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采用差速高心法纯化鸡源(NE_4株)和鸭源(JE_1株)EDSV后,一方面用酚—氯仿抽提法分别提取两种毒株的核酸,选取EcoR、BamH、I、Bgl I、Bgl、Ⅱ、Kpn、I、Pst I和Hind Ⅲ 7种限制性内切酶对两种毒株的核酸进行酶切图谱分析;另一方面利用SDS—PAGE技术对两种毒株进行多肽分析。酶切结果显示:鸡源株用上述7种酶酶切后分别产生4、4、6、8、5、9、10个片段,共计46个;鸭源株分别产生4、4、5、7、9、10、8个片段,共计47个。两者的酶切结果除EcoR I 的酶切片段数和酶切图形完全相同外其余均存在不同程度的差异。凝胶染色及染色凝胶扫描结果均显示:NE_4株有13条多肽,JE_1株有16条多肽,其中有8条多肽的分子量两者相同。Western Blotting结果显示:NE_4株和JE_1株均有 8条具有免疫原性的多肽,其中2条分子量两者差异明显,其余6条分子量相同。 相似文献
2.
以提取的血清1型鸭疫里氏杆菌(R.a)Jb2株的脂多糖作为包被抗原,成功地建立了一种检测1型R.a抗体的间接ELISA方法,特异性试验和重复性试验证明此方法的特异性高、重复性好。并比较了间接ELISA方法、间接血凝试验、玻片凝集试验和琼脂扩散试验对抗体检出的敏感性,结果表明间接ELISA方法最敏感,人工感染后的鸭第72小时即可检出血清抗体为阳性(3/4);其次是间接血凝试验,第96小时即可检出50%(2/4);玻片凝集试验在感染9天后才出现阳性(2/3);而琼扩试验在感染后11天仍为阴性反应。应用建立的间接ELISA方法,初步调查了南京地区鸭场此病的感染情况,发现所调查的13日龄以前雏鸭的阳性率为0,而21~35日龄鸭的阳性率为873%。 相似文献
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鸭疫里氏杆菌生长曲线的测定 总被引:4,自引:0,他引:4
采用P L琼脂平板涂布法 ,测定鸭疫里氏杆菌WJ4株 (血清 1型 )、FXb7株 (血清 2型 )在P L肉汤中静置培养和振荡培养情况下的生长曲线。结果表明 ,在P L肉汤中振荡培养时 ,WJ4株培养 10h达生长最高峰 ( 4 7× 10 1 0 CFU mL) ,FXb7株 11h活菌数最高达 ( 4 2× 10 1 0 CFU mL) ;在静置培养时 ,WJ4株培养 2 2h达最高峰 ( 1 8× 10 9CFU mL) ,FXb7株 2 3h可达最高峰 ( 1 3× 10 9CFU mL)。 相似文献
4.
间接ELISA检测鸭疫里氏杆菌抗体的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
以提取的血清1型鸭疫里氏杆菌(R.a)Jb2株的脂多糖作为包被抗原,成功地建立了一种检测1型R.a抗体的间接ELISA方法,特异性试验和重复性试验证明此方法的特异性高等重复性好,并比较了间接ELISA方法,间接血凝试验,玻片凝集试验和琼脂扩散试验对抗体检出敏感性,结果表明间接ELISA方法最敏感,人工感染后鸭第72小时即可检出血清抗体为阳性(3/4)其次是间接血凝试验,第96小时即可检出50%(2 相似文献
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鸭疫巴氏杆菌病研究进展 总被引:8,自引:1,他引:7
鸭疫巴氏杆菌病研究进展胡清海(江苏省家禽科学研究所扬州225003鸭疫巴氏杆菌(PasteurelaAnatipestifer,PA)病是家鸭、火鸡和多种禽类的一种接触感染性疾病。又称为新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合症、传染性浆膜炎和鸭疫雷摩氏菌病(Ri... 相似文献
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鸡贫血病毒VP1和VP2蛋白在家蚕中的联合表达 总被引:1,自引:0,他引:1
将鸡贫血病毒VP1和VP2基因分别克隆入转换载体pBacPAK8中,获得重组转移质粒pBac-vp1和pBac-vp2。以上两质粒分别与CvnⅠ酶切线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6DNA共转染家蚕细胞,通过蓝白斑筛选,纯化得到重组病毒Bm-vp1和Bm-vp2。PCR分析表明Vp1和Vp2基因已整合进杆状病毒基因组中。将Bm-vp1和Bm-vp2共感染5龄家蚕,通过表达产物免疫SPF鸡产生的抗血清与CAV感染的MDCC-MSB1细胞的间接荧光抗体分析,证明表达产物能诱导鸡产生相应的抗体。该研究表明,表达VP1和VP2蛋白的重组家蚕杆状病毒(recombinant BmNPV)是很有前途的CAV亚单位疫苗的生产系统。 相似文献
8.
应用PCR技术检测鸭疫里默氏杆菌的研究 总被引:25,自引:1,他引:24
根据已发表的鸭疫里默氏杆菌15型CVL110/89株编码42-kDa主要外膜蛋白的基因序列设计并合成一对引物,建立PCR方法,对7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌及野外病死鸭病科组织进行检测。结果表明,7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌DNA都可扩增出809bp的DNA片段,而对照的2株大肠杆菌和1株沙门氏菌纯培养物DNA扩增结果为阴性;在对24只不同鸭场病死鸭肝、脑的检测中,脑的检出率为19/24(高于细菌分离的13/24),肝脏的检出率为11/24(高于细菌分离的8/24)。由此可见,建立的PCR技术可用于鸭疫里默氏杆菌的鉴定和快速诊断(取脑组织)。但此方法是否对其他血清型的鸭疫里默氏杆菌也适用,有待于收集这些血清型的菌株进行验证。 相似文献
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江苏安徽两省鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查研究 总被引:10,自引:1,他引:9
1996年1月至2001年6月,对江苏、安徽两省86个鸭场的发病鸭从日龄、品种、流行季节、流行菌株的血清型以及血清流行病学等方面进行了鸭疫里默氏杆菌病的调查。结果,在57个鸭场的樱桃谷鸭、番鸭及野鸭体内分离到鸭疫里默氏杆菌92株,而从麻鸭的病料中未分离到该菌;分离到病原的鸭最小为12日龄,最大为41日龄,主要集中在12-30日龄;这些地区鸭疫里默氏杆菌病的流行无明显季节性;这些地区鸭场疫里默氏杆菌流行菌株的血清型至少有5个,其中1、2和10是流行株的主型。 相似文献