间接ELISA检测番鸭细小病毒抗体

鸭细小病毒病是由鸭细小病毒（Duck parvovirus,DPV）引起的一种急性病毒性传染病,以雏鸭易感,临床主要表现为气喘、脚软和渗出性肠炎,死亡率约50%～80%,在世界各养鸭地区都有分布,其预防和控制已直接关系到水禽养殖业的持续稳定发展[1]。临床和实验室试验证实番鸭细小弱毒疫苗是预防控制该病最有效措施,而对细小病毒特异性抗体的监测是评价疫苗免疫效果及鸭群合理制定免疫程序的关键[2]。目前国内已经报道[3]的检测番鸭细小病毒抗体的方法有血清微量中和试验、微量点凝试验、胶乳凝集反应、琼脂扩散试验,     

三种检测雏番鸭细小病毒抗原方法的比较

我们应用番鸭细小病毒单克隆抗体建立检测MPV抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，并和胶乳凝聚试验（LPA）、免疫荧光抗体试验（FA）的检测结果相比较：１材料方法１．１病毒和单克隆抗体雏番鸭细小病毒强毒株（MPV－F），雏番鸭细小病毒单克隆抗体（MPV－McAb１５），由本所单克隆研究室制备提供犤１、２犦。１．２样品处理２日龄雏番鸭２０羽，每羽腿部肌肉注射０．２mlMPV－F番鸭胚悬液。待雏番鸭发病后扑杀，取肝脏和脾脏组织。一部分组织用蒸馏水制成１∶１匀浆液后，加等体积氯仿振荡３min，５０００rpm／min离心５min，…     

抗雏番鸭细小病毒鸡源卵黄抗体的制备及保护效果研究

<正>雏番鸭细小病毒病(MDPVD),俗称"三周病",该病是由番鸭细小病毒引起的3周龄内的雏番鸭发病。病番鸭表现为脚软、呼吸困难及腹泻为主要症状,该病的死亡率可达40%~50%以上,给养鸭业造成巨大危害。目前控制本病的方法主要为疫苗免疫接种及一些综合防制措施,对发病动物采用番鸭超免卵黄抗体或超免血清作被动免疫,进行紧急     

鸭疫里默氏菌油乳剂疫苗的免疫期和保存期的测定

鸭疫里默氏菌(Riemerellaanatipestifer,RA)病主要侵害7～42日龄的各种雏鸭,已成为危害我省养鸭业的主要细菌性传染病。去年,我们已研制出具有较高保护率的鸭疫里默氏菌油乳剂疫苗[1]。为了测定该疫苗的有效免疫期和保存期,我们进行了试验,现报道如下:1　材料与方法　1.1　菌株　系本室自行分离、鉴定、保存的型RA菌株,供制苗及攻菌保护试验用。1.2　疫苗　鸭疫里默氏菌灭活油乳剂疫苗(批号为980811),置于4～8℃保存备用。1.3　试验鸭　取3日龄健康半番鸭200羽,其中180羽用于免疫期测定,20羽用于保存期测定,试验分组情况见表1。表1　　RA…     

番鸭细小病毒病的防控措施

番鸭细小病毒病主要侵害5～20日龄的雏鸭,发病时间集中在2～4周龄,发病率和死亡率均可达40％～50％,严重危害雏鸭饲养业的发展.因此,一定要做好番鸭细小病毒病的预防工作,控制和消灭传染源,严禁到疫区引进番鸭苗、种鸭和种蛋,做好种鸭免疫接种,为易感雏番鸭提供母源抗体保护.对孵化场、孵化箱、孵化室和孵化用具进行严格消毒.在雏鸭出壳后48 h内皮下接种番鸭细小病毒弱毒疫苗,加强育雏期的饲养管理与清洁消毒,以防止该病的发生.一旦发生该病,对发病番鸭可立即注射雏番鸭细小病毒活疫苗、高免血清或卵黄抗体紧急防控,同时,可适当使用一些抗生素控制某些细菌的合并感染或继发感染.     

番鸭细小病毒病和小鹅瘟二联活疫苗对雏番鸭的免疫效力研究

为评价番鸭细小病毒(MPV)和番鸭源鹅细小病毒(MDGPV)二联活疫苗(以下简称"二联苗")对1日龄胶乳凝集抑制(LPAI)抗体阴性的雏番鸭的免疫保护效力,本研究进行了血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护相关性的研究及免疫持续期试验。不同抗体水平的雏番鸭攻毒试验结果表明,当免疫鸭血清MPV-LPAI和GPV-LPAI抗体效价分别达1.0 Log2和2.0 Log2以上时,即可有效抵抗MPV和GPV强毒的攻击。免疫期试验结果表明,二联苗以0.2 m L的剂量免疫雏番鸭,接种后各实验组雏番鸭均产生较高的LPAI抗体,其免疫期能持续360 d。上述结果表明该二联苗能够诱导雏番鸭产生良好的免疫应答,可以有效预防番鸭细小病毒病和番鸭小鹅瘟病。     

番鸭细小病毒病

（上接２００１年第５期P４１）４．２血清学诊断方法４．２．１中和试验：①雏番鸭中和试验：将上述被检病料的上清液，或分离的胚绒尿液毒（鹅胚或番鸭胚，须５代以内）分成２份，１份加入４倍量已知抗番鸭细小病毒血清，另１份加入４倍量灭菌生理盐水或PBS代替抗血清，混匀后置３７℃温箱作用６０min。每组分别注射６羽５日龄左右的易感雏番鸭，每雏皮下０．２ml，隔离饲养观察１０d。血清组雏番鸭健活，而对照组雏番鸭发病死亡，其临床症状及病变与自然病例相同，即可确诊为本病毒所致。②鹅胚中和试验：本法用已知番鸭细小病毒鹅胚适…     

番鸭细小病毒感染的诊断

针对番鸭细小病毒VP3基因片段,通过PCR检测番鸭细小病毒核酸,利用RT-PCR和PCR方法排除鸭病毒性肝炎和鸭瘟感染,利用非免疫雏鹅接种试验排除小鹅瘟病毒感染,确诊引进的番鸭患鸭细小病毒病.     

番鸭细小病毒病病原的血清学检测与PCR鉴定

为了解安徽省番鸭细小病毒病的流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该省内部分番鸭群进行鹅细小病毒的血清抗体检测,同时对疑似病鸭进行了病原的PCR检测。结果发现,在被检测的44份血清样本中鹅细小病毒血清抗体阳性率高达34.1%;PCR检测结果显示,所检测的样品中,有2份为鹅细小病毒阳性,1份为番鸭细小病毒阳性,且3份被检样品均来自雏番鸭。该研究结果表明,该省番鸭群中存在鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染,应采取有效的预防控制措施。     

番鸭细小病毒病研究进展

番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(Muscovy Duck Parvovirus,MPV)引起的番鸭的一种烈性传染病,因该病主要侵害1～3周龄雏番鸭故又称3周病.早在1985年我国首次在福建发现了雏番鸭的细小病毒[1].1989年法国西部也发生了致死亡率为80%的番鸭疫病,并分离到病毒[2].其发病率和死亡率均很高,病愈鸭大部分成为僵鸭,给养鸭业造成严重经济损失.随着分子生物学的不断发展,人们对番鸭细小病毒的认识也在不断深入.     

"神农草"对番鸭细小病毒病的防治效果

番鸭细小病毒病是由细小病毒引起的一种雏番鸭传染性疾病 ,发病率高 ,往往给养鸭专业户带来较大的经济损失。笔者根据近几年的临床实践 ,对此病采用神农草等中西结合的综合措施 ,取得了较为满意的防治效果。现报告如下。1　病症表现　本病多发生于 3周龄以内的雏番鸭 ,故本病又称为“三周病” ;主要临床症状为拉白色或绿色水样稀粪 ,喘气、软脚 ,有时出现扭颈等神经症状。小肠尤其是蛋黄蒂附近肠腔膨胀硬实 ,内有“腊肠样栓子” ,从患鸭的肝、脾中容易分离到细小病毒。2　防治　2 .1　预防 :雏鸭出壳 1日龄内每羽皮下或肌注 0 .2ml鸭细小病…     

新型鸭呼肠孤病毒和鸭肝炎病毒混合感染的诊断及病原分离

广东某养鸭场番鸭发生疑似雏鸭肝炎急性死亡病例。为了确诊病因,取病鸭肝脾等组织进行实验室检测和病原分离鉴定,结果显示:病鸭肝脾组织,冰冻切片免疫荧光检测番鸭源鹅细小病毒(MDGPV)和番鸭细小病毒(MPV)阴性;RT-PCR检测鸭肝炎病毒(DHV)和新型番鸭呼肠孤病毒(NDRV)为阳性。将肝脾匀浆上清接种12日龄番鸭胚后3日死亡,进一步应用RT-PCR和免疫荧光法检测胚液和死胚胚心,结合扩增基因的测序、动物回归试验等,确诊发病鸭为NDRV和DHV的混合感染。     

鹅细小病毒NS1蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

本研究克隆了鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)佛山株(Foshan-2009)的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体p ET32a(+),构建重组质粒p ET32a-NS1。经转化,IPTG诱导表达及SDS-PAGE和Western blot分析表明,NS1蛋白得到了表达,并且能与抗GPV的番鸭血清发生特异性反应。通过棋盘法确定NS1蛋白包被量为0.5μg/孔,待检血清1:50稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:10 000倍稀释时ELISA反应条件最佳,并确定阴阳性临界值为0.399。该ELISA方法特异性强,与番鸭细小病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清均无交叉反应;重复性好,批内和批间重复试验的变异系数分别小于5%和10%;检出率高,GPV阳性番鸭血清的检出率为92%。本研究所建立的间接ELISA方法为鹅细小病毒的血清学诊断和流行病学监测奠定了基础。     

雏番鸭细小病毒病诊治

<正>雏番鸭细小病毒病主要发生于3周龄以内的雏番鸭,是由细小病毒引起的一种急性、败血性传染病,其具有高传染性和高致死率。1病原雏番鸭细小病毒属细小病毒科,为球形单股DNA病毒,无囊膜,其可在番鸭胚中增殖,并能致死鸭胚。雏番鸭细小病毒对酸和热不敏感,对紫外线敏感。2流行病学本病6~21日龄雏番鸭最易感,感染后死亡率高达40%~60%,30日龄以上的番鸭感染后死亡率较低,往往成为发育不良的僵鸭。本病主要通过消化道传染,不洁孵化场和带毒鸭为传染源,本病从9月份到次年4月份高发,这段时间气温     

番鸭细小病毒生物学特性的研究进展

番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(Muscovy Duck Parvovrus,MPV)引起的侵袭雏鸭为主的一种急性传染病,临床上以喘气、腹泻及胰脏坏死和出血为主要特征,发病率和死亡率可达40%~50%.     

鸭病毒性肝炎的诊治

１９９８年１２月上旬，某养鸭户自繁自养的２８００羽１５日龄番鸭突然发病，３天内死亡１７６羽。经诊治确诊为病毒性肝炎。现报告如下。１　发病情况　１９９８年１２月上旬，某养鸭户自繁自养３批雏番鸭７０００羽和５００羽种鸭均未进行病毒性肝炎疫苗免疫，第１批雏鸭２５日龄２２００羽，第２批雏鸭１５日龄２８００羽，第３批雏鸭５日龄时２０００羽。在第２批雏鸭中，３４０羽突然发病，用青霉素、庆大霉素、痢特灵等多种抗菌药治疗均无效，３天时间死亡１７６羽，病死率达５０．５％。第１批和第３批雏鸭正受到严重威胁，而种鸭正…     

鸭出血症病毒间接ELISA检测方法的建立与应用

为了建立快速检测鸭出血症病毒(DHDV)的血清学方法,本试验利用浓缩纯化的DHDV作为包被抗原,建立了检测DHDV血清抗体的间接ELISA方法,并对各种检测条件进行了优化。试验结果表明,抗原最佳稀释浓度为7.06 μg/孔;最佳包被条件为37 ℃ 1 h后,4 ℃包被过夜;待检血清的最佳稀释倍数为1:25。在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.44。建立的ELISA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、雏番鸭细小病毒和番鸭呼肠孤病毒阳性血清均无交叉反应,结果表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的最大变异系数分别为0.0221、0.0032,显示该方法具有很好的稳定性,与血清中和试验的符合率为100%。该方法快速、简单、特异性好、重复性好,可用于大批量监测鸭群DHDV血清抗体感染情况。     

半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析

通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV阳性。该毒株基因组全长为5 106bp,与GenBank登录的15株GPV基因组序列相似性为93.2%~98.1%,其中与SH株及疫苗株SYG61v株等的相似性较高,而与半番鸭源的GPV重组病毒M15株相似性最低。基于病毒VP1和NS1基因的遗传进化分析表明,分离毒株MDE与GPV疫苗毒株的亲缘关系最近,处于同一个独立的分支上,与番鸭细小病毒的亲缘关系较远。与疫苗毒株SYG61v株比较,MDE株VP1区的糖基化位点增加了703NRTS糖基化位点。以上结果表明,本研究揭示了GPV可通过半番鸭胚垂直传播给雏鸭,丰富了GPV的生态学内容。     

雏番鸭发生细小病毒病

<正>雏番鸭细小病毒病,又称"三周病",是一种由细小病毒引起的、仅发生于雏番鸭的高度接触传染性、急性、败血性传染病。易感禽主要为:3周龄以内的雏番鸭,以泻腹、呼吸困难、脚软、肠道严重炎症和高死亡率为特征。1发病状况邯郸县尚璧镇一农户饲养1500羽番鸭,从15日龄开始发病,以张嘴伸颈呼吸为特征,该病传播迅速,病鸭羽毛松乱,怕冷打堆,不爱活动,出现不同程度的腹泻,排出黄绿色、灰白色的水样粪便,随着病情发展,两脚发软,蹲伏。少数病     

番鸭细小病毒病实验室诊断方法的研究进展

番鸭细小病毒病由番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)引起,以1~3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性、高死亡率的病毒病。番鸭细小病毒病一般可根据临床症状和剖检病理变化及其流行病学等情况作出初步诊断。然而在染病番鸭表现出非典型症状时很容易与番鸭的鹅细小病毒感染、雏鸭病毒性肝炎等疾病混淆,容易误诊。因此,对该病的确诊主要依靠血清学或病原学等实验室诊断方法。文章从血清学和分子生物学诊断方法两个方面综合阐述了番鸭细小病毒检测方法的研究进展。