同期发情湖羊和小尾寒羊母羊受体的方法步骤,并分析、评价了胚胎移植的效果。结果表明:受体羊总平均同期发情率为78.4%,胚胎移植利用率达49.1%,妊娠率达59.4%,产羔率达58.0%,羔羊出生重为4.7 kg(公)和4.3 kg(母),羔羊1月龄和3月龄体重分别为14.9kg和32.4 kg;不同批次和不同品种受体间胚移效果亦存在不同程度的差异;4批次试验共移植冷冻胚胎475枚,产羔266只,现存活245只。该研究建立了可靠而有效的杜泊绵羊冷冻胚胎移植技术,有望在畜牧业科研和生产中广泛推广应用。     

不同氧气浓度对绵羊体外受精胚胎凋亡相关基因表达的影响

[目的]研究绵羊胚胎体外发育过程中细胞凋亡的机制,以进一步提高胚胎体外发育能力。[方法]利用Real-time PCR技术,分别检测凋亡相关基因Mcl-1、Bad、Bak、Bik和Caspase-3在低氧环境(5%O2)和高氧环境(20%O2)培养的绵羊体外受精(IVF)胚胎中的表达水平。[结果]不论是高氧环境还是低氧环境,从2-细胞阶段到囊胚期均可检测到Mcl-1、Bad、Bak、Bik和Caspase-3的表达,Caspase-3基因表达水平随着胚胎的发育有逐渐增高的趋势,且高氧和低氧间差异不显著(P0.05);从8-16细胞期开始,Mcl-1、Bad、Bak和Bik表达水平都显著增加,且低氧环境中的表达水平均明显低于高氧环境中的表达水平(P0.05)。[结论]氧气浓度在一定程度上影响了绵羊胚胎中凋亡相关基因的表达,绵羊胚胎细胞凋亡可能是凋亡相关基因Mcl-1、Bad、Bak、Bik和Caspase-3相互协同的结果。     

新疆细毛羊超数排卵效果研究

[目的]提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2~8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材.[方法]分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案.[结果]不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P<0.01):1.5周岁以内的新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P<0.01);FSH剂量在150~200 U/只范围内不影响超排效果和胚胎质量( P>0.05):FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P<0.01).[结论]新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150~200 U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用.     

影响杜泊绵羊超数排卵效果的因素分析

对53只杜泊绵羊实施超排处理,系统地分析了供体羊年龄、胎次、重复超排、两次超排间隔时间、胚胎回收部位和季节对超数排卵效果的影响.结果表明:24月龄以上羊平均回收胚胎数(8.71)显著高于8～12月龄羊(7.18), 8～12月龄羊可用胚胎所占比例(95.29%)显著高于13～24月龄羊(75.96%);经产二胎羊平均回收胚胎数(8.71)显著高于初产羊(7.00),初产羊可用胚胎所占比例(96.14%)显著高于经产一胎羊(75.88%);第3次超排处理平均回收胚胎数(6.60)显著少于首次(8.71)和第2次处理(8.10),首次超排处理平均可用胚胎数(7.47)高于第2次(5.90)和第3次超排处理(5.00);2次超排间隔10个月可用胚胎所占比例(92.14%)显著高于间隔1个月(77.09%);从输卵管平均回收胚胎数(10.14)显著多于从子宫角平均回收胚胎数(8.22);秋季超排处理平均可用胚胎数和可用胚胎所占比例(7.53和91.67%)均显著高于冬季(5.97和74.90%).     

影响杜泊绵羊胚胎移植效果的因素分析

系统探讨了在生产条件下杜泊绵羊移植胚胎数量、胚胎发育阶段、受体重复利用、卵巢黄体数量、季节和移植方法对胚胎移植效果的影响.结果表明:移植2枚或3枚胚胎的妊娠率(63.79%、61.90%)显著高于移植1枚胚胎的妊娠率(50.30%)(P<0.05);2～8细胞胚胎的移植妊娠率与桑椹胚/囊胚移植妊娠率差异不显著(P>0.05);受体重复利用对妊娠率无显著影响(P>0.05);受体单侧卵巢上有3个及以上黄体数妊娠率最高,但与单侧卵巢上有1个和2个黄体的妊娠率无显著性差异(P>0.05);在秋季进行胚胎移植,妊娠率为59.77%,高于冬季移植的妊娠率(52.94%),但差异不显著(P>0.05);常规手术法与腹腔内窥镜法移植相比,妊娠率无显著差异(P>0.05).     

杜泊羊冷冻胚胎移植的影响因素

为进一步提高杜泊羊的冻胚移植成功率,于春秋两季同期处理湖羊和小尾寒羊受体共997只(次),同期发情782只(次),发情率达78.4%,其中湖羊春秋两季平均发情率为84.6%,显著高于小尾寒羊(73.9%)(P＜0.01),秋季两品种平均发情率83.3%,显著高于春季75.8%(P＜0.01);对431只发情受体羊进行移植,总妊娠率为58.5%(252/431),产羔率为58.0%(250/431).其中湖羊为受体的春秋两季平均妊娠率62.5%,高于小尾寒羊(54.7%);秋季两品种的平均妊娠率为64.8%,显著高于春季(52.5%).囊胚移植后的平均妊娠率为61.5%,显著高于桑椹胚(41.5%),其中A级囊胚为67.4%,显著高于B级囊胚(P＜0.05)和所有桑椹胚(P＜0.01);B级囊胚显著高于B级桑椹胚(P＜0.05),B级囊胚与A级桑椹胚间及A、B级桑椹胚间均无显著差异;C级囊胚和桑椹胚均未见妊娠.此外,受体羊卵巢黄体发育状况及移植技术熟练程度对妊娠率也有显著影响.     

性控冻精在肉羊胚胎移植中应用效果的研究

为进一步研究肉羊性控精液在胚胎生产上的应用,以萨福克、无角陶赛特纯种肉用绵羊为供体,本地小尾寒羊杂交后代和湖羊为受体,利用子宫角深部输精及一般人工授精等辅助生殖技术使用性控冻精与普通鲜精对两品种肉羊进行人工授精,统计不同品种肉羊的受胎率和可用胚数,对获得的性控胚胎和普通胚胎进行移植,并对比其移植效果。结果表明:萨福克肉羊和无角陶赛特肉羊超排后黄体数差异不明显(P>0.05);普通精液输精所获得的胚胎数极显著高于性控冻精(P<0.01);在受胎率上也做了比较,但差异不显著,受胎率43.2%。由于精液在通过流式细胞仪时,对精子顶体造成一定损伤,因此,无论是子宫角输精或阴道子宫颈输精均影响受精率,但性控精液的推广应用确实可以加速家畜遗传育种速度,缩短育种周期。鉴于此,今后对性控精液的研究重点应该放在精液分离过程中对精子的保护,以减少对精子的损伤。     

无角道塞特羊胚胎移植技术研究

(1)超排处理无角道塞特绵羊163只,育成羊(76只)只均回收胚胎5.53枚,可用胚3.91枚,经产母羊(87只)只均回收胚胎7.55枚,可用胚6.34枚。经产羊平均回收胚胎总数高于育成羊(P<0.05)。春季和秋季之间超排效果差异不明显。重复超排羊和非重复超排羊之间平均回收胚胎总数和可用胚胎数差异均不显著(P>0.05)。(2)共处理受体876只,春季和秋季受体的同期发情率分别为56.37%和89.02%,发情受体利用率分别为84.67%和88.77%。(3)移植受体545只,妊娠318只,产羔396只,受体移植妊娠率为58.35%,移植胚胎成羔率为57.47%,在移植受体中,小尾寒羊的妊娠率最高为61.2%,同羊和内蒙细毛羊分别为54.62%和56.58%,受体品种之间移植妊娠率差异不显著(P>0.05)。受体黄体数对移植妊娠率及胚胎成羔率有一定的影响。胚胎的发育阶段对移植妊娠率也有影响,移植囊胚受体妊娠率最高为64.76%,明显高于早期桑椹胚移植妊娠率42.86%(P<0.05)。胚胎成羔率从桑椹胚到囊胚差异不显著(P>0.05)。