固定化酵母发酵生产酒精的研究——Ⅱ.中试试验

通过进行总体积4.14 m~3规模的中试生产试验,证明固定化酵母细胞发酵生产酒精新工艺具有发酵速度快、效率高、易控制、污染少、简化设备等优点,发酵液酒分达8.57%左右,残糖值1.39%左右,发酵周期20 h 左右,平均转化率达88.2%以上,生产指标达到了中试所在工厂同期生产水平.     

Optimization of Media for Production of an Effective Yeast Biocontrol Agent Pichia membranefaciens

The growth of Pichia membranefaciens was studied using different nitrogen and carbonsources as substrates. Among nitrogen sources tested, soya peptone, yeast extract power,beef extract and polypeptone were relatively favorable to the growth of yeast. Thedensity of the yeast showed to be directly proportional to carbon sources supplementation.Glucose and fructose were good carbon sources for the yeast growth. However, lactoseshowed poor performance for the cell growth of the yeast. In this study, beef extractpresented a good synergic effect on the yeast growth with different carbonhydrates. Themedium for P.membranefaciens used glucose and beef extract as substrates. The higherconcentration of glucose and beef extract, the better growth of P.membranefaciens. Theaddition of chlorella growth factor (CGF) stimulated markedly the growth of P.membranefaci-ens. The increased concentration of CGF from 0.5 to 1% did not enhance the numbers ofP.membranefaciens. This result will help design a better strategy for scale-up produc-tion of P.membranefaciens.     

半胱胺和酵母铬对育肥猪内分泌激素和脂类代谢的影响

探讨了半胱胺和酵母铬对猪内分泌激素和脂类代谢的影响。结果表明,饲粮中分别或同时添加半胱胺和酵母铬有提高血清GH、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及FT3/FT4的趋势(P>0.05),同时添加半胱胺和酵母铬显著提高GH的含量和FT3/FT4(P<0.05),显著降低了FT4的含量(P<0.05);饲粮中分别或同时添加半胱胺和酵母铬有降低血清中葡萄糖(Glu)含量的趋势(P>0.05),显著降低了血清中胰岛素(Ins)的含量(P<0.05),但分别添加半胱胺和酵母铬有提高Glu/Ins的趋势(P>0.05),同时添加半胱胺和酵母铬显著提高了Glu/Ins(P<0.05)。饲粮中分别或同时添加半胱胺和酵母铬均有降低血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量的趋势(P>0.05),有提高血清中高密度脂蛋白(HDL)含量、HDL/LDL的趋势(P>0.05),添加半胱胺或同时添加酵母铬降低了血清中低密度脂蛋白(LDL)(P>0.05),只添加酵母铬对LDL无影响。     

固定化酵母锥形罐式生物反应器发酵生产啤酒的研究

固定化酵母锥形罐式生物反应器是依照罐式生产啤酒而设计的一种生物反应器。用于快速完成啤酒生产的主发酵过程,可使啤酒主发酵时间从原工艺的8d缩短为30h,啤酒生产周期缩短一半以上,同时,生产的啤酒质量达到大罐发酵啤洒水平。     

耐冷冻酵母菌的筛选

为从自然界中筛选出耐冷冻酵母菌 ,从土壤、谷物、果蔬、空气等不同来源筛选分离得到 6 0多株酵母菌 ,通过模拟面团预发酵进行耐冷冻酵母菌的初筛选 ,并通过普通面团预发酵进一步筛选 ,得到了 3株耐冷冻酵母菌 ,编号为 FTY2 8,FTY 31和 FTY 5 6。这 3株耐冷冻酵母菌冷冻 7d后存活率和相对发酵力均超过80 ,且海藻糖质量分数大大高于耐冷冻性较差的酵母菌 ,其质量分数最高达 16 .2。     

酒糟单细胞蛋白饲料生产技术研究

为了充分利用酒糟资源，减轻酒糟对环境的污染，以优良菌种117号产朊假丝酵母、136号热带假丝酵母、白地霉和扣囊拟内了解霉混合发酵酒糟，生产酒糟单细胞蛋白饲料，结果表明：发酵最适起始pH为5.0左右；适宜的发酵培养基配方为80%酒糟，15%麦麸左右%玉米粉，1%豆饼，1%尿素，0.05%磷酸二氢钾，发酵前用适量糖化酶预处理酒糟能明显提高酒糟蛋白质含量，通过扩大发酵试验，100g酒糟中粗蛋白含量由18.1g增加到28.6g，人和成年哺乳动物必需氨基酸及钙、磷含量显著增加，粗纤维和单宁含量明显减少。酒糟单细胞蛋白饲料可作为配合饲料的新型优质蛋白源，采用分割留种培养能生产高质量、低成本的酒糟单细胞蛋白饲料。     

啤酒酿造过程中废弃物的综合利用

啤酒酿制过程中的废弃物主要是啤酒糟和废酵母,其具有多种营养成分并易于提取,在食品工业、饲料工业和制药工业中有广泛应用.啤酒废弃物可以用于生产酵母浸膏、营养调味品、胞壁多糖、面包饼干等营养食品;在饲料工业上可以作为鱼虾饲料,生产发酵饲料及粗酶制剂;在医药上可作为提取SOD、FDP、RNA、葡聚糖及制取酒花素和复合磷酸酯酶等物质的好材料.啤酒废弃物的回收利用具有非常广阔的应用前景,具有较好的社会效益和经济效益.     

酵母穿梭表达质粒pGBKT7-hCK2α＇的构建

目的：用人蛋白激酶CK2α’(hCK2α’)cDNA片段构建酵母双杂交体系中“诱饵”载体。方法；通过PCR扩增已构建成功的重组质粒pThCKA’获得人CK2α’亚基编码区cDNA，将PstⅠ／NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样酶切的“诱饵”载体pGBKT7，转化感受态细胞DH5α获得转化子．琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子，将阳性克隆进行限制性内切酶酶切与DNA测序的方法鉴定。将DNA测序验证的pGBKT7-hCK2α’转染感受态酵母株AH109．Westernblot签定hCK2α’蛋白表达．检测表达产物对报道基因的激活作用及对酵母株AH109的毒性。结果：限制性酶切结果表明，插入片段和重组质粒的大小与理论值推测值相符。重组质粒pGBKT7-hCK2α’转染的酵母株AH109中能够表达hCK2α’蛋白，pGBKT7-hCK2α’无自主激活报道基因的能力及对酵母的生长无毒性。结论：pGBKT7-hCK2α’酵母双杂“诱饵”载体构建获得成功，可应用于酵母双杂交体系。     

大麦黄矮病毒外壳蛋白基因和运动蛋白基因酵母表达载体的构建

根据已知的大麦黄矮病毒GPV株系的外壳蛋白（Coat Protein CP）和移动蛋白（Movement Protein MP）基因序列合成了CP、MP基因的上下游引物。通过PCR扩增获得含有目的基因的片段，经过SalⅠ和PstⅠ双酶切、连接、转化、重组质粒的酶切鉴定及基因测序，构建了酵母表达载体pGBKT7-GPV-CP和pGBKT7-GPV-MP，用于在酵母双杂交分析中表达诱饵融合蛋白，为进一步筛选小麦cDNA文库内与大麦黄矮病毒互作的寄主因子、克隆寄主因子、推测其种类和功能奠定了基础。     

耐盐性Imt1基因表达载体的构建及其在酵母中的高效表达

 将Imt1（Inositol O-methyltransferase，肌醇甲基转移酶）构建成酵母表达载体pBD#-3，在酵母双突变体gpd#+（-）(glycerol 3-phosphate-dehydrogenase,3-磷酸甘油脱氢酶)中高效表达，使gpd#+（-）突变株对氯化钠的耐性由2.5%提高到5.0%。生化分析表明，在每mg干酵母细胞内积累高达2.2nmol的Ononitol(芒柄醇)含量。Western blot分析证明了Imt1基因的表达。这一研究为植物耐盐基因工程开辟了一条新途径。