鸡新城疫基础低抗体与基础高抗体免疫效果研究

鸡新城疫(ND)是由副粘病毒属的新城疫病毒(NDV)引起的一种严重危害养鸡生产的烈性传染病.鸡新城疫微量血清凝集抑制试验(微量HI试验)结果与鸡对NDV的抵抗力有正相关性,目前大都使用微量HI试验测定鸡血清中ND抗体水平.     

两种血凝抑制试验检测鸡新城疫病毒抗体效价结果的比较分析

用常量法和微量法血凝抑制(HI)试验检测了130份鸡血清样本中的鸡新城疫病毒(NDV)抗体效价,经统计学方法分析表明,用两种方法测得的抗体效价差异不显著(P>0.05)。     

用改良的单向辐射溶血技术测定新城疫毒的抗体

单向辐射溶血(SRH)技术已经应用于流感、风疹和披盖病毒等抗体的检测(Schild等1975;Russell等1975、1978;Gee等1978;Odelola 1979)。SRH试验与血凝抑制(HI)试验对风疹抗体的检测结果指出,前者特异性强,敏感度高(Capmer等,1979)。另外,进行SRH试验时,不需要对试验血清作处理,以去除其非特异性的因素。本文报导了一个改良的SRH试验及其在测定新城疫病毒(NDV)抗体中的应用。     

鸡新城痘基础低抗体与基础高抗体兔痘效果研究

鸡新城疫（ND）是由副粘病毒属的新城疫病毒（NDV）引起的一种严重危害养鸡生产的烈性传染病。鸡新城疫微量血清凝集抑制试验（微量HI试验）结果与鸡对NDV的抵抗力有正相关性，目前大都使用微量HI试验测定鸡血清中ND抗体水平。     

麻鸭感染新城疫病毒HI抗体效价的比较研究

以 NDV 强毒,弱毒分别感染麻鸭,30天后检测其血清 HI 抗体水平、并与自然感染 NDV 动物、对照组动物血清 HI 抗体水平作比较;强毒感染动物血清与其所产蛋卵黄上清 HI 抗体水平作比较.结果表明.麻鸭群为 NDV 野毒感染;鸭群血清 HI 抗体水平检涮,以50%以上检样出现7(log_2)以上的 HI 效价,可作为鸭群已受 NDV 野毒感染的标志;鸭卵黄不宜替代鸭血清作 NDV HI 抗体检测.     

不同ND抗体水平鸵鸟对NDV强毒的抵抗力试验

以不同新城疫（ND）HI抗体水平的5只鸵鸟进行新城疫病毒（NDV）感染试验，HI抗体效价(Log2)和3Log2以内的3只鸵鸟均表现ND的的典型症状的病变，4Log2的鸵鸟耐过NDV的侵袭，5Log2的鸵鸟未表现任何症状。这表明当鸵鸟的ND HI抗原体水平≤4Log2时应及时接种ND疫苗。     

用HN亚单位疫苗预防ND

用含有表达NDV HN的重组杆状病毒的汕乳剂苗接种小鸡,可产生血凝抑制反应(HI)和抗NDV的中和抗体。用活的重组病毒接种较用经β—丙内酯灭活的组重病毒接种所获得的HI抗体滴度要高,但较存活的或β—丙内酯灭活的NDVB_1株的HN浓缩     

间接ELISA法检测鸡新城疫抗体

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫 ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释检测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.941 28 x 0.206 77,r=0.981 63,可用于定量测定.血凝抑制(HI)方法与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法的敏感性是HI方法的3倍以上.应用建立的ELISA方法比较了卵黄、气管及胆汁中局部抗体与血清抗体的差异.     

鸡传染性支气管炎病毒与新城疫病毒增殖作用及免疫干扰的研究

试验旨在观察鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）和鸡新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）之间的增殖干扰现象,分析在免疫过程中两种疫苗存在的免疫干扰,为确定疫苗的免疫程序提供依据。采用完全随机试验设计,选取10日龄鸡胚尿囊腔接种不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV,收集尿囊液测定其血凝效价（HA）;用不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV分别免疫BALB/c小鼠及SPF雏鸡,收集血清,间接酶联免疫吸附法（ELISA）和血凝抑制（HI）试验测定IBV和NDV的抗体效价及抑制效价。结果表明,同胚培养时,无论先接种IBV后接种NDV还是先接种NDV后接种IBV或IBV和NDV同时接种,IBV对NDV均有干扰作用,而NDV对IBV没有干扰作用;接种IBV和NDV的小鼠,其产生IBV和NDV的抗体效价均低于单独免疫组,免疫的次序及免疫间隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用。不同针混合免疫方式能提高IBV和NDV的抗体效价;接种IBV和NDV的雏鸡,免疫次序及免疫相隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用;雏鸡和小鼠免疫血清HI试验数据表明,免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但对NDV抗体的产生影响更明显,随着免疫间隔时间的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势,雏鸡比小鼠更能敏感地反映出IBV对NDV的免疫干扰作用。混合注射时IBV和NDV的抗体水平均降低,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。因此,在同胚培养、小鼠及雏鸡的免疫中,IBV对NDV有干扰作用,而NDV对IBV无干扰作用。混合接种时IBV和NDV抗体效价均下降,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但随着免疫间隔的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势。     

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗最小免疫剂量试验

将ND-AI(H9亚型)二联苗分别以1.0、0.5、0.2、0.1、0.05、0.02 mL 6个不同剂量免疫5周龄SPF鸡,免疫后3周采血测NDV及AIV 的HI抗体,并用H9亚型AIV及NDV F48株攻击.结果表明,这6个免疫组鸡的NDV HI抗体几何平均效价分别为2 10、2 8.8、2 8.5、2 7.0、2 6.1、2 5.7;AIV HI抗体水平分别为2 9.3、2 8.4、2 7.7、2 5.7、2 5.1、2 2.8;对照组鸡的NDV及AIV HI抗体均为零.攻毒试验证实,以0.1～1.0 mL剂量免疫鸡获得了100%的抵抗NDV及AIV强毒攻击的保护力;0.02 mL和 0.05 mL的免疫剂量也可使其对NDV与AIV的保护率达到90%～100%.     

免疫不同的IBD中等毒力活疫苗对ND(LaSota)疫苗体液免疫应答影响

维扬麻鸡150只分为5组(即Ⅰ-Ⅴ组).其中I、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,对应用市售的A、B、C三种lBD中等毒力活疫苗进行两次免疫接种,Ⅳ组为ND免疫对照组,Ⅴ组为空白对照组,在IBD活疫苗二免后定期监测鸡群免疫ND(LaSota)疫苗后的HI抗体消长情况,以评价这3种IBD活疫苗对NDHI抗体产生的影响程度。结果发现,I组(免疫A疫苗)对NDV的HI抗体水平的影响最大,Ⅱ组(免疫B疫苗)对NDV的HI抗体水平的影响次之,Ⅲ组(免疫C疫苗)对NDV HI抗体水平的影响轻微。     

间接ELISA和HI方法检测鸡新城疫病毒抗体的相关性分析

分别采用商品化的酶联免疫吸附试验（ELISA）抗体检测试剂盒和血凝抑制（HI）试验方法对152份临床血清样本和标准阴阳性血清进行新城疫病毒（NDV）抗体检测。比较间接ELISA和HI两种方法的相关性。研究结果表明，间接ELISA和HI两种方法呈显著相关，二者间的相关系数为0．9261：间接ELISA和HI两种方法检测NDV抗体的阳性符合率为96．8％，阴性符合率为92．9％，间接ELISA方法是一种敏感、特异、快速的血清学诊断方法，可以用于临床样本的大规模检测．     

新疆青格达湖湿地鸟类中H5、H7亚型AIV和NDV流行病学监测

为了解新疆青格达湖湿地野鸟携带禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)情况,对青格达湖湿地鸟类进行了血样和喉肛棉拭子、组织、粪便样品采集。采用RT-PCR试验对喉肛棉拭子、组织、粪便样品进行了病原学检测,采用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验进行禽流感和新城疫血清抗体的检测,结果均为阴性。结果表明:所检测的样品并未携带AIV(H5、H7亚型)和NDV。     

NDV和H9亚型AIV在血凝抑制及混合病毒在鸡胚增殖中的相互干扰

先测定NDV强、弱毒毒株和H9AIV毒株的血凝(HA)效价,并用血清分别作血凝抑制(HI)试验。将测定好的病毒液按不同比例混合,测定HA效价及血清对其抑制效价后接种SPF鸡胚。收获死胚尿囊液后测定HA、HI效价。结果显示,H9AIV和NDV之间存在比较严重的干扰现象。     

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗免疫效力试验

为评价鸡新城疫和禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗(以下简称"二联苗")对SPF鸡的免疫保护效力,进行了血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护相关性的研究及免疫持续期试验。不同抗体水平的SPF鸡攻毒试验结果表明,当NDV HI≥5.0log2,AIV HI≥6.0log2时,分别攻击NDV、AIV,试验鸡的保护率均达到100%;免疫期试验结果表明,二联苗以0.3mL和0.5mL的剂量分别免疫SPF鸡,免疫接种后各试验组鸡均产生较高的HI抗体,其免疫期分别能持续18周和36周。表明二联苗对试验鸡有较好的保护效果。     

新城疫-禽流感(H9亚型)-禽腺病毒病(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估新城疫-禽流感(H9亚型)-禽腺病毒病(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗的免疫效力,采用该疫苗分别免疫7、14、21日龄的SPF雏鸡和商品雏鸡,免疫后21 d采血测定新城疫病毒(NDV)HI、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)HI及禽腺病毒(FAdV)中和抗体,并用禽腺病毒(Ⅰ群,4型)强毒攻击。结果显示:免疫后各不同日龄免疫组SPF雏鸡的NDV HI、H9 AIV HI及FAdV中和抗体效价分别为8.2 log_2～8.5 log_2、8.8 log_2～9.6 log_2和9.7 log_2～10.3 log_2,FAdV攻毒保护率均达到100%(10/10);21日龄SPF鸡免疫后3个月,试验鸡NDV HI、H9 AIV HI及FAdV中和抗体分别达7.2 log_2、7.8 log_2和11.3 log_2,FAdV攻毒保护率均为100%(10/10);不同日龄免疫组普通雏鸡NDV HI、H9 AIV HI及FAdV中和抗体效价分别为6.7 log_2～7.6 log_2、7.9 log_2～8.7 log_2和9.8 log_2～10.3 log_2,FAdV攻毒保护率均达到100%(10/10)。表明该疫苗可对不同日龄SPF雏鸡和商品雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡免疫持续期达3个月。     

单一血清稀释度ELISA定量检测鸡新城疫抗体水平的研究

建立了—种以单一血清稀释度定量检测鸡血清中 NDV抗体的间接 ELISA 方法,经试验得出回归方程 LnET=5.878 0.537P/N。该方法特异性强,能被 NDV 单抗所特异性阻断,比 HI 方法敏感。通过对 SPF 鸡等进行的不同疫苗免疫前、后抗体动态测定表明,ET 值与 HI 值之间呈一定的相关性(r=0.8702),强毒攻击试验表明,ET值>4000时鸡群能得以保护,装配成的商品试剂盒保存期长达6个月.     

中药提取物和盐酸左旋咪唑免疫调节作用的研究

本研究分别在临床健康鸡和在1日龄使用免疫抑制剂环磷酰胺(CY)诱发了免疫抑制状态的鸡,测试了中药制剂和盐酸左旋咪唑对鸡的免疫调节作用。结果表明,在饮水中添加50ppm的盐酸左旋咪唑(Lev),无论在健康鸡还是免疫抑制鸡对鸡新城疫病毒(NDV)、H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)灭活疫苗免疫后的血凝抑制(HI)抗体水平都没有明显影响(P0.05);由黄芪、当归、白术、甘草组成的提取物对NDV和H5-AIV免疫后的HI抗体水平也没有明显影响(P0.05),但是在CY诱发了免疫抑制的鸡,该中药浸出物可显著提高对NDV、H5-AIV的HI抗体滴度(P0.01)。该研究表明,由黄芪、当归、白术和甘草组成的提取物对CY诱发的免疫抑制状态下的鸡有显著的免疫调节作用,盐酸左旋咪唑没有免疫调节作用。     

依据血凝抑制抗体水平的消长情况制定合理的鸡新城疫免疫程序

<正> 制定合理的鸡新城疫免疫程序,是预防鸡新城疫的重要关键之一。我场虽然建立了对鸡ND(鸡新城疫)的监测制度,但对NDV(新城疫病毒)的HI抗体(血凝抑制抗体)水平与保护力之间的关系尚不清楚,故难以确定首次免疫应在母源抗体下降到何时进行     

新城疫病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用

为建立一种快速的新城疫病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组HN蛋白作为诊断抗原,建立了检测新城疫病毒抗体的间接ELISA诊断方法.该方法检测AIV(H9亚型)、IBV、IBDV、EDSV 4种常见禽病病原的阳性血清均为阴性;检测灵敏度为1:12 800;批内重复性试验、批间重复性试验的变异系数分别小于5％和10％;与血凝抑制试验(HI)符合率为96.1％.本研究建立的NDV HN间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,为NDV的抗体检测及流行病学调查等快速诊断提供一种技术手段.