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通过PCR、从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4%,推导的氨基酸序列的同源性为99.2%,其中,第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从 相似文献
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耐盐性Imt1基因表达载体的构建及其在酵母中的高效表达 总被引:2,自引:0,他引:2
将Imt1(Inositol O-methyltransferase,肌醇甲基转移酶)构建成酵母表达载体pBD#-3,在酵母双突变体gpd#+(-)(glycerol 3-phosphate-dehydrogenase,3-磷酸甘油脱氢酶)中高效表达,使gpd#+(-)突变株对氯化钠的耐性由2.5%提高到5.0%。生化分析表明,在每mg干酵母细胞内积累高达2.2nmol的Ononitol(芒柄醇)含量。Western blot分析证明了Imt1基因的表达。这一研究为植物耐盐基因工程开辟了一条新途径。 相似文献
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转肌醇甲基转移酶基因烟草的耐盐性及其遗传分析 总被引:2,自引:0,他引:2
利用已构建的3个Imtl(Inositol methyltransferase,肌醇甲基转移酶)基因的高效植物表达载体pDH01、pDH5和pDH11,通过农杆菌介导的遗传转化法,分别得到了烟草转基因植株。在1.5%NaCl溶液中,转Imtl基因烟草F1代表现出明显的耐盐能力,株高、单株鲜重、生长势等指标具有显著优势。pDH11载体由于采用了高效的盐诱导型启动子,其转基因烟草的耐盐性显著的优于pD 相似文献
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基因枪转化小麦悬浮细胞参数的优化 总被引:10,自引:0,他引:10
小麦是我国的重要粮食作物,其遗传工程因受转基因技术的限制而进展缓慢。国际上,自1992年Vasil等〔7〕用基因枪技术首次得到转基因小麦以来,现在又有几例成功的报道〔3,4,8,9〕。国内成功的报道极少,有的即使得到了转基因植株,其频率也很低。导致小... 相似文献
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