半乳糖凝集素1的生物学功能及其在鹿茸再生过程中的作用研究进展

半乳糖凝集素1(galectin-1,GAL-1)是一种分子质量约为14 ku的β-半乳糖苷结合蛋白,分布于许多不同类型的细胞和组织中,在细胞内外均具有广泛的生物学活性,参与调节多种生理病理过程。GAL-1以剂量依赖性和细胞特异性双向调控细胞增殖,通过血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)途径促进血管的生成,参与机体的免疫调节,诱导T细胞凋亡、抑制T细胞增殖和抗原递呈细胞活化等。此外,GAL-1被认为是多种类型肿瘤的标志物,肿瘤细胞通过分泌GAL-1促进肿瘤内的血管生成和自身免疫逃逸。鹿茸是指鹿科动物头部衍生的未骨化密生茸毛的幼角,也是在自然界哺乳动物中迄今为止发现的唯一可实现周期性完全再生的骨质附属器官。鹿茸的再生是基于鹿茸干细胞增殖的过程,GAL-1在鹿茸干细胞中表达,并且鹿茸的再生过程与GAL-1生物学功能息息相关。然而,GAL-1在鹿茸再生过程中所扮演的角色仍待深入研究。作者综述了GAL-1的结构、生物学功能及其在鹿茸再生过程中的作用,以期为GAL-1和鹿茸再生机制的研究带来新的启示。     

雄激素对鹿茸发生和再生的影响

雄激素是类固醇激素,除了促进生殖器官发育外,还与生殖系统肿瘤的发生、发展密不可分。鹿茸作为唯一可以完全再生的哺乳动物器官,其发生和再生过程与雄激素的调控有关。雄激素不但是决定鹿茸发生与否的决定性因子,而且在鹿茸再生过程中,雄性激素还具有维持鹿茸形态正常生长作用。在生茸过程中鹿茸干细胞由雄性激素依赖性变成雄性激素非依赖性,此现象与前列腺癌发生机理类似。但是鹿茸的及时骨化防止了瘤状器官的产生,这为攻克前列腺癌提供了良好的思路。现将雄激素对鹿茸发生和再生的影响作简要综述。     

miRNA调控鹿茸生长发育的研究进展

鹿茸是雄性鹿科动物(除驯鹿外)特有的能够周期性再生的器官,其生长发育受到多种因素的共同调控。miRNA(microRNA)是一类在真核生物中发现的内源性的具有调控功能的非编码RNA,在基因表达调控、细胞周期、生物体发育等方面发挥着重要的调控作用。本文从miRNA的相关技术、鹿茸组织中miRNA的鉴定、miRNA对生长因子的调控作用、miRNA对鹿茸细胞增殖的作用以及miRNA对鹿茸再生调控的研究几个方面就现有miRNA对鹿茸生长发育的研究进行总结和展望,为今后鹿茸生长发育机理的诠释具有一定的意义。     

鹿茸角发育与再生机理

对鹿茸角发育与再生调节机理的研究进展进行了综述,并对与鹿茸角发育与再生相关的一些生理问题进行了探讨。已确认的与鹿茸角再生关系密切的重要分子有甲状旁腺激素相关肽、视黄酸、胰岛素样生长因子等,这些物质广泛分布于芽基及快速生长的鹿茸角内,可调节软骨细胞、成骨细胞及破骨细胞的分化。由于鹿茸角再生过程与生殖周期密切相关,性激素可能对这些因子在鹿茸角内的表达起调节作用     

鹿茸生长发育及其再生调控机制的研究进展

鹿茸是一种名贵中药,具有补肾壮阳、生精益血、补髓健骨、延缓衰老和增强免疫功能的作用。作为唯一能够完全再生的哺乳动物器官,鹿茸的生长发育及再生有其特殊的机制。文章对鹿茸的生长规律、再生机制以及激素、生长因子对鹿茸生长发育和再生的影响进行了简要综述,以期对鹿茸生产提供一定的指导。     

不同生长时期梅花鹿鹿茸差异蛋白质组学分析

旨在从分子水平认识鹿茸生长机制,本研究以10、40、60与130d的梅花鹿鹿茸为试验材料,运用双向凝胶电泳(2-DE)、质谱鉴定技术与生物信息学方法对梅花鹿鹿茸生长过程中差异表达蛋白质进行研究。结果显示,有46种蛋白质差异性表达,且主要参与细胞骨架、转运过程、信号转导、细胞凋亡、骨发育、蛋白质合成、核酸代谢、免疫、能量代谢、细胞增殖、抗氧化、蛋白质折叠等生物学过程。结合鹿茸的快速生长与快速骨化的独特生长过程,对差异表达蛋白质中的骨发育相关蛋白、抗氧化蛋白、细胞凋亡相关蛋白做进一步分析,发现P4HB、SPARC、过氧化物还原酶2、过氧化物还原酶4、半乳糖凝集素1、视黄酸结合蛋白1等6种蛋白质在鹿茸快速生长与快速骨化过程中起着重要的作用,为鹿茸生长与骨化机制的进一步研究奠定基础。     

鹿茸生长影响因子概述

鹿茸是雄性鹿科动物额角未骨化的角,具有完整的组织结构,每年可以完全再生。鹿茸的生长特性使其成为再生医学、癌症研究和关节软骨损伤修复研究的重要模型,然而鹿茸再生和快速生长的调控机制研究还不透彻。鹿茸的生长发育过程非常复杂,受到营养、品种、年龄、体内不同激素、各种气候条件和相关因子等的调控。本文对鹿茸的研究现状作以概述,为鹿茸研究工作者提供理论依据。     

细胞周期蛋白D1在梅花鹿茸角中的表达

以梅花鹿为研究对象,通过原位杂交方法对细胞周期蛋白D1（cyclin D1）在梅花鹿茸角中的表达进行了研究。结果显示,cyclin D1在梅花鹿茸角表皮层内表达极少,在茸角真皮层、间充质层及软骨层等处均有表达,但在表达强度上存在差异。在真皮层中,cyclin D1在真皮成纤维细胞中有较强的表达,在鹿茸间充质细胞中也有少量cyclin D1的表达,在鹿茸软骨层中,cyclin D1在软骨细胞中的表达量非常高,主要表达在增殖区的软骨细胞中。结果表明,cyclin D1可能在梅花鹿茸角再生过程中起重要的调控作用。     

塔里木马鹿鹿茸VEGF基因克隆及其在不同鹿茸组织中的表达研究

试验旨在从塔里木马鹿鹿茸顶端组织中克隆血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的编码序列,分析其分子特性及其在鹿茸组织中的表达情况。本研究采用改良的Trizol法提取鹿茸顶端组织总RNA,以RT-PCR方法获得VEGF基因,回收纯化后连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并鉴定,利用免疫组化法确定VEGF蛋白在塔里木马鹿鹿茸顶端组织茸皮层、间充质层和软骨层中的表达水平。结果显示,VEGF基因开放读码框（ORF）全长为648 bp,编码216个氨基酸。通过其序列比对和进化分析发现,塔里木马鹿茸中VEGF与人、牛、羊、猪的VEGF核苷酸序列同源性分别为98.75%、96.55%、97.58%和97.56%,其中与人VEGF同源性较高。免疫组化试验表明,塔里木马鹿VEGF蛋白在间充质、茸皮层和软骨中均有表达,但无明显表达差异。说明塔里木马鹿鹿茸可能会是人类研究再生医学和血管相关疾病的理想模型,同时,本研究为不同发育期塔里木马鹿鹿茸再生干细胞比较蛋白质组学研究提供了基础试验数据。     

鹿茸再生及其分子调节机理研究进展

鹿茸是唯一可以周期性完全再生的哺乳动物器官,这种再生起源于骨膜干细胞。鹿茸再生伴随着皮肤、血管和神经的快速生成,而且多种多肽和生长因子参与其中,组成了一系列复杂而精密的信号调控通路。作者综述了鹿茸再生过程的组织学及分子信号通路研究现状,以信号转导通路为研究重点揭示鹿茸再生之谜,为更好地了解哺乳动物器官再生机制提供参考。     

鹿茸活性成分及其药理功能的研究进展

鹿茸是我国传统的名贵中药,它的化学成分和药理功能比较复杂。近年来,许多科学家对鹿茸的药理作用进行了深入研究,包括免疫增强、神经保护、生殖促进、抗骨质疏松、抗衰老、抗肝纤维化和抗关节炎等方面的药理作用。文章对鹿茸的活性成分及其药理作用的研究进展作一综述,旨在为进一步开发、利用鹿茸提供相应的理论依据。     

Evaluation of techniques for lignocaine hydrochloride analgesia of the velvet antler of adult stags

Aim: To evaluate the effectiveness of various routes of administration and doses of local anaesthetic (LA) to provide analgesia of the velvet antler of adult stags.

Methods: In Experiment 1, antlers from 50 red deer stags, ≥2-years-old were allocated to 1 of 4 treatment groups (n = 25 antlers/group) to receive injections with 2% lignocaine hydrochloride as follows: High-dose (1 ml/cm pedicle circumference) or Low-dose ring-block (0.4 ml/cm pedicle circumference) or; High-site or Low-site regional nerve block (5 ml per site, both of which included the auriculopalpebral nerve). An electrical stimulus was applied before application of LA and then each min for up to 4 min after LA injection. If no response was observed, analgesia was tested with a saw cut. If no response occurred, the antler was cut at that time. If the animal responded, a further wait time was applied until 4 min had elapsed, at which time observations ceased. In Experiment 2, 10 primary and 50 re-growth antlers were given a High-dose ring-block and tested with a saw cut after 1 min (n = 30) or 2 min (n = 30). If no response occurred, the antler was removed. If a response occurred, further 1-min wait periods were applied.

Results: In the High-dose ring-block and High-site nerve-block groups, 24/25 and 21/25 antlers were removed without response by 2 min, compared with 20/25 and 15/25 antlers in the Low-dose ring-block and Low-site nerve-block groups, respectively. The High-dose ring-block provided more effective analgesia after 3 min than the Low-dose ringblock, as assessed by the number of stags that did not respond to the electrical stimulus (p = 0.008), or subsequent antler removal (p = 0.050). The numbers of antlers removed without response after 1 or 2 min were greater using the High-site nerve-block than the Low-site nerve-block (p = 0.002 and p = 0.037, respectively). In all but the High-dose ring-block group, at least 1 stag required further LA after 4 min, before antler could be humanely removed. In Experiment 2, stags reacted to a saw-cut test on 6/30 antlers, 1 min after a High-dose ring-block, compared with 1/30 antlers after 2 min (p = 0.051).

Conclusion: The High-dose ring-block produced the most effective and rapid analgesia.

Clinical relevance: A High-dose ring-block with a 2-min wait period should be the preferred method for achieving local analgesia for velvet antler removal.     

鹿茸低温冷冻干燥加工技术

为提高鹿茸加工效率和产品质量,探索鹿茸加工新工艺,2004~2006年在梅花鹿收茸季节,利用现代食品和生物制品冷冻保鲜与干燥技术理论对鹿茸进行低温冷冻干燥加工试验研究,结合鹿茸的组织结构和生物学特点,对鲜茸进行冷冻保鲜与脱水干燥制成鹿茸产品,并与沸水煮炸、微波能和远红外烤箱烘烤等传统的鹿茸加工方法相比较。结果表明,该工艺可最大限度的保持鹿茸的活性营养成分,并使鹿茸的形、色、味基本保持不变,保证了鹿茸质量,大大缩短加工周期,既保证规范化操作,又便于计算机控制技术指标。     

梅花鹿锯茸时出血特点及止血药物的研究

为达到更好的锯茸止血效果,对梅花鹿锯茸时出血特点及锯茸止血药物应用效果进行了观察:收取初角茸时呈渗出状出血;收取二杠茸时呈线状出血;收取三杈茸和畸型茸时呈喷射状出血,并且有节律地进行搏动。出血量随着鹿茸的产量和茸根围度的增加而增多,但是当收取茸根围度为(20.3±0.6)cm的畸型茸时却不存在这种明显的相关关系。同一茸型不同年龄的鹿,因茸重、茸根围度的不同出血亦有差别。根据鹿茸的组织结构、生长规律和梅花鹿生理特点,选用由中药组成的外用锯茸止血药方剂,通过锯茸止血试验,结果表明,该锯茸止血药无刺激性,止血快,抗感染能力强,创面愈合良好,对再生茸产量没有明显影响(P>0.05)。     

梅花鹿鹿茸总蛋白提取方法对双向电泳图谱的影响

鹿茸是唯一可以重复再生的哺乳动物器官。利用不同的提取方法制备梅花鹿鹿茸总蛋白样品,分别进行双向电泳,从得到的蛋白点的数量和点的圆滑程度、分辨率等确定适合的提取方法。分别用全蛋白提取试剂盒、自制裂解液、丙酮沉淀制备蛋白样品,并对得到的3种2-DE图谱进行比较分析。结果显示,试剂盒提取法和自制裂解液法得到的蛋白点比较多、圆滑,图谱清晰;丙酮沉淀法得到的蛋白点不如前者多,图谱有横竖纹。     

Bcl-2在梅花鹿茸角中的表达

鹿茸角是哺乳动物唯一的失去后还能完全再生的器官,人们对鹿茸角再生的分子机理了解甚少。本试验以梅花鹿为研究对象,通过原位杂交方法对Bcl-2在梅花鹿茸角中的表达进行了研究。结果显示,Bcl-2在梅花鹿茸角表皮层内表达甚微,在茸角真皮层、间充质层及软骨层等处均有表达,但在表达强度上存在一定差异。在真皮层中,Bcl-2在真皮成纤维细胞中有较强的表达,在鹿茸间充质细胞中也有少量Bcl-2的表达;在鹿茸软骨层中,Bcl-2在软骨细胞中的表达量很高,主要表达在增殖区的软骨细胞中。这表明Bcl-2可能在梅花鹿茸角再生过程中起重要的调节作用。