豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得

利用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂（Ｃｏｗ－ｐｅａＴｒｙｐｓｉｎＩｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＣｐＴＩ）基因转移进入棉花（ＧｏｓｙｐｉｕｍｈｉｒｓｕｔｕｍＬ．）。棉花幼苗的下胚轴与携带有ＣｐＴＩ基因和Ｎｐｔ－Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养,在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性（Ｋｍｒ）愈伤组织。选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导,继而在分化培养基上进行植株分化,最终获得了再生棉花植株。经Ｎｐｔ－Ⅱ分析、ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测证明,外源ＣｐＴＩ基因和标记基因（Ｎｐｔ－Ⅱ基因）存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ）生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。     

胰蛋白酶对叶蛋白水解作用的研究

以植物叶蛋白浓缩物为材料,用胰蛋白酶在不同条件下对其进行水解。结果表明,胰蛋白酶作用于植物叶蛋白,其最佳水解温度为４０℃;最佳水解ｐＨ值为９;水解程度随酶量和反应时间增加而增加;各种不同种类的植物叶蛋白在相同条件下被胰蛋白酶水解的程度基本一致,证明了植物叶蛋白易被动物体内蛋白酶分解。     

双抗植物表达载体的构建

用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂基因从质粒ｐＢｉｎ２０上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽Ｂ和抗菌肽Ｄ基因的植物表达载体ｐＤＢ３和ＸｂａＩ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有３个抗性基因的双抗植物表达载体ｐＤＢＴ。     

维生素B6对史氏鲟幼鱼胰蛋白酶活性的影响

试验研究了饲料中不同水平维生素B6对史氏鲟（Acipenser schrencki）幼鱼胰蛋白酶活性的影响。在温度为（20±0.5）℃、pH值为6.8～7.5的条件下,研究了低蛋白含量（28%）饲料中,添加不同水平的维生素B6（0、15、30、45、60、75mg/kg）对史氏鲟幼鱼[（34.07±3.44）g]胰蛋白酶活性的影响。结果表明,饲料中的维生素B6添加量为45～60mg/kg时,对幼鲟胰蛋白酶的激活作用最大,并可相应提高对饲料蛋白质的消化率。     

胰蛋白酶水解文蛤蛋白制备抗氧化小肽实验研究

采用胰蛋白酶水解文蛤蛋白以羟自由基清除率为指标制备抗氧化小分子肽。结果表明：胰蛋白酶解液G-15凝胶层析的分离组分在第3管有最大吸收峰,且在2个检测波长下,两者出现峰的位置基本一致。但不同洗脱峰对应的羟自由基清除率差异较大,最大羟自由基清除率为59%。可见最大洗脱峰与最大羟自由基清除率并无一致性。利用Tricine-SDS -PAGE聚丙烯凝胶电泳对各洗脱峰抗氧化小肽进行分离纯度检测表明第4管纯度佳,但其羟自由基清除率只有25%、分子量为460。     

抗生素替代品对泰和乌骨鸡小肠α-淀粉酶和胰蛋白酶活性的影响

为提高泰和乌骨鸡和鸡药用价值、滋补作用及生产性能 ,研究了益生素、寡果糖、糖萜素和中草药制剂等抗生素替代品对泰和乌骨鸡十二指肠内容物中a -淀粉酶和胰蛋白酶的活性影响。结果表明 ,① 5周龄时 ,与对照组相比 ,a -淀粉酶活性 :寡果糖组和糖萜素组均呈显著提高 (P <0 0 5 ) ,益生素组和中草药组有一定程度的提高 ,但无显著差异 ;胰蛋白酶活性 :有显著提高 (P <0 0 5 )的是益生素组、寡果糖组和糖萜素组 ,中草药组有提高的趋势 ,但差异不显著 (P >0 0 5 )。② 10周龄时 ,a -淀粉酶和胰蛋白酶活性呈显著提高 (P <0 0 5 )的有寡果糖组、糖萜素组和中草药组 ,益生素组比对照组有提高的趋势但差异不显著 (P >0 0 5 )。     

茶多酚对大豆胰蛋白酶抑制因子诱导氧化应激的抑制作用

为研究茶多酚对大豆胰蛋白酶抑制因子(STI)诱导的小鼠氧化应激的抑制作用,设3个处理,每组12只清洁级雄性小鼠,第1组为正常对照组,饲喂基础日粮;第2组为模型组(STI组),饲喂添加STI的日粮,第3组为茶多酚组(TP组),饲喂添加STI和茶多酚的日粮。21 d后处死小鼠,测定其氧化及抗氧化指标的变化。结果表明:STI组小鼠由于STI诱导了氧化应激,造成胰腺和血清中的MDA含量均显著升高(P0.05);而添加茶多酚的TP组,其胰腺中MDA含量较STI组显著降低(P0.05),胰腺和血清中T-SOD、T-AOC、CAT、GSH和GSH-Px值较STI组均有不同程度的升高。研究表明,茶多酚有效抑制了STI诱导的氧化应激,削弱了自由基的氧化作用,并有效增强了机体的抗氧化能力。     

达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存

通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果,探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟(Acipenser dabryanus)精巢细胞冻存效果的影响,获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用0.25%胰蛋白酶和2 mg/m L胶原酶H+500 U/m L中性酶II的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化,获得不同消化时间内的活细胞数量。另外,还研究了冷冻稀释液中分别添加10%二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甲醇(MET)作为抗冻剂,采用-1℃/min慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存,冷冻稀释液采用D-海藻糖或同浓度D-蔗糖,以及添加5%、8%、11%卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示:两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率无显著差异,并且都在3 h获得最多活细胞。慢速降温的冻存效果极显著地好于快速降温(P=0.01)。不同抗冻剂的保存效果差异显著,复苏后细胞相对存活率EG(51.70%±5.24%)MET(45.09%±3.15%)DMSO(40.18%±3.90%)。不同糖对达氏鲟精巢细胞冻存效果无显著影响;不同浓度的卵磷脂冻存效果有极显著差异。含8%卵磷脂的冻存液对细胞的冻存效果最好,细胞存活率可达(93.55±2.56)%,培养10 d后细胞数目为0 d时的3.19倍。     

不同浓度胰蛋白酶对PK15细胞传代消化的影响

实验探讨了不同浓度胰蛋白酶对PK1 5细胞传代消化的影响 ,结果显示 0 0 5 %胰酶分散液作者简介 :陆有飞 ,男 ,1 972年生 ,学士 ,工程师 ,　　主要从事兽医药品的生产和研究工作。收稿日期 :2 0 0 3 -0 8-1 1最适于PK1 5细胞的传代消化。     

大豆胰蛋白酶抑制剂及其钝化技术的研究进展

大豆是重要的蛋白质资源之一,但其舍有大量的抗营养因子阻碍机体的消化,尤其是胰蛋白酶抑制剂能抑制生长、造成胰腺肥大.本文综述了大豆胰蛋白酶抑制剂的分类及其特性、作用机理、测定和处理方法.