单细胞蛋白的研究——Ⅰ.高蛋白酵母菌的选育

1984～1986年研究了单细胞蛋白,结果如下:1.经紫外线诱变,选育的117号酵母(Candida utilis)和136号酵母(Candida troPiealis)含蛋白质分别为干重的60.49%和53.19%。117号酵母含氨基酸17种,其中赖氨酸1113.04mg/100g,苏氨酸1088.40mg/100g和蛋氨酸478.44mg/100g,且具有繁殖快,耐酸性,生产性能稳定,适合用酒糟生产蛋白饲料。安检试验蛋白饲料合格。2 接种117号酵母生产酒糟蛋白饲料,大米酒糟和高粱酒糟含蛋白质分别为24.1%和25.8%。用117号酵母生产酒糟蛋白饲料,应在原料中增加氮和磷,氮源以(NH_4)_2SO_4较好,培养周期为14小时。如果同时接种白地霉(Geotrichum Candidum)还可提高蛋白质产量。     

单细胞蛋白的研究 Ⅱ.利用酒糟生产酵母蛋白饲料

试验于1985～1987年进行,本研究课题选育的117号和136号酵母诱变株生产的酒糟酵母蛋白饲料含蛋白质28.18％,且具备牲畜必需的10种氨基酸,经高温40℃驯化的酵母菌,回复到适温28℃培养,酵母细胞增殖率明显提高,采用混合菌比单一菌生产酒糟酵母蛋白饲料,蛋白质含量增加,在发酵浪中加入糖化酶,蛋白质含量相应增加,沉淀过滤速度显著加快,酒糟酵母蛋白饲料饲养牲猪,与鱼粉对比差异显著(p>0.05)且安全无毒性     

丢糟混菌发酵生产蛋白饲料的研究

[目的]探讨丢糟蛋白饲料的发酵工艺。[方法]以白酒丢糟为主要原料,黑曲霉、绿色木霉、热带假丝酵母为发酵菌,通过单因素和正交试验确定丢糟混菌发酵生产蛋白饲料的最佳工艺条件。[结果]最佳发酵工艺条件为：原辅料配比为粉碎至20目的丢糟75%、麸皮20%、玉米粉5%,黑曲霉∶绿色木霉∶热带假丝酵母的接种比例为1∶1∶1,总接种量为12%,初始pH值为5.0,发酵温度为30℃,发酵时间为6d。[结论]经混菌发酵后的白酒丢糟不但含有大量的有益活菌体及微生物酶类等生物活性物质,而且粗蛋白含量为31.32%（干样）,比较原料丢糟增长78.97%;真蛋白含量为24.60%（干样）,比较原料丢糟增长56.29%;粗纤维含量为16.58%（干样）,粗纤维降解率达到31.60%。     

多菌种发酵生产微生物蛋白饲料的菌种筛选研究

对茶粕固态发酵生产微生物蛋白饲料的菌种进行筛选试验。结果表明:茶粕接入霉菌和酵母菌组成的混合菌种进行发酵可获得较多的菌体干重,其中尤以黑曲霉、米曲霉、绿色木霉和产朊假丝酵母组成的混合菌种发酵茶粕获得的菌体干重最多,可达到20.55 g/L左右。因此,选用这4种菌种作为茶粕发酵生产微生物蛋白饲料的最优混合菌种。     

利用菠萝皮渣生产蛋白饲料的发酵条件研究

以菠萝皮渣为原料生产蛋白饲料,选出最佳的菌种组合后,通过调整混合菌种比例、接种量、固态培养基的料水比例、固态培养基的料层厚度,进行单因素发酵试验,以发酵产品中粗蛋白的含量为依据,优选发酵条件。结果表明:混合菌种发酵生产的蛋白质含量优于单菌发酵,其中根霉+产阮假丝酵母混合菌混合比例为6∶4时,发酵产品中粗蛋白含量最高,可达18.72%。试验所得最佳参数为:根霉+产朊假丝酵母混合菌接种量10%,固态培养基的料水比例3∶7,固态培养基的料层厚度3 cm。     

柚子皮渣生产单细胞蛋白饲料工艺研究

以柚子皮渣为原料,以康宁木霉、白地霉、酵母菌、产朊假丝酵母为菌体,用卵清蛋白为标准品和双缩脲试剂制定标准曲线,探究单菌株与混合菌株分别固态发酵后产单细胞蛋白的含量。结果表明:白地霉与康宁木霉组合菌发酵效果最好,培养基发酵7d后蛋白质含量达到8.060g,占培养基干重的19%左右。发酵效果受温度、p H值、接种量、培养基含水量等因素影响,用正交实验获得白地霉与康宁木霉最佳发酵条件组合为:最适p H值5.5,最适发酵温度25℃,最适接种量15%,最适培养基含水量65%,且各因素对发酵的影响大小为发酵温度培养基含水量接种量p H。     

酒糟为基质提取凝血质的白地霉培养条件的优化

[目的]优化从提取凝血质的白地霉培养的酒糟副产物利用的最佳培养基。[方法]先通过正交试验及单因素试验确定凝血质的最大提取量,探讨利用酒糟为基质培养白地霉的最佳培养基配比,即确定蛋白饲料水、DDGS水、废糖及酵母泥的最佳配比。[结果]4种营养成分的最佳配比为：蛋白饲料水20 mL、DDGS水120 mL、废糖1 g、酵母泥1.6 g。在以上条件下培养获得白地霉的干菌量为1.402 g,获得粗品的凝血质含量为2.3%。[结论]通过该试验的研究降低了培养白地霉的培养成本,提高了燃料乙醇发酵副产物及废糖的利用率,增加了废弃物的附加值,并开发了凝血质提取和获得的途径。     

白酒丢糟发酵生产蛋白质饲料的菌种筛选

研究了产朊假丝酵母、热带假丝酵母、白地霉、酿酒酵母、绿色木霉、黑曲霉与米曲霉发酵白酒丢糟生产蛋白质饲料的效果.结果表明:白地霉、黑曲霉、绿色木霉和热带假丝酵母效果最好,发酵后白酒丢糟的蛋白质质量分数提高了6.49%以上;对这4种菌进行组合筛选,发现由黑曲霉、绿色木霉和白地霉组合发酵,能将白酒丢糟的蛋白质质量分数提高9.96%.     

航天诱变复合菌剂发酵生产马铃薯渣菌体蛋白饲料研究

采用航天诱变选育的优良菌株黑曲霉突变株ZM-8、酿酒酵母YB-6混菌与热带假丝酵母、白地霉菌共发酵,用马铃薯渣固体培养生产高蛋白饲料,并对发酵生产蛋白饲料的条件进行了优化。结果表明:航天复合菌剂的最优配比为酿酒酵母YB-61.5 g、热带假丝酵母2.0 g、白地霉菌2.5 g、黑曲霉突变株ZM-8 2.0 g。最优培养基配方为白糖4 g、硫铵7 g、尿素4 g、三十烷醇2.5 mg/L。在此优化条件下发酵马铃薯渣,产物中粗蛋白含量可达32.5%,是原料粗蛋白的5.84倍。     

不同发酵时间李子果酒的糖度与pH及其酒糟发酵后的营养变化

为李子果酒的质量控制及其酒糟开发利用提供参考，对李子果酒发酵过程中的糖度和酸度进行测定；采用固态发酵法对李子果酒酒糟进行发酵，培养酵母单细胞蛋白，并测定酒糟发酵前后的单细胞蛋白总蛋白、总纤维素、总脂肪和氨基酸含量。结果表明：随着发酵时间的延长，黑布林果酒的糖度呈明显下降趋势，酸度则随发酵时间延长呈缓慢上升趋势，发酵8d后糖度、酸度趋于稳定。酒糟经发酵后的总蛋白含量明显提高，较未发酵前增长40.3%，总纤维和总脂肪含量变化幅度较小。     

热带假丝酵母菌处理马铃薯淀粉废水的研究

[目的]优化热带假丝酵母菌发酵处理马铃薯淀粉废水的最佳工艺。[方法]利用微生物发酵方法研究pH、温度、发酵时间、接种量等因素对热带假丝酵母发酵处理马铃薯淀粉废水的影响。[结果]在pH为5.0、温度为28℃、处理时间为28 h、热带假丝酵母菌接种量为15%的条件下,马铃薯淀粉废水中COD去除率可达到75.4%,同时单细胞蛋白得率为7.43 g/L。[结论]热带假丝酵母菌处理马铃薯淀粉废水效果好,并可回收高价值的酵母菌体蛋白,该工艺具有实用性。     

柑橘皮渣发酵蛋白质饲料(SCP)工艺优化及光照对发酵饲料的影响

[目的]探求柑橘皮渣的资源化利用方式。[方法]以柑橘废渣为主料,麸皮为辅料,通过固态发酵技术生产单细胞蛋白饲料,从热带假丝酵母(Candida tropicalis)、康宁木霉(Trichoderma konigii)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、球拟圆酵母(Torulopsis globosa)4株菌中,优选出效果最佳的菌株,并优化菌株最佳混合比例。[结果]确定T.konigii∶C.tropicalis∶A.oryzae最优比例为2∶2∶1,发酵时间84 h,温度33℃,含水率70%,菌液接种量0.4 m L/g,发酵后粗蛋白含量达到35.03%,粗脂肪含量达到4.92%,同时粗纤维含量为12.08%。另外,通过光照强度对发酵饲料的影响试验可知,光强在1 000~2 500 lx时,可以促进微生物生产蛋白质和脂肪,当光强为10 000 lx时,微生物生产蛋白质和脂肪的能力受到抑制;另外,光照条件不利于粗纤维的降解。光照条件对非光合微生物发酵饲料既有促进作用又有抑制作用。[结论]该研究可为柑橘皮渣废弃物的资源化利用提供重要的理论指导。     

马铃薯渣生料固态发酵生产菌体蛋白饲料的研究

以马铃薯渣为原料,对采用不灭菌固态发酵法生产菌体蛋白饲料的糖化菌种进行了优选,并对其较适丁艺条件进行了探索研究试验,结果表明：采用黑曲霉培养（28℃,2～3d）．经糖化后,接入白地霉液体曲种发酵62h,可使产物干基蛋白含量从5．80％提高到13．95％。并筛选出较合适的发酵基质配料为：鼓皮10％、尿素10％、（NH4）2SO41．0％、KH2PO40．05％。     

复合菌固态发酵高蛋白饲料添加剂条件的优化

以黑曲霉菌、产朊假丝酵母和枯草芽孢杆菌为出发菌株,通过对固体发酵工艺条件和培养基优化的研究,获得了一条优化后的复合菌固态发酵高蛋白饲料添加剂生产工艺。研究表明以黑曲霉菌、产朊假丝酵母和枯草芽孢杆菌接人固体比例为4：3：3．固体接种量50％,发酵温度30℃～32℃,含水量50％,发酵初始pH4．6左右,发酵时间50h为发酵条件,以豆饼粉85％,（NH4）：SO40．8％。KH：PO40．2％。麸皮15％．硫酸铜和硫酸锰分别加入0．8‰为固体培养基,所产酸性蛋白酶活力最高为15426u／g,而获得最大酵母菌菌数为35亿．小肽含量为12．86％。粗蛋白含量为52．32％的高蛋白饲料添加剂。     

Bacillus subtilis Co-transfected with a Lysine-rich and a Methionine-rich Protein Gene and Its Effect on Cow Milk Production

The probiotic Bacillus subtilis(B. subtilis) was widely applied in animal production as feed additive. Lysine(Lys) and methionine(Met) were the two most important limiting amino acids in livestock animal feed. Raising Lys and Met contents in B. subtilis would provide better effects for animal production and save Lys and Met supplements. We still didn't know whether Lysrich and Met-rich protein genes from plants could be transfected into B. subtilis and expressed at a high level so as to improve animal production, such as milk production as an additional diet. The Lys-rich protein gene(Cflr) and Met-rich 10 ku-δ Zein were cloned from pepper anther and maize endosperm, respectively. Then they were constructed into plasmids individually and successfully cotransfected into B. subtilis. Upon IPTG induction, m RNAs and protein expressions could be observed. Lys and Met contents in the fermentation broth were raised by 65.92% and 46.39%, respectively. After feeding 200 g and 400 g · cow~(-1) · d~(-1), transgenic B. subtilis fermentation broth, the milk yield, milk protein and milk fat contents all significantly increased. The Lys-rich protein gene(Cflr) and Met-rich 10 ku-δ Zein were successfully transfected into B. subtilis. Contents of Lys and Met in the transgenic B. subtilis obviously raised and the fermentation broth of the transgenic bacteria could effectively improve milk yield and quality.     

饲用复合酶产酶条件研究

从土壤中筛选的黑曲霉WP1是一株比较优异的产生饲用复合酶的菌株,能够产生多种丰富的饲用酶类。本试验对其固态发酵产酶条件进行了优化,结果表明,最适发酵条件为:以麸皮为主要原料,料水比10∶8,添加0.5%的NaNO3和1%的SDS,pH值6.0。在此条件下,培养6 d,各种酶的活力分别为:植酸酶943 U/g,纤维素酶3 089 U/g,木聚糖酶651 U/g,淀粉酶508 U/g。     

胶红酵母产类胡萝卜素固态发酵工艺

【目的】优化胶红酵母固态发酵底物与发酵条件,提高类胡萝卜素产量,改善发酵产物营养价值,降低生产成本。【方法】选用胶红酵母TZR2014作为发酵菌种,采用Design-Expert软件的Mixture-Design设计固态发酵底物的配比,各底物原料的范围如下:麸皮50%—80%、豆粕6%—20%、玉米粉3%—15%、米糠2%—14%、玉米浆2%—10%、硫酸铵0.4%—2.5%、磷酸二氢钾0.05%—0.5%和硫酸镁0.03%—0.3%,通过固态发酵工艺生产类胡萝卜素,并根据类胡萝卜素的产量来确定最优的发酵底物。确定最适发酵底物配比后,利用L16(45)正交设计对发酵条件进行优化设计,各参数的范围如下:接种量5.0%—12.5%、发酵时间60.0—96.0 h、发酵温度26—32℃、p H4.0—7.0、含水量60.0%—75.0%,根据试验结果确定胶红酵母产类胡萝卜素的最优发酵条件。研究优化的胶红酵母固态发酵工艺对发酵产物粗纤维、粗蛋白质、水分、粗脂肪、粗灰分、钙、磷和氨基酸等营养物质的影响。【结果】胶红酵母发酵产物中类胡萝卜素含量与固态发酵底物中麦麸的添加量呈显著负相关(r=-0.336,P=0.045),与发酵底物中玉米浆的添加量呈显著正相关(r=0.344,P=0.040),与发酵底物中米糠添加量为正相关(r=0.329,P=0.050)。发酵产物中胶红酵母活菌数与底物中豆粕含量呈显著正相关(r=0.510,P=0.001)。接种量、发酵温度、p H、底物含水量对胶红酵母活菌数均有极显著的影响(P0.01),但其中发酵温度对胶红酵母菌体数影响最大,其次是底物含水量,之后依次是接种量和p H。发酵时间、发酵温度和p H均显著影响发酵产物中类胡萝卜素含量(P0.05),其中发酵温度对发酵产物中类胡萝卜素含量影响最大,p H次之,发酵时间影响最小。经过发酵工艺的优化,发酵产物中类胡萝卜素产量提高到4 535μg·kg-1,发酵产物中的活菌数为3.79×109 CFU/g;发酵后粗纤维、粗蛋白质、粗灰分、苏氨酸、谷氨酸、脯氨酸含量均显著高于发酵前(P0.05),而组氨酸、水分、粗脂肪含量显著低于发酵前(P0.05)。【结论】胶红酵母固态发酵产类胡萝卜素底物的最佳配比为麦麸52.5%、豆粕20.0%、玉米粉3.00%、米糠14.0%、玉米浆10.0%、硫酸铵0.40%、磷酸二氢钾0.05%和硫酸镁0.04%;最佳发酵条件为菌液接种量5.0%、发酵时间72.0 h、发酵温度28.0℃、p H 6.0、底物含水量60.0%。经过优化胶红酵母发酵工艺,类胡萝卜素产量得到显著提高,并且发酵产物营养价值得到明显改善。     

利用短小芽孢杆菌发酵马铃薯渣生产单细胞蛋白饲料的研究

研究以在马铃薯淀粉生产过程中产生的马铃薯渣与汁水为原料,以短小芽孢杆菌ZY05为发酵菌种,优化马铃薯薯渣液态发酵生产单细胞蛋白饲料的工艺.初步确定了马铃薯薯渣与汁水发酵的适宜条件.具体为除茵种外不添加任何外源物质,pH自然.发酵温度为37℃,转数为180 r·min-1,发酵时间为120 h.通过本项工艺获得的马铃薯渣...