伪狂犬病毒UL14基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究

UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株（PRV-Ea）为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测和荧光观察证实获得了能稳定表达EGFP的UL14插入失活突变株PRV-UL14D。将PRV-UL14D感染IBRS-2细胞,发现该突变株较PRV-Ea野毒株增殖缓慢,而且PRV-UL14D突变株感染细胞后形成的蚀斑也明显小于PRV-Ea野毒株,但在稳定表达UL14的IBRS-2细胞系中,PRV-UL14D与PRV-Ea野毒株的增殖速度、形成的蚀斑大小均无明显差异。进一步将PRV-UL14D感染BALB/c小鼠,发现与相同剂量的PRV-Ea野毒株感染相比,小鼠平均死亡时间明显延缓。上述研究结果表明,UL14并非伪狂犬病毒增殖必需的,但其缺失可延缓病毒增殖,推测UL14可能与病毒粒子在细胞间的扩散有关。     

大白菜种株碳同化分配及其对种荚发育的作用

用　14 C示踪方法研究大白菜种株不同生育时期同化产物分配及其对种荚形成的作用 ,结果表明 :叶片是主要同化器官 ;生育前期同化产物主要向茎枝和根系分配 ;后期主要向角果输送 ;种株开花前同化产物可通过再次分配进入角果 ,开花后同化产物对种子形成贡献更大。种株不同生育时期同化产物对角果皮和籽粒发育的作用存在差异     

USP14 regulates H2O2 induced oxidative stress in H9c2 cells

AIM:To evaluate the effect of inhibiting ubiquitin-specific protease 14(USPl4) activity on oxidative stress induced by H₂O₂ of H9c2 cells.METHODS:The H9c2 cells were incubated with H₂O₂ at 25 μmol/L for 2 h to establish the oxidative stress injury model.The cells were divided into control group,H₂O₂ group,IU1 group (25 μmol/L or 50 μmol/L) and IU1+H₂O₂ group.The H9c2 cells activity was measured by MTS assay.The level of intracellular reactive oxygen species (ROS) and cell survival rate were analyzed by flow cytometry assay.The changes of the mitogen-activated protein kinase (MAPK) family related proteins were detected by Western blot.RESULTS:Compared with control group,the cell activity and the viability rate in H₂O₂ group were decreased (P<0.05),while the intracellular ROS,the protein levels of Bax/Bcl-2,P53,p-ERK1/2,p-JNK and p-P38 were increased (P<0.05).Compared with H₂O₂ group,the cell activity and the viability rate of the H9c2 cells in IU1+H₂O₂ group were increased (P<0.05),while the intracellular ROS,the protein levels of Bax/Bcl-2,P53,p-ERK1/2,p-JNK and p-P38 were decreased (P<0.05).CONCLUSION:Inhibition of USPl4 activity reduces the oxidative stress injury of the H9c2 cells.The mechanism may be related to inhibition of the MAPK signaling and down-regulation of apoptosis related proteins.     

IAA、GA和ABA对葡萄果实~(14)C蔗糖输入与代谢的调控

将　14 C蔗糖与激素IAA、GA和ABA同时通过果柄引入离体葡萄果实 ,研究了蔗糖积累代谢与激素的关系。结果表明 :①GA在幼果膨大期 ,IAA在果实始熟期以前 ,ABA从缓慢生长期到果实成熟 ,对蔗糖的吸收有明显促进效果。②GA与IAA在果实发育前期 (第Ⅰ、Ⅱ期 )可促进　14 C蔗糖转化为非醇溶性结构物 ;ABA则在成熟期表现出类似的作用。③IAA、GA与ABA在幼果膨大期可促进糖分转化为有机酸 ,但在缓慢生长期都抑制这一过程 ,抑制效果以ABA最显著 ,IAA其次 ,GA最小。成熟期糖分占醇溶物的 85 %～ 91% ,不同激素处理的差异不明显。ABA可促进各个时期果实中氨基酸的合成。④IAA可加快蔗糖分解为还原糖 ;GA增加果糖积累 ;ABA处理的果实蔗糖含量最高 ,推测ABA直接刺激了果肉维管束的蔗糖卸载。     

低温弱光对不同品种黄瓜苗期^14C—同化物运输分配的影响

在低温和弱光下对５个不同来源的黄瓜品种苗期＾１４Ｃ－同化物运输分配进行了研究。结果表明，两种低温２０℃／１０℃（昼／夜）和１５℃持续低温均明显地抑制了喂叶同化物的运输率，与对照均呈极显著差异，显著的抑制部位是向其它叶的运输，而生长点，茎和根系部分均未受一抑制，与对照无明显差异，低温下不同品种间的不同部位的同化物的运输分配未出现显著差异。     

浅谈水利行业CAD制图及出图技术的几点认识

主要介绍了AUTOCAD绘图的基本方法及画图、出图及其他过程中应注意的问题，并提出了相应的应对措施。     

14C同化物在黄柏韧皮部的运输速率测定

以14C为示踪剂,用14CO2 CO2混合气体法进行半株标记,饲喂50μCi/株的NaH14CO3,标记时间为lh.燃烧法制样,在FJ2107P液体闪烁计数器上测定,14C同化物在黄柏韧皮部中的运输速率为47～54 cm/h,平均速率为50.2 cm/h.     

Experimental evaluation of Pentas lanceolata flowers for wound healing activity in rats

The ethanolic extract of the flowers of Pentas lanceolata given by oral route to rats at dose of 150 mg kg(-1) day(-1) for 10 days, was studied for its effect on wound healing, using excision wound mode. Significant increase in granulation tissue weight, tensile strength, hydroxyproline and glycosaminoglycan content was observed. Moderate increase in protein content was seen. There was significant reduction in the wound area measurement of the test group as compared to that of controls. The efficacious prohealing action may be due to increased collagen deposition as well as better alignment and maturation.     

The genetic organization of the capsular polysaccharide biosynthesis region of Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 14

The genetic organization of the gene involved in the capsular polysaccharide (CPS) biosynthesis of Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 14 has been determined. The DNA region for the CPS biosynthesis of serotype 14 (cps14) comprised 9 open reading frames, designated as cps14AB₁B₂B₃CDEFG genes, encoding Cps14A to Cps14G protein, respectively. Cps14A was similar to CpsA of A. pleuropneumoniae serotypes 1, 4 and 12; the Cps14B₁ and Cps14B₂ were similar to CpsB of A. pleuropneumoniae serotypes 1, 4 and 12, suggesting that CPS structure of A. pleuropneumoniae serotype 14 would belong to Group I including A. pleuropneumoniae serotypes 1, 4, 12 and 15. Surprisingly, the overall nucleotide sequence, deduced amino acid sequence, and the genetic organization of the cps14 were nearly identical to those of Actinobacillus suis. This study will provide the molecular basic knowledge for development of diagnostics and vaccine of A. pleuropneumoniae serotype 14.     

14-3-3蛋程中的互作靶蛋白鉴定及其对外源激素的响应

【目的】籽粒灌浆对水稻产量及品质的形成至关重要。14-3-3蛋白是一种信号转导调节因子,在植物生长发育中发挥着重要调控作用。本研究通过分析14-3-3蛋白家族在籽粒灌浆过程中的基因表达模式及其互作靶蛋白,从而揭示其在籽粒灌浆过程中的功能。【方法】利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析水稻14-3-3基因家族在籽粒灌浆过程中的表达变化模式,并从中选取GF14b及GF14e进行后续的蛋白功能分析。利用KEGG数据库对GF14b及GF14e蛋白功能motif位点进行分析;构建GST-GF14b及GST-GF14e表达载体,利用亲和层析技术分别钓取籽粒中与GF14b及GF14e互作的靶蛋白,并借助LC-MS/MS对靶蛋白进行鉴定。采用GST pull-down方法验证靶蛋白与GF14b及GF14e间的蛋白互作关系。利用Kinasephos在线程序对靶蛋白的Ser和Thr磷酸化位点进行预测;采用MapMan 3.6.0软件对靶蛋白的功能及参与的代谢过程进行分析。在籽粒灌浆期（花后15 d）,分别喷施25×10^-6mol·L^-1 ABA,10×10^-6mol·L^-1 IAA,100×10^-6mol·L^-1 GA,50×10^-6mol·L^-1 ZR和 2×10^-4mol·L^-1 BR,研究外源激素处理对籽粒灌浆过程中GF14b,GF14e及其互作靶基因表达的影响。【结果】14-3-3家族基因中,除GF14h外,其余7个家族成员在水稻籽粒中均有表达,其中GF14b及GF14e在籽粒灌浆过程中的表达水平较高且变化幅度较大。通过蛋白序列分析发现,GF14b与GF14e间具有3个相同,2个差异的motif功能位点。通过亲和层析试验,在籽粒中共鉴定到59个与GF14b和72个与GF14e互作的靶蛋白,其中有43个靶蛋白与2个成员均有互作,分别有16个和29个靶蛋白与GF14b和GF14e特异结合。随机选取2个靶蛋白进行体外蛋白互作验证,结果表明靶蛋白SUS3与GF14b和GF14e均存在互作关系,而靶蛋白PSA仅与GF14e有相互作用关系,验证了亲和层析结果的准确性。蛋白功能的分析表明,GF14b和GF14e通过与靶蛋白的结合,共同参与了籽粒灌浆过程中蔗糖转化、淀粉合成、糖酵解、TCA循环等碳代谢途径。同时,GF14b及GF14e还具有特异的调控功能,其中GF14b与核酸代谢及物质转运密切相关,而GF14e与C1代谢中的关键蛋白存在互作。此外,大部分靶蛋白均鉴定到具有潜在的Ser和Thr磷酸化位点。外源激素处理下,籽粒中GF14b和GF14e上调表达,而与淀粉合成代谢相关的靶基因（SUS2、 AGPS、AGPL、PPDK2、SBE）大部分呈下调表达的趋势。【结论】14-3-3基因家族成员GF14b和GF14e在水稻籽粒灌浆过程中的表达变化幅度较大,且会响应激素浓度的改变,并通过蛋白互作的形式负调控淀粉合成代谢相关基因的表达,从而对水稻籽粒淀粉的合成起到重要的调控作用。