黄芪多糖佐剂对Ⅰ型鸭疫里氏杆菌灭活疫苗的作用研究

本研究以Ⅰ型鸭疫里氏杆菌武汉分离株为菌种,经复苏、增菌、浓缩、灭活后与黄芪多糖佐剂混合制成灭活疫苗。试验鸭在5日龄时按最佳免疫剂量（0.3 mL/只）注射疫苗,免疫后第3、7、10、14、21天的攻毒保护率分别为100%、90%、100%、100%、90%,免疫后第3天即能用琼脂扩散法在血清中检测出Ⅰ型鸭疫里氏杆菌特异性抗体,效价逐渐升高,至免疫后第10天达高峰（P<0.01）。试验结果表明,该灭活疫苗能有效预防鸭传染性浆膜炎。     

鸭疫里氏杆菌病四价灭活疫苗的研究

在全国流行病学调查的基础上，选择四川等地流行广泛的鸭疫里氏杆菌(RA)1、2、4和5血清型菌株制备铝胶佐剂四价灭活疫苗。对疫苗经无菌检验及安全检验合格后，给3日龄樱桃谷商品鸭每只颈背皮下注射0．5mL，第10、13和16d免疫鸭对同源RA的攻击分别表现出5％--20％、75％--90％和100％免疫保护力，第23—30d免疫保护力开始下降。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测，表明3日龄樱桃谷鸭首免后第23d抗体达到高峰，至93日龄时仍能检出抗体；10日龄时进行二免后可产生更高的抗体水平，到第65d时仍能保持较高抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著(P＜0．05)或极显著(P＜0．01)地增强其T细胞的免疫力，时间达2周。经攻毒保护试验、抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验，证明研制的鸭疫里氏杆菌病(RAI)四价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能有效预防RAI的发生。     

鸭源巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗的制备与免疫效果试验

本研究选取鸭致病性大肠埃希菌（E．coli）常见血清型O1、O2、O18、O78和3株分离自发病鸭场、毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌（Pasteurella multocida,P砌）D22、D23、D157作为制苗菌株,分别以鲜血琼脂和马丁琼脂进行固体表面培养制备的抗原与蜂胶佐剂高速乳化,制备鸭多杀性巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗。结果表明,疫苗安全可靠,雏鸭一免后第14天对同源E．coli、Pm攻击免疫保护率为100％和90％;雏鸭二次免疫后第14天的免疫保护率均为100％。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测,7日龄商品麻鸭首免后20d抗体达到高峰,抗体维持时间在54d以上;首免7d后进行二免,可产生显著高于一免的抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）地增强T细胞的免疫力,可维持3周左右。疫苗在4℃可保存12个月以上。     

鸭疫里氏杆菌蜂胶灭活疫苗的研制及临床应用

以从本地病番鸭群和樱桃谷鸭群中分离到的鸭疫里氏杆菌(RA),W-4和Z-3株为菌种,蜂胶为佐剂研制而成的鸭疫里氏杆菌蜂胶灭活疫苗,经无菌试验和安全性试验合格后,给6日龄雏鸭注射0.3mL/只,接种后10d用相应的2株强毒进行攻击,能获得80%以上的保护率,临床应用保护率在92%以上,疫苗经半年保存后,其物理性状仍均匀稳定。经临床应用证明它具有使用方便、安全、高效等特点。     

鸭传染性浆膜炎蜂胶疫苗研制

从重庆疫鸭中分离到2株细菌，经细菌形态学、生理生化指标鉴定，证明为鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA)。用改良的血清酵母肉汤进行培菌培养，将2菌株菌液混合（1：1，体积比），经甲醛灭活后加入蜂胶左剂，制成蜂胶灭活疫苗。用其免疫5－7日龄雏鸭，一免后7、10、15d皮下注射RA混合菌液攻毒（0．2mL/只）,平均保护率达66．67％；10d后二免，二免后7、10d攻毒（0．2mL／只）,平均保护率达94．47％。     

狂犬病灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

本文利用反向遗传操作系统拯救出狂犬病病毒的携带双G基因的HEP-dG株,选用铝佐剂、蜂胶和油乳剂制成3种狂犬病灭活疫苗,进行小鼠免疫试验.试验表明,油乳剂和蜂胶佐剂狂犬病灭活疫苗免疫组效价较高.蜂胶狂犬病灭活疫苗二次免疫产生的抗体水平明显高于首免,油乳剂狂犬病灭活疫苗首免抗体水平与蜂胶狂犬病灭活疫苗二免产生的抗体水平相当.携带双G基因的HEP-dG株具有良好的免疫原性,油乳剂是作为该狂犬病毒株的最适佐剂.     

鸭传染性浆膜炎灭活疫苗比较研究

将重庆地区分离鉴定的2株鸭疫里氏杆菌培养、灭活、加入佐剂制成蜂胶、氢氧化铝和油乳剂灭活疫苗，分别免疫5日龄雏鸭，结果表明疫苗是安全的，经一次免疫后10天的保护率分别是70%、50%、75%，15天后的免疫保护率分别是80%、75%、100%；经2次免疫后7天的保护率分别是100%、100%、89%，10天后的保护率均达到100%。     

鸭疫里氏杆菌病三价油乳剂灭活疫苗的研究

以1、2、10型鸭疫里氏杆菌（RA）分离株为菌种，研制鸭疫里氏杆菌病三价油乳剂灭活疫苗。经无菌及安全检验合格后，对6日龄樱桃谷雏鸭颈部皮下接种0.4mL／只,免疫后第10、14、21和35d分别用1、2、10型RA强毒株攻攻，第14d的攻毒保护率为91.7%-100%,35d攻毒保护率为66.6%-83.3%。田间试验结果表明，雏鸭5－7日龄免疫后至上市保护率可达95.0%-100%。     

泰山松花粉多糖对超强毒IBDV克隆化毒株的免疫增强效果

筛选了4株氨基酸序列差异显著的超强毒力传染性法氏囊病毒(vvIBDV)的细胞弱化毒株GXCL1-25、GXCL2-30、GXCL4-25、GXCL5-30制备活疫苗(加入泰山松花粉多糖为免疫佐剂,蜂胶佐剂作为对照),并分别对这些疫苗的免疫效果进行分析。分别测定4株病毒克隆株的TCID50,并分别制备相应的佐剂活疫苗进行接种试验。对4株病毒克隆分别设置无免疫佐剂疫苗接种组(A1、B1、C1、D1)、松花粉多糖佐剂疫苗接种组(A2、B2、C2、D2)、蜂胶佐剂疫苗接种组(A3、B3、C3、D3)及空白对照组(E)。每组接种SPF鸡50只,于14日龄首免,25日龄二免。分别于一免后0、3、7d和二免后3、10、17、24d采血,用ELISA方法检测血清抗体效价和IL-2分泌水平;28日龄与42日龄测定外周血淋巴细胞比率,28日龄每组剖杀5只测免疫器官指数;35日龄进行攻毒试验。结果显示,各试验组的抗体效价和IL-2水平均在35日龄时(二免后第10天)达到最高峰,但佐剂疫苗组与无佐剂疫苗组相比具有更高的IBDV抗体水平、更长的抗体维持时间长、更轻的法氏囊损伤,并且攻毒保护率均在90%以上;尤其松花粉多糖佐剂疫苗组的抗体效价、IL-2水平和淋巴细胞比率比其他组更高,且松花粉多糖为佐剂的GXCL4-25组免疫效果最好。结果表明,以泰山松花粉多糖为佐剂的IBDV细胞弱化活疫苗表现出良好的免疫原性和保护力。     

两种进口佐剂对绵羊肺炎支原体灭活疫苗免疫小鼠抗体水平影响的研究

为了筛选绵羊肺炎支原体(MO)灭活疫苗的佐剂,试验采用绵羊肺炎支原体新疆分离株扩大培养后得到灭活抗原,分别与两种不同佐剂ISA 201和ISA 206混合乳化制备灭活疫苗,再以不同剂量免疫健康成年小鼠,最后用MO间接血凝的方法分别测定二免后第7,14,21,28天血清抗体效价。结果表明:ISA 206佐剂疫苗0.3 m L剂量组在第14天抗体效价就达到较高水平,第21天后开始下降;ISA 206佐剂疫苗0.2 m L剂量组在二免后第14天抗体效价达到高峰(1∶128),且在第21天仍维持抗体高峰,第28天开始下降;ISA 201佐剂疫苗0.3 m L剂量组在二免疫后第14天抗体效价达到高峰,维持1周后开始下降;ISA 201佐剂疫苗0.2 m L组免疫应答较慢,在二免后第21天才达到最高抗体效价(1∶64)。说明ISA 206佐剂诱导产生MO抗体较快,维持时间长,优于ISA 201佐剂,可作为MO灭活疫苗的优选佐剂。     

鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】根据鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)血清1型、2型贵州流行株制备二价灭活疫苗,为鸭疫里氏杆菌病的防控及疫苗研制提供研究资料。【方法】以血清1型RA(RA-G06株)、血清2型RA(RA-HS01株)地方流行株为菌种,通过涂板法测定菌株生长曲线,利用改良寇氏法计算菌株对鸭的半数致死量(median lethal dose, LD₅₀),将2株菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后等比例混合,以卡波姆为佐剂制备二价灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行雏鸭免疫试验;通过检测免疫鸭血清中特异性抗体水平和攻毒保护试验评价疫苗的保护率,对攻毒试验鸭心脏、肝脏、脾脏和脑组织进行组织病理学观察。【结果】RA-G06株和RA-HS01株均在培养12 h时到达峰值,活菌数分别为2.1×10¹¹和3.3×10¹¹ CFU/mL,LD₅₀分别为1.44×10¹⁰和2.63×10⁸ CFU/mL;制备的疫苗安全性良...     

增免灵对SOD酶活性和鸭腺病毒HI抗体效价的影响

本研究应用中药复方增免灵(即黄连解毒汤加味)与鸭腺病毒蜂胶复合佐剂灭活疫苗配合使用,通过检测不同时间红细胞中的铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)的活HI抗体效价,结果表明该复方能极显著提高红细胞中超氧化物歧化酶的活性,P＜0.01;明显提高鸭腺病毒HI抗体效价.在第14天时显著高于对照组,P＜0.01,且二者具有一定的相关性.说明了增免灵不仅可作为抗氧化剂清除自由基,还可以作为免疫增强剂增强鸭腺病毒蜂胶复合佐剂灭活疫苗的免疫力.揭示了SOD酶与机体的免疫功能有关,其活性的强弱反映了机体免疫功能的好与坏.     

鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗的研究

为了更有效地控制鸭疫里氏杆菌病的流行,选择鸭疫里氏杆菌3个不同血清型流行菌株GXRA01、GXRA07和RAGX09制备油乳剂三价灭活疫苗。对疫苗进行免疫接种剂量试验、安全性检验、免疫效力检测以及保存期试验。结果表明,疫苗安全有效,每只雏鸭颈部皮下注射0.5 mL,能抵抗鸭疫里氏杆菌的攻击,免疫保护期为50 d,4℃~8℃疫苗保存期为6个月。研制的鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

乳酸杆菌DNA对鸡新城疫油苗和禽流感油苗免疫增强作用的研究

提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂，按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲，每组20只，分别于15日龄和28日龄进行新城疫（ND）组和禽流感（AV）组首免，再分别于首免台2周加强免疫，在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明，与对照组相比，试验各组抗体水平达到显著或极显著水平，可提高抗体水平2^0.16～2^2.67。说明，2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

新型H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸭、鹅及鸽免疫原性研究

本研究就反基因操作分子修饰致弱种毒株制备新型H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸭、鹅和鸽子的免疫原性进行了系统评估.结果表明该疫苗对水禽及鸽子具有良好免疫原性.根据实验结果,初步推荐该禽流感灭活疫苗对上述禽类的免疫程序,即鸭:2周龄0.5mL皮下注射,3月龄1.0mL肌肉注射二免,9月龄1.0mL肌肉注射三免;鹅:10日龄0.5 mL皮下注射,3～4周龄1.5 mL肌肉注射加强免疫,4月龄1.5 mL进行第3次免疫;鸽子:2周龄以0.3 mL首免,4周龄以0.5 mL加强免疫,6月龄以0.5 mL第3次免疫.     

乳酸杆菌肽聚糖对鸡新城疫油苗和禽流感油苗的免疫增强作用的研究

该试验提取2株乳酸杆菌L．casei zhang和MC2-1的肽聚糖作为佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用此2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫组和禽流感组首免,再分别于首免后2周加强免疫,在二免后的第7天与第14天检测血清抗体HI水平。结果表明,与对照组相比试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.33-2^2.50。随着细菌肽聚糖量的增加,各试验组在提高抗体水平上也增加。2株乳酸杆菌肽聚糖对鸡接种新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

A:L1型鸭源多杀性巴氏杆菌灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】制备鸭多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制贵州省鸭多杀性巴氏杆菌发生和流行。【方法】以实验室分离保存的A：L1型多杀性巴氏杆菌地方流行株为菌种,通过涂板法测定该菌株生长曲线,并采用改良寇氏法计算该菌株对鸭的半数致死量（median lethal dose,LD₅₀）,将该菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后分别制备白油佐剂灭活疫苗和卡波姆佐剂灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行免疫雏鸭试验;通过攻毒保护试验评价比较两种疫苗的保护率,并对攻毒试验鸭肝脏、肺脏、脾脏进行病理组织学观察。【结果】A：L1型多杀性巴氏杆菌疫苗株培养至18 h到达峰值,活菌数可达1.0×10¹⁰ CFU/mL;LD₅₀为5 CFU;制备的两种疫苗安全性良好;攻毒保护试验结果显示,一免后卡波姆佐剂灭活疫苗免疫保护率可达62.5%,高于白油佐剂灭活疫苗（50.0%）及商品灭活疫苗（50.0%）。二免后卡波姆佐剂灭活疫苗优势更为明显,免疫保护率可达87.5%,高于白油佐剂灭活疫苗（75.0%）及商品灭活疫苗（62.5%）。病理组织学结果显示,一免后卡波姆佐剂灭活疫苗能对肺脏提供较好的保护效果,二免后在肝脏、肺脏和脾脏的保护效果上,卡波姆佐剂灭活疫苗组优势明显。【结论】利用贵州地区流行的A：L1型菌株所制备的卡波姆佐剂灭活疫苗免疫效果明显,能对贵州地区多杀性巴氏杆菌病的防控起到重要作用。     

山东鸭疫里氏杆菌血清型鉴定及免疫防制

从山东部分鸭场分离到51株鸭疫里氏杆菌并用凝集试验进行了血清型鉴定,结果表明:山东存在鸭疫里氏杆菌的血清1型、2型、3型、7型、8型及血清未定型,其中血清1型和2型为主要血清型,占分离株的66.8%。将分离到的鸭疫里氏杆菌作成油佐剂多价灭活苗,其免疫效果显著。     

犬细小病毒细胞毒蜂胶佐剂灭活抗原对山羊的免疫效果研究

应用犬细小病毒(CPV)细胞毒,F81细胞系传代培养增殖病毒,以该细胞毒液经甲醛灭活后制备成蜂胶佐剂灭活抗原,用以免疫山羊,观察其免疫效果.结果显示,以5mL/只恒定剂量接种山羊,经4次连续免疫后CPV抗体水平整体较低,第28天测定HI效价在27(1∶3128),而以5mL/只递增剂量4次连续免疫山羊后,抗体水平整体较高,第28天测定,抗体HI效价在29(1∶512),较恒定剂量免疫组高2个滴度水平.结果表明,采用犬细小病毒细胞毒蜂胶佐剂灭活抗原高免山羊可获得高效价的特异性抗血清.     

鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法测定免疫鸭血清中坦布苏病毒和禽流感病毒抗体,比较不同佐剂疫苗对试验鸭的免疫效力。结果表明,以白油作为佐剂的灭活疫苗组免疫效果最好,抗体产生快、抗体水平优于其他各组,免疫2周后60%(6/10)血清样品HI抗体可达1∶8以上,80%血清样品呈TMUV抗体阳性,是制备鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗的理想佐剂。