三种检测雏番鸭细小病毒抗原方法的比较

我们应用番鸭细小病毒单克隆抗体建立检测MPV抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，并和胶乳凝聚试验（LPA）、免疫荧光抗体试验（FA）的检测结果相比较：１材料方法１．１病毒和单克隆抗体雏番鸭细小病毒强毒株（MPV－F），雏番鸭细小病毒单克隆抗体（MPV－McAb１５），由本所单克隆研究室制备提供犤１、２犦。１．２样品处理２日龄雏番鸭２０羽，每羽腿部肌肉注射０．２mlMPV－F番鸭胚悬液。待雏番鸭发病后扑杀，取肝脏和脾脏组织。一部分组织用蒸馏水制成１∶１匀浆液后，加等体积氯仿振荡３min，５０００rpm／min离心５min，…     

鹅枕静脉窦采血制备抗小鹅瘟血清的试验

对１７０只青年鹅进行了枕静脉窦采血试验，并检测了４次重复大量采血的血清抗体效价及重复采血对试验鹅健康的影响。结果如下：一个抗体效价高峰期内，枕静脉窦４次重复采血（隔日１次或每日１次）所获平均血量（２００ｍＬ）是宰杀采血量（１１０ｍＬ）的１．８倍，而获血清量则达２倍以上。所获血清的抗小鹅瘟病毒效价与宰杀采血的血清相当，对人工感染雏鹅的保护率达１００％。４次重复采血对试鹅健康无明显影响。结果表明，鹅枕     

鸭疱疹病毒Ⅱ型（暂定名）的分离鉴定

自1990年以来，在福建、浙江和广东等省发生一种以双翅羽毛管淤血呈紫黑色、断裂和脱落以及皮下、脏器（肝脏、胰脏）和肠道（十二指肠、直肠和盲肠）出血为主要特征的新的鸭传染病，暂定名为鸭出血症。我们对从自然感染该病典型病死番鸭脏器中获得的1株含2种病毒粒子（直径大小分别为30－40mm和80－120mm)的分离物，以Ⅰ型雏鸭病毒性肝炎标准阳性血清进行连续4代中和后接种番鸭胚，收集死亡番鸭胚胚液进行病毒纯化、负染、电镜观察和SPF鸡胚接种试验证明获得单一病毒分离株（定名为鸭出血症病毒）。该病毒为不耐酸、不耐碱、不耐热、对氯仿处理敏感、核酸类型为双股DNA的有囊膜病毒，直径为80－150nm；对番鸭胚、鹅胚、麻鸭胚、半番鸭胚、北京鸭胚和SPF鸡胚的致 死率分别为100％、100％、78．3％、60％、82．1％和0％；对10－11日龄番鸭胚的ELD50为10^-7.78/0.2ml；无血凝活性，不凝集“O”型人、鸭、鸡、鹅、家兔、小鼠，豚鼠、猪和绵羊红细胞；经血清中和试验证明该病毒与Ⅰ型雏鸭肝炎病毒、雏番鸭细小病毒、雏鹅细小病毒、鸭瘟病毒无血清学相关性。据以上结果可将该病毒确定为疱疹病毒科成员，但鉴于其与鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒Ⅰ型）无血清学相关性，则暂定名为鸭疱疹病毒Ⅱ型，此为国内外首次报道。     

检测鹅细小病毒的间接免疫酶组织化学法的建立

鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）在自然传染情况下感染鹅和雏番鸭，根据其流行病学特征、临床症状和病理剖检可做出初步诊断，确诊还需要实验室诊断。目前用于实验室诊断和检测GPV的方法很多，如鹅胚或番鸭胚及相应的成纤维细胞分离培养病毒、琼脂扩散试验、ELISA、免疫荧光技术、核酸探针等。     

番鸭细小病毒病病原的血清学检测与PCR鉴定

为了解安徽省番鸭细小病毒病的流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该省内部分番鸭群进行鹅细小病毒的血清抗体检测,同时对疑似病鸭进行了病原的PCR检测。结果发现,在被检测的44份血清样本中鹅细小病毒血清抗体阳性率高达34.1%;PCR检测结果显示,所检测的样品中,有2份为鹅细小病毒阳性,1份为番鸭细小病毒阳性,且3份被检样品均来自雏番鸭。该研究结果表明,该省番鸭群中存在鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染,应采取有效的预防控制措施。     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＰＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ，ＩＢＤＶ，ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应，腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０＾－５－１０＾－７，琼扩沉淀效效价达１：２０－１：５１２，鹅胚中和效价达１：３０－１：１２２，鹅体中和效价为１：５４－－１：９６。ＧＰＳ１和ＧＰＧ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良     

鸭群主要传染病的免疫程序

1．雏鸭群：（1）雏番鸭小鹅瘟、雏番鸭细小病毒病活苗免疫：在出壳后48h内应用二联雏鹅活苗免疫．或二种单活苗免疫。（2）雏鸭病毒性肝炎活苗免疫：雏鸭和雏番鸭在出壳后3日龄左右应用该病活苗免疫。（3）番鸭坏死性肝炎（番鸭肝白点）活苗或灭活苗免疫雏番鸭3日龄左右应用本病活苗免疫．或用灭活苗免疫．每羽皮下0.3～0.5mL。     

番鸭细小病毒弱毒株的选育及其生物学特性

应用生物技术对番鸭细小病毒莆田株（ｍｕｓｃｏｖｙｄｕｃｋｌｉｎｇｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＭＰＶ－Ｐ）进行诱变，选育出符合制苗用的弱毒疫苗株（ＭＰＶ－Ｐ１）。该弱毒株失去了对１日龄雏番鸭的致病力，对番鸭胚的ＥＬＤ５０为ｌｇ４．５～ｌｇ５．０；对ＭＤＥＦ细胞ＴＣＩＤ５。为ｌｇ５．０～ｌｇ６．０；在雏番鸭体内连续传５代，未见毒力返强现象。１日龄番鸭免疫接种ＭＰＶ－Ｐ１后，第３天部分鸭血清中出现抗体，第７天全部出现抗体，第２１～３０天抗体效价值达高峰。肌肉注射比滴鼻免疫接种方法效果好。该弱毒株具有良好的免疫原性和遗传稳定性。     

番鸭细小病毒病疫苗毒株特性的研究

用患病雏番鸭肝脏和胰脏病料接种易感番鸭胚分离到一株病毒,经鉴定为细小病毒科、细小病毒属、番鸭细小病毒。本毒株首先在番鸭胚传3代适应后,转在鹅胚传38代,使12日龄鹅胚的致死时间稳定在第5～9天,致死率约98％,毒价ELD_(50)可达10~(6～7/0.2ml;M_(91)G_(26)鹅胚绒尿液接种1日龄易感雏番鸭已不引起发病,接种后20天,血清中琼扩抗体均为阳性。     

鹅细小病毒研究进展

鹅细小病毒（Goose Parvovirus，GPV）主要引起1月龄雏鹅和雏番鸭的细小病毒病，称小鹅瘟或Derzsy’s病。该病是一种传播快、死亡率高的高度接触性传染病。对10日龄雏鹅发病率和死亡率可达100％，在易感群中的致死率高达70％。该病以渗出性肠炎、小肠粘膜表层大片坏死脱落、肠道栓塞为特征性病变，是目前危害养鹅业的主要疾病之一。鹅细小病毒病最早是由我国学者方定一于1956年在扬州发现，并于1961年用鹅胚分离到该病毒。近年来，本病在世界各地均有不同程度的流行，广泛发生于中国、欧洲各国、以色列、越南和日本的家鹅和番鸭。     

应用微量中和试验进行猪伪狂犬病血清学调查

应用细胞培养微量中和试验（固定病毒稀释血清法）对来自２４个猪场共４２６份血清进行了猪伪狂犬病血清学调查,共检出阳性血清１７１份,血清阳性率达４０．１％,出现血清阳性的猪场有２０个,占所检测猪场的８３．３％,说明伪狂犬病在我省及我国流行相当严重,对其中５０份血清中的中和指数（固定血清稀释病毒法）进行了检测,结果中和效价大于１：２血清的中和指数都在１０＾２．５以上。     

火鸡疱疹病毒（HVT）抗血清的制备及检测

制备２批抗火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）血清，无菌检验合格，与鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊炎病毒（ＩＢＤＶ）和Ｒｅｏ无交叉中和反应。蚀斑减少试验结果表明当病毒含量为１０个、５个羽份／０．１ｍｌ时，中和后尚有一些蚀斑存在。病毒含量为３．３羽份／０．１ｍｌ或更低时，中和后未见典型蚀斑存在     

一种新的番鸭疫病（暂名番鸭肝白点病）病原的发现

利用番鸭胚从患有软脚为主要临床症状,以肝、脾表现有多量白点,肾肿大、出血为主要病变的疫病（暂称不“番鸭肝白点病”）的雏番鸭肝、脾中分离到５株病毒。番鸭胚经病毒接种后２～５ｄ死亡,胚体枕部、颈部、背部充血、出血,部分胚体肝、脾表面有灰白色小点,直径约０．５ｃｍ。病毒经适应后能在番鸭胚成纤维细胞中增殖并传代,产生细胞病变。雏番鸭经人工感染后出现秘自然发病鸭相同的临床症状和病理变化,并回收到病毒。经电镜     

雏番鸭细小病毒病诊断技术和试剂的研究

根据番鸭细小病毒单克隆抗体（ＭＰＶ－ＭｃＡｂ）致敏的胶乳可与ＭＰＶ产生特异性凝集反应，而这种特异性凝集反应可被ＭＰＶ抗体所抑制的原理，建立了胶乳凝集试验（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制试验（ＬＰＡＩ）。致敏抗体蛋白浓度为０．５ｇ／Ｌ时，ＬＰＡ可检测出ＭＰＶ最小蛋白量为２μｇ／Ｌ。对ＬＰＡ与ＦＡ、ＬＰＡＩ与ＡＧＰ作了比较，结果：ＬＰＡ阳性率９０．５％，ＦＡ阳性率９２．４％，两者的符合率９２．４％；鸭血清ＬＰＡＩ抗体效价在Ｌｏｇ２５以下时，ＡＧＰ试验均阴性，前者比后者敏感性高３２～６４倍。ＬＰＡＩ抗体效价与保护力相关性试验结果表明，当鸭血清中ＬＰＡＩ抗体效价在Ｌｏｇ２１以上时，雏番鸭均能耐受强毒的攻击，两者呈正相关。致敏胶乳和抗原保存时间在４～８℃时，分别为５个月和６个月；在２２～２８℃时，分别为７ｄ和１５ｄ。     

鸡胚对雏番鸭细小病毒易感性的探讨

鸡胚对雏番鸭细小病毒易感性的探讨娄华（福建泉州师专生物系３６２０００）王政富（广东佛山农牧专科学校５２８２３１）引起雏番鸭细小病毒病（俗称“番鸭三周病”、又称“番鸭小鹅瘟”）的病原过去一直认为是小鹅瘟病毒，但近几年来据有关报道及我们的调查研究发现，本...     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体的研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５～１０－７，琼扩沉淀效价达１２０～１５１２，鹅胚中和效价达１３０～１１２２，鹅体中和效价为１５４～１９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５两株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。     

小鹅瘟病毒实验室检测方法研究进展

小鹅瘟（Gosling plague,GP）又称为鹅细小病毒病,是由细小病毒科细小病毒属的鹅细小病毒（Goose parvovirus,GPV）引起的一种急性或亚急性、高度接触性、败血性传染病。该病主要以严重下痢、渗出性肠炎和肠道栓塞为特征。发病雏鹅常表现为出血性、纤维素性及渗出性肠炎,最后形成肠内栓塞。该病主要发生于1月龄以内雏鹅和雏番鸭,具有传播快、     

雏番鸭细小病毒病和小鹅瘟双联抗体的研制和应用

随着人们膳食结构的改变，我市番鸭养殖从原先一家一户少量饲养到目前专业户饲养和大规模饲养，在近二三年内得到了快速发展。1998年我市种番鸭年存栏2.5万余羽，年产雏番鸭在230万羽左右。但自1997年8月以来，我省各地及福建等地普遍严重发生一种3周龄左右雏番鸭以腹泻、喘气为主要特征的急性传染病，初步诊断为番鸭细小病毒（MPV）或鹅细小病毒（GPV）感染，但在临床上难以明确区分，因而用番鸭细小病毒弱毒疫苗进行预防、番鸭细小病毒卵黄抗体或小鹅瘟卵黄抗体进行预防或治疗，有时有一定效果，有时无效，死亡率高的达40％～70％，给…     

两种方法检测雏番鸭细小病毒抗体效价的比较

本文对检测雏番鸭细小病毒抗体效价的LPAISN两种方法进行比较,现报道如下:1材料与方法1.1病毒和血清:番鸭细小病毒福州株(MPV-F),鸭细小病毒阳性血清、阴性血清和单抗致敏的胶乳由本室提供。雏番鸭细小病毒活疫苗也由本室提供。1.2试验鸭及疫苗免疫1日龄雏番鸭45羽购自田县,分别腿部肌肉注射2001、2003和2005批号疫0.2ml。每批号疫苗注射15羽。隔离饲养15天后,心采血,分离血清。每批次随机抽取5份血清,56℃水灭活30min后供测试。1.3胶乳凝集抑制试验(LPAI):参照程由铨的方法取被检血清50μl加入第一孔(4单位抗原孔)中,混后取50μl加入…     

应用微量中和试验进行猪伪狂犬病血清学调查

应用细胞培养微量中和试验（固定病毒稀释血清法）对来自２４个猪场共４２６份血清进行了猪伪狂犬病血清学调查。共检出阳性血清１７１份,血清阳性率达４０．１％,出现血清阳性的猪场有２０个,占所检测猪场的８３．３％,说明伪狂犬病在我省及我国流行相当严重。对其中５０份血清的中和指数（固定血清稀释病毒法）进行了检测,结果中和效价大于１∶２血清的中和指数都在１０２．５以上。