木薯MeNOSIP与MeRbohD蛋白的互作验证及其对外源激素的响应

为了解木薯（Manihot esculenta）MeRbohD在抗病途径中的功能,笔者在获得MeRbohD候选互作蛋白MeNOSIP（nitric oxide synthase-interacting protein,一氧化氮合酶互作蛋白）的基础上,通过RT-PCR克隆获得MeNOSIP基因编码区序列,并进行生物信息学分析。结果表明,MeNOSIP的CDs序列全长918 bp,编码含305个氨基酸的多肽,属于不稳定的亲水类蛋白质,亚细胞定位预测MeNOSIP在细胞膜上表达。采用酵母杂交验证发现,MeRbohD与MeNOSI真实互作。MeRbohD和MeNOSIP在JA,SA,ABA诱导下基因均上调表达;ABA处理下,MeRbohD和MeNOSIP基因表达变化趋势一致,推测它们可能共同参与了由ABA介导的抗逆通路。     

植物ASK1-D3(MAX2)-D14蛋白复合体互作区特征与演化分析

ASK1-D3-D14复合体作为E3泛素连接酶的一部分,调控水稻的形态发生等生理反应.为了揭示该复合体互作区的结构特征和演化关系,通过对不同物种中D3直系蛋白间的系统进化进行分析,发现D3基因在不同物种中表现出不同的演化进程;而对ASK1-D3和D3-D14互作面的序列和空间结构分析,揭示D3直系同源蛋白质以及已知的F-box-like结构域间的序列同源性较低,而空间结构相似性较高,暗示F-box-like与ASK1类蛋白质之间的互作,空间结构的相似性重于序列的相似性.涉及D3和D14互作面的氨基酸在直系同源蛋白序列间的同源性很高,而形成互作面疏水内核的氨基酸保守性更高.这为D3复合体的进一步研究提供了依据.     

香蕉14-3-3蛋白基因Ma-14-3-3d的克隆及序列分析

[目的]克隆分析香蕉中14-3-3蛋白编码基因。[方法]采用PCR与RACE技术相结合的方法克隆香蕉14-3-3基因,并进行CDNA测序及同源性分析。[结果]所克隆cDNA全长866 bp,编码197个氨基酸残基,具有植物14-3-3蛋白基因的特征结构域,并与其他植物来源的14-3-3蛋白具有很高的序列相似性,将其命名为Ma-14-3-3d(Musa acuminate14-3-3gene)。[结论]Ma-14-3-3d蛋白与来源于单子叶植物的14-3-3蛋白位于同一进化枝上。     

血吸虫14-3-3蛋白的免疫定位和功能

血吸虫病是一种遍及世界70多个国家、累及2亿多人口的地方性流行病,在我国约76万人受累.病原体为具有复杂生活史的血吸虫,其常见有6种,主要流行的是日本血吸虫(Sj)、曼氏血吸虫(Sm)及埃及血虫(Sh),具有两个宿主,即人和淡水螺类.     

14-3-3蛋白相关研究进展

14-3-3蛋白家族是一组高度保守的蛋白质家族,在各种真核生物中广泛存在,主要是以同源/异源二聚体的形式存在,在哺乳动物中共有7种亚型。目前,对于14-3-3蛋白的研究表明其在神经发育、细胞周期、疾病发生等生命过程中都发挥着重要作用。通过对近年来14-3-3蛋白的研究成果进行归纳总结,综述了14-3-3蛋白在蛋白质翻译后修饰、细胞周期及疾病形成等方面的最新研究进展,讨论了深入研究14-3-3蛋白的重要性。     

寄生虫14-3-3蛋白的生物学功能研究进展

【目的】了解14-3-3蛋白在寄生虫生长发育和调控宿主功能等方面的研究进展,以期为寄生虫病的诊断和防控提供参考。【方法】通过查阅近年国内外有关寄生虫14-3-3蛋白相关文献研究,对寄生虫14-3-3蛋白的结构、定位以及生物学功能方面的最新研究进展进行概述。【结果】寄生虫14-3-3蛋白参与调控寄生虫的生长发育和入侵宿主过程,同时寄生虫14-3-3蛋白还可调控宿主细胞迁移、细胞凋亡、信号转导以及免疫防御等多个生理过程。【结论】寄生虫14-3-3蛋白可通过多种途径影响自身发育及调控宿主功能。     

信号蛋白14-3-3分子结构及功能研究现状

介绍信号蛋白14-3-3的分子结构、功能及其作用机制。     

小麦胚乳14-3-3基因的克隆及其重组蛋白的原核表达

【目的】克隆小麦籽粒胚乳14-3-3基因,并进行体外表达,为进一步研究其对籽粒生长发育的调控作用奠定基础。【方法】根据已有同源基因保守序列,设计插入限制性酶切位点的特异性扩增引物,采用RT-PCR方法扩增发育的小麦胚乳14-3-3基因,克隆测序后转入表达载体,在大肠杆菌中进行表达,并进行纯化。【结果】从开花后灌浆13-15 d的小麦品种济麦22籽粒胚乳中克隆到1个14-3-3基因,序列分析表明为非ε型,含1个777 bp的开放阅读框,编码蛋白259 aa,分子量约29 kD。核苷酸序列分析表明与小麦、水稻、玉米、大麦、大豆等主要农作物和模式植物拟南芥的14-3-3基因有较高的同源性,最高达98%,编码蛋白氨基酸长度也一致（260 aa左右）;在大肠杆菌中高效表达的重组蛋白约为30 kD,分子量大小与根据核苷酸序列推导的编码蛋白一致。从基因序列的同源性、编码蛋白的氨基酸长度、表达蛋白的分子量大小分析都说明克隆到的基因为14-3-3基因,并准确插入表达载体,得到了高效正确表达。将克隆的基因插入pET29c载体,热激转化大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP,得到了高效表达,但主要以包涵体形式（80%）存在。对重组蛋白进行了纯化,可溶性重组蛋白利用S-蛋白琼脂糖树脂得到纯化的蛋白,包涵体重组蛋白经变性溶解、复性后,也利用S-蛋白琼脂糖树脂得到了高度纯化的重组蛋白。【结论】利用RT-PCR技术从发育的小麦胚乳中克隆到1个14-3-3基因,并在大肠杆菌中得到了高效表达,重组蛋白经过纯化得到了纯度较高的活性蛋白。     

GST-pull down技术筛选毛白杨天冬氨酸蛋白酶PtoAED3互作蛋白

[目的]天冬氨酸蛋白酶属于蛋白水解酶家族,为了解析毛白杨天冬氨酸蛋白酶PtoAED3在植物生长发育中的分子调节机制,利用GST-pull down联合质谱技术,对PtoAED3的互作蛋白进行鉴定和分析.[方法]通过同源克隆获得了毛白杨PtoAED3的CDS序列,构建含GST标签的原核表达载体pGEX-4T-PtoAED...     

灌浆结实期水浆管理对水稻产量及稻米品质的影响

以迟熟中粳品种“通育粳1号”为试材,通过大区对比和盆栽处理,研究了灌浆结实期水浆管理对水稻产量及稻米品质的影响。结果表明：在水稻灌浆结实期,湿润管理的产量最高,大区对比中,湿润管理分别比水层管理和断水管理增产7．47％、19．76％;盆栽试验中,湿润管理分别比水层管理和断水管理增产3．47％、57．26％,断水时间越早,减产越大。抽穗后建立水层有利于改善稻米品质,具体表现为糙米率增加,垩白率、垩白度降低。其中对垩白度的影响最为显著,大区对比和盆栽处理中,水层管理的垩白度分别为4．62％和3．40％,比湿润管理降低52．47％、47．69％,比断水管理降低58．75％、62．22％,垩白度随断水时间的推延而减少。稻米的蛋白质含量以湿润管理最高,水层管理最低。     

内源激素与亚种间杂交稻籽粒灌浆的关系

为探明内源激素与亚种间杂交稻籽粒灌浆的关系，以不同籽粒充实度的亚种间杂交稻为材料，研究了其籽粒灌浆特征参数以及发育过程中IAA，GA3，Z和ABA4种主要内源激素含量的动态变化。结果表明：籽粒充实度低的亚种间杂交稻“两段灌浆”表现明显，经相关统计分析表明，孕穗期至开花期IAA和Z含量与起始灌浆势（Ro）、平均灌浆速率（Fmean）和籽粒充实率（GFP）均呈显著或极显著正相关，开花期至花后15d这一期间IAA，Z和ABA含量与Ro,Fmean和GFP呈显著正相关。在孕穗期至花后10d期间，IAA与Z含量呈极显著正相关；灌浆期IAA与GA3呈正相关。由此可见，“两段灌浆”的出现在一定程度上与籽粒内源IAA和Z的含量及其相互作用有关，且作用时期主要是孕穗期至开花期。     

灌浆结实期短日照对稻米品质的影响

选用奶皇后(粳稻)、星丰(籼稻)为材料,通过人为控制短日照长度,设置13 h、12 h、11 h日长,探讨灌浆期短日照对稻米品质的影响.结果表明:灌浆期短日照条件下,籽粒直链淀粉含量达最大值的天数明显缩短,直链淀粉积累速率增加,直链淀粉含量最大值降低,稻米直链淀粉含量、胶稠度显著降低,垩白率、垩白度、蛋白质含量显著增加,粒型无显著变化.相关分析显示:日照长度与精米率呈显著正相关(r=0.744 4),与垩白率、垩白度、蛋白质含量呈显著或极显著负相关(r依次为 -0.913 8、-0.927 6和 -0.733 5).灌浆期短日照使稻米外观、加工、食味品质下降,营养品质提高.     

北方粳稻籽粒多胺合成与灌浆的关系

以不同水稻品种为试材,研究了籽粒多胺含量与灌浆进程的关系,结果表明:在灌浆期 ,籽粒多胺含量依次为:腐胺穴PUT雪>亚精胺SPD>精胺SPM;随花后时间的推移,各种胺 含量逐渐减小。势粒中,SPD与PUT变化趋势大致相同,在雪灌浆期呈下降趋势;在灌浆 后期,各品种籽粒SPD和PUT含量差别不大,SPM含量下降幅度较PUT和SPD小。常规稻沈 农8714与沈农 8801在不同灌浆阶段SPD含量均高于杂交稻辽优18与辽优3225。弱势粒 中, 不同品种多胺含量在整个灌浆期间差别均较大, PUT、SPD和SPM含量降低速度均 较快, 而且峰谷出现的时间也提前。PUT含量最高时灌浆速率最大沈农8801, SPM 对 灌浆后期籽粒充实起主要作用。     

杂交水稻及亲本灌浆期籽粒和叶片内源激素的变化

以杂交水稻“Tiyou418”及亲本为材料,测定和分析了水稻灌浆期籽粒和叶片的内源激素水平。结果表明：“Tiyou418”在灌浆期籽粒中脱落酸(ABA)的变化趋势与亲本不同,前期高,后期低;吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和赤霉素(GA1 3)的变化趋势与亲本相同,但后期积累较高的GA1 3;“Tiyou418”叶片中4种内源激素变化趋势与亲本相似,含量除GAl ,外都介于亲本之间;“Tiyou418”ABA粒／叶峰值出现早,父母本的峰值出现晚,父本C418灌浆前期ZR的粒／叶高。这说明灌浆前期籽粒中较高的ABA有利于灌浆,灌浆后期叶片中(GA1 3 ZR IAA)／ABA下降慢,有利于延缓衰老。     

灌浆阶段低温对寒地水稻碾米及外观品质的影响

本研究对4个水稻品种(系)于灌浆期进行比常温低5℃的处理，结果表明：碾米品质及外观 品质都有不同程度的变化，品种不同，品质变化的幅度也不同。整精米率和垩白大小、垩白米率受 低温的影响较大。     

14-3-3及Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的通过检测14-3-3和Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其在胶质瘤发生、发展中的作用机制.方法采用免疫组化S-P法对5例正常脑组织标本和68例人脑胶质瘤标本进行14-3-3和Bcl-2蛋白检测.结果与正常脑组织比较,14-3-3蛋白在胶质瘤表达异常增强（P〈0.05）;在不同病理分级中胶质瘤组织表达无统计学意义（P〉0.05）,随着胶质瘤恶性程度的增加,14-3-3蛋白表达的强度和范围增加（P〈0.05）.Bcl-2蛋白在不同级别的恶性胶质瘤中阳性表达率有差别（P〈0.05）,且表达强度随着胶质瘤病理分级增高呈明显增高趋势.结论 14-3-3和Bcl-2蛋白对胶质瘤的恶性程度、肿瘤的病理分级有影响,可作为指导临床病理诊断及分级的参考指标.     

外源ABA和GA对小麦籽粒内源激素含量及其灌浆进程的影响

 【目的】探讨喷施外源脱落酸（ABA）或赤霉素（GA）对小麦籽粒内源激素含量及其灌浆进程的影响,为激素调控提高籽粒的粒重提供理论依据。【方法】试验选用山农1391和藁城8901两个品种,籽粒灌浆初期喷施ABA或GA 两种外源激素于穗部,定期取籽粒样品,用高效液相色谱法测定籽粒内源激素含量,用三次多项方程式对籽粒灌浆进程进行模拟并分析相关参数。【结果】喷施外源ABA或GA均能显著增加两个品种的粒重。外源ABA或GA对粒重的调控存在粒位效应。喷施ABA显著增加强势粒粒重,喷施GA使强势粒和弱势粒粒重均显著增加。喷施外源ABA显著提高籽粒ABA含量,喷施外源GA显著提高籽粒GA含量,喷施外源ABA或外源GA均显著提高灌浆中后期籽粒IAA和CTK的含量,尤其是喷施外源GA效果更为明显。喷施外源ABA或外源GA均能延长籽粒的灌浆持续期,喷施ABA显著提高灌浆初期强势粒的灌浆速率,而喷施GA显著提高灌浆中后期强势粒和弱势粒的灌浆速率。【结论】喷施外源ABA或外源GA通过改变籽粒内源激素水平,调节灌浆起始时间和籽粒灌浆持续期,进而调控籽粒粒重的形成。喷施ABA是通过提高强势粒粒重来增加粒重的,喷施GA是通过提高强势粒和弱势粒的粒重来增加粒重的。     

源库调节对水稻灌浆特性的影响

通过剪叶和剪颖花进行源库调节试验，研究了水稻品种“吉农大3号”和“吉农大13号”的灌浆特性。结果表明：“吉农大3号”籽粒干物质积累，灌浆速率，千粒重变化不明显，而“吉农大13号”籽粒干物质积累，灌浆速率，千粒重的变化较大；两品种均为异步灌浆，即存在2次灌浆高峰，“吉农大3号”第1次灌浆高峰大于第2次灌浆高峰。“吉农大13号”第1次灌浆高峰小于第2次灌浆高峰；“吉农大3号”为库限制型品种，“吉农大13号”为源限制型品种。     

水稻籽粒灌浆特性及品质对孕穗巅弱光胁迫的响应

以3个不同直链淀粉含量的水稻品种为材料，研究了孕穗期弱光对水稻籽粒灌浆及稻米品质的影响，并用Richards方程拟合籽粒的灌浆过程。结果表明，孕穗期弱光处理后，籽粒终极生长量（A）有所降低，起始灌浆势（R0）、最大灌浆速率（Gmax）、平均灌浆速率（G）的变化则因品种而异；糙米率、精米率显著下降，整精米率、垩白率、直链淀粉及蛋白质含量的变化因品种而异；精米率、糙米率与籽粒A值呈显著或极显著正相关，直链淀粉含量、整精米率与籽粒的R0、Gmax、G呈显著或极显著负相关，垩白率与籽粒的G、R0、Gmax呈显著或极显著正相关。在弱光区，可以采用育种、栽培技术、化学控制等手段来改变与稻米品质密切相关的籽粒灌浆参数值，以减轻弱光胁迫对稻米品质的危害程度。