新型佐剂狂犬病灭活疫苗的研制

利用反向遗传操作系统拯救出狂犬病毒的携带双G基因的HEP-dG株,选用新型佐剂制成狂犬病灭活疫苗,进行小鼠免疫试验、比格犬最小免疫剂量试验、免疫持续期试验。试验表明,携带双G基因的HEP-dG株具有良好的免疫原性,该新型佐剂狂犬病灭活疫苗免疫效果较好,具有完全的保护力和较长的免疫保护持续期。     

乳酸杆菌肽聚糖对鸡新城疫油苗和禽流感油苗的免疫增强作用的研究

该试验提取2株乳酸杆菌L．casei zhang和MC2-1的肽聚糖作为佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用此2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫组和禽流感组首免,再分别于首免后2周加强免疫,在二免后的第7天与第14天检测血清抗体HI水平。结果表明,与对照组相比试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.33-2^2.50。随着细菌肽聚糖量的增加,各试验组在提高抗体水平上也增加。2株乳酸杆菌肽聚糖对鸡接种新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

乳酸杆菌DNA对鸡新城疫油苗和禽流感油苗免疫增强作用的研究

提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂，按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲，每组20只，分别于15日龄和28日龄进行新城疫（ND）组和禽流感（AV）组首免，再分别于首免台2周加强免疫，在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明，与对照组相比，试验各组抗体水平达到显著或极显著水平，可提高抗体水平2^0.16～2^2.67。说明，2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

小鹅瘟蜂胶灭活疫苗的研究

以蜂胶为佐剂制备小鹅瘟蜂胶佐剂灭活苗,将病毒液灭活后按一定比例加入蜂胶佐剂制备疫苗,并进行疫苗安全性、免疫持续期、效力对比、保存期及区域应用试验,结果表明小鹅瘟蜂胶灭活疫苗安全性好,第5天即产生抗体且抗体持续时间长（90d）,免疫效果远好于油乳剂灭活苗,推广试验也取得了令人满意的结果。     

纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。     

复合多糖对鸭疫里氏杆菌疫苗免疫效果的影响

将复合多糖与免疫效果较好的蜂胶分别作为佐剂,设定不同的浓度制备鸭疫里氏杆菌参考株RA2F2与本地分离株YM1、YM2的三联灭活疫苗,首免后第7天开始采集试验鸭鲜血制备血清,每隔4～5d采用试管凝集反应监测其抗体滴度,比较各试验组的免疫效果。结果表明:高浓度(10g/mL)复合多糖佐剂及多糖蜂胶复合佐剂于首免疫后的第11天抗体效价均达到1∶40;多糖蜂胶复合佐剂最高效价于免疫后的第19天达到1∶160,一直维持较高水平,适合作为制备鸭疫里氏杆菌多联灭活疫苗的佐剂,其最适添加比例是15mg/mL,其中蜂胶与复合多糖的比例是1∶2;本研究同时也表明于3～5日龄首免、10～12日龄加强免疫一次是预防鸭疫里氏杆菌病发生的较好免疫程序。     

不同剂型新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平对比试验

不同剂型的佐剂对疫苗的免疫效果有较大的影响,本试验旨在对比不同剂型佐剂的新城疫-禽流感(简称"新-流")二联灭活疫苗的免疫效果,从而为生产上选择最佳剂型佐剂应用于新城疫-禽流流感二联灭活疫苗提供依据。分别将油包水型、水包油型、水包油包水型佐剂与新城疫及禽流感灭活抗原乳化成不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗,将这三种不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗分别免疫一组7日龄SPF鸡。每羽颈部皮下注射0.2 m L,同时设一组未免7日龄SPF鸡作为对照组,各免疫组与对照组SPF鸡于免疫组免后6、10、15、21、28、35 d进行采血,检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:免疫油包水型疫苗组SPF鸡免疫后新城疫与禽流感抗体上升最快,在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最高,其次是免疫水包油包水型的,而免疫水包油型疫苗组的SPF鸡新城疫与禽流感抗体上升最慢,而且在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最低。此外,从各免疫组可以看出,在免后6 d时新城疫抗体已开始产生,在1log2以下,而禽流感抗体仍未产生。可见免疫新-流二联苗后,新城疫抗体比禽流感抗体更早产生,油包水型新-流二联苗的免后抗体高于水包油包水及水包油型,而且能持续刺激机体产生高水平抗体,更具优势。     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的免疫效果研究

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍,仔猪呼吸系统症状和高死亡率为特征的传染病.本研究用PRRSV SY株和美洲型代表株VR2332制备成油乳剂灭活疫苗,同时选用2种商品化PRRS油乳剂灭活疫苗(CH-1a株和SD1株),在曾发生过PRRS流行的某猪场进行4种疫苗的免疫试验.使用美国IDEXX公司的试剂盒检测血清中的PRRSV抗体效价,并用XCHeK软件系统处理数据.免疫试验结果显示,一免后第6组(CH1-a株)产生的抗体效价较其它组高;第3组和第4组(VR2332株)在二免后抗体效价较一免有小幅升高.对免疫试验的结果分析显示,接种灭活疫苗后抗体效价未达到预期的水平,其中具体的影响因素或工艺问题尚需要进一步探讨.此外,IDEXX公司的PRRSV试剂盒不能区分野毒抗体和疫苗毒抗体,这也可能是影响测定实际抗体效价的凶素之一.     

家禽主要疫病免疫技术(三)

大肠杆菌病目前只有大肠杆菌灭活疫苗。最好应用标准株加现地株的“现地自家多价灭活疫苗”,并且注意随时跟踪现地致病菌株的动态变化以便适时针锋相对,保证疫苗的“动态对型”预防。疫苗种类依佐剂的不同大体分为四类:铝胶佐剂灭活疫苗、蜂胶佐剂灭活疫苗、蜂胶中草药佐剂灭活疫苗、油佐剂灭活疫苗,以后二者效果最好。一般七日龄以上鸡均可应用,皮下或肌肉注射。禽霍乱分为灭活疫苗与弱毒活菌苗两大类,还有联苗和亚单位疫苗。1.灭活疫苗:共有“铝胶、油乳剂、蜂胶”3种佐剂类型,以蜂胶佐剂灭活苗保护率最高(80%以上)、免疫期最长(半年);铝…     

三种佐剂对奶山羊乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响

为筛选奶山羊乳房炎灭活疫苗的有效佐剂,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后第10天采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计隐性乳房炎检出率。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P0.05);3个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。