阿魏倍半萜类对感染幼兔不同发育阶段血吸虫的影响

观察阿魏倍半萜类对感染幼兔体内不同发育阶段日本血吸虫童虫与成虫的影响,采用定量日本血吸虫尾蚴感染幼兔,分别在感染后2 h,1、2、6、11、13、15、24、36 d和41 d,按500 mg/kg灌胃给药阿魏倍半萜类,1次/d,4周后解剖幼兔,门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果显示,阿魏倍半萜类对1、2、6、11、13、15、24、36、41日龄童虫或成虫的减虫率分别为15.8%、17.0%、60.2%、50.2%、36.9%、31.3%、45.3%、57.0%、25.2%,其中以6-36日龄虫对该药最敏感。结果表明,阿魏倍半萜类对幼兔体内日本血吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对6-36日龄虫体杀灭效果更为显著。     

阿魏倍半萜类药物对家鸭毛毕属吸虫作用的研究

为了观察家鸭体内不同发育阶段毛毕属吸虫童虫与成虫对阿魏倍半萜类药物的敏感性,试验以（45±1）条毛毕属吸虫尾蚴感染家鸭,于感染后2小时和1,3,7,12,14,25,35,42天分别一次性灌服500 mg/kg阿魏倍半萜类药物。给药后4周解剖家鸭,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果表明：阿魏倍半萜类药物对1,3,7,12,14,25,35,42日龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、45.3%、58.0%、26.4%,其中7-35日龄毛毕属吸虫对阿魏倍半萜类药物最敏感。说明阿魏倍半萜类药物对家鸭体内毛毕属吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对7-35日龄毛毕属吸虫杀灭效果更为明显。     

阿魏倍半萜类药物对家鸭毛毕属吸虫作用的研究

为了观察家鸭体内不同发育阶段毛毕属吸虫童虫与成虫对阿魏倍半萜类药物的敏感性,试验以(45±1)条毛毕属吸虫尾蚴感染家鸭,于感染后2小时和1,3,7,12,14,25,35,42天分别一次性灌服500 mg/kg阿魏倍半萜类药物。给药后4周解剖家鸭,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果表明:阿魏倍半萜类药物对1,3,7,12,14,25,35,42日龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、45.3%、58.0%、26.4%,其中7~35日龄毛毕属吸虫对阿魏倍半萜类药物最敏感。说明阿魏倍半萜类药物对家鸭体内毛毕属吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对7~35日龄毛毕属吸虫杀灭效果更为明显。     

吡喹酮对雏鸭体内毛毕属吸虫作用的观察

观察雏鸭体内不同发育阶段毛毕属吸虫童虫与成虫对吡喹酮的敏感性。用定量毛毕吸虫尾蚴感染雏鸭,感染2h,1、3、7、12、14、16、25、35d和42d分别一次性灌服500mg/kg吡喹酮。给药后4周解剖雏鸭,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果显示,吡喹酮对1、3、7、12、14、16、25、35、42日龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、31.3%、45.3%、58.0%、26.4%,其中以7~35日龄虫对该药最敏感,该结果表明,吡喹酮对雏鸭体内毛毕吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对7~35日龄虫体杀灭效果更为明显。     

阿魏倍半萜类对血吸虫童虫酶活性的影响

小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第6天起灌服阿魏倍半萜类300 mg(/kg.次),每周1次,共4次。于每次给药后的第3、5天收集童虫,制成匀浆,作薄层凝胶电泳,胶中有关同工酶经底物显色,作酶活性定性观察。另设相应时间的不给药对照组。结果显示,该药对苹果酸脱氢酶、6-磷酸甘露糖酶I、酸性磷酸酶有明显抑制作用,对磷酸葡萄糖异构酶的活性影响不明显。该结果表明,阿魏倍半萜类对血吸虫童虫的能量代谢以及对红细胞的消化有抑制作用。     

羊角拗甙对家鸭包氏毛毕吸虫的影响

为了观察羊角拗甙类对不同发育阶段的家鸭毛毕吸虫的影响,采用羊角拗的水提取液配制成不同浓度的羊角拗甙类溶液定量喂服感染了毛毕吸虫尾蚴的雏鸭,再采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果显示,羊角拗甙类对1~42日龄感染雏鸭的平均减虫率与对照组比较差异显著性(P0.05);尤其7~35d感染雏鸭减虫率与对照组比较差异极显著性(P0.01)。该结果表明,羊角拗甙类对感染雏鸭体内的不同发育阶段毛毕吸虫均有明显的杀灭作用。     

羊角拗苷对家鸭包氏毛毕吸虫的影响

为了观察羊角拗苷类对不同发育阶段家鸭毛毕吸虫的影响,采用羊角拗水提取液制成不同浓度的羊角拗苷溶液定量喂服感染包氏毛毕吸虫尾蚴雏鸭,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果显示,羊角拗苷类对1-42日龄感染包氏毛毕吸虫雏鸭的平均减虫率与对照组比较差异显著（P〈0.05）;尤其7-35 d感染雏鸭减虫率与对照组比较差异极显著（P〈0.01）。该结果表明,羊角拗苷类对感染雏鸭体内不同发育阶段的毛毕吸虫均有明显的杀灭作用。     

不同剂量新疆阿魏对血吸虫活性的影响

为了探讨新疆阿魏杀灭血吸虫的功效,分别用新疆阿魏蒸馏萃取物以0.1、0.2、0.3、0.4 g/kg浓度药液灌服治疗感染血吸虫病家兔,每隔3 d灌服1次,4次后停止给药,4周后剖检,门静脉灌注法收集虫体、计算减虫率,并以组织切片检查该药对血吸虫感染兔肝脏的治疗作用。结果显示,减虫率分别为12.30%、17.20%、46.40%、40.80%;经组织切片观察,家兔肝脏肉芽肿明显减小。表明新疆阿魏具有很强的杀灭血吸虫活性的作用,最佳杀虫剂量为0.3 g/kg。     

日本血吸虫7d童虫cDNA文库构建及免疫筛选

为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×10~6 pfu/mL,扩增后滴度为1.6×10~9 pfu/mL,利用感染日本血吸虫10 d和42 d的小鼠血清免疫筛选该文库,初筛和复筛后获得17条有效EST序列,其编码7个基因,分别为复制蛋白(2 ESTs)、肝再生增强因子(3 ESTs)、血小板活化因子(6 ESTs)、钙调理蛋白基因(3 EST)、丝束蛋白(1 ESTs)、核糖体RNA(1 EST)和还原型辅酶脱氢酶基因(1 EST)。该研究结果对今后探讨血吸虫的生长发育机制及筛选血吸虫早期诊断抗原具有重要意义。     

日本血吸虫信号转导蛋白sjwnt10a基因的克隆及其在童虫和成虫中mRNA表达量的变化

利用RACE技术从19日龄的日本血吸虫童虫中扩增了1个Wnt家族基因，并对其进行了生物信息学分析。同源性分析表明，该基因为日本血吸虫新基因，完整开放阅读框（ORF）长1896bp，编码631个氨基酸，理论分子质量为73．3ku。该基因编码的氨基酸序列具有wnt家族蛋白的典型特征，与人、鼠Wnt10a的氨基酸序列同源性均为26％，推测为血吸虫的Wnt10a基因，命名为Sjwnt10a（GenBanK登录号DQ643829）。利用实时荧光定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达情况，结果显示该基因在19日龄的日本血吸虫童虫中表达量最高，在14日龄童虫和44日龄雄虫中也有表达，但分别仅为19日龄童虫表达量的8．8％和5．0％，而在31日龄成虫和44日龄雌虫中没有检测到该基因。结果提示，童虫差异表达的Sjwnt10a基因可能对童虫的生长、发育至关重要。     

日本血吸虫非叉型尾蚴感染动物试验

试验采集云南巍山地区自然条件下的钉螺,压碎钉螺、检获尾蚴,发现为非叉型尾蚴。将非叉型尾蚴400~850条/只经皮肤感染家兔,同时,用云南洱源的叉型尾蚴作对照试验。感染后50～55 d解剖兔子,试验组检获到日本血吸虫,荷虫量为10～15条/只。试验结果表明,云南巍山非叉型尾蚴能感染动物,该试验结果为丰富日本血吸虫的生活史提供了极有价值的补充。     

Experimental infection of rhesus monkeys with Schistosoma incognitum and Orientobilharzia dattai

Rhesus monkeys inoculated subcutaneously with 800-2500 cercariae of Schistosoma incognitum did not yield adult worms. Percutaneous exposures, however, resulted in the presence of adult flukes 21-35 days post infection. The infection became very mild (0-4 flukes) 45-100 days after exposure and no eggs were excreted. Monkeys percutaneously exposed to cercariae of Orientobilharzia dattai and treated with prednisolone yielded a very small number of flukes 22 days after exposure while non treated controls yielded no adult worms.     

Effect of Ferulic Sesquiterpene Compounds on Enzyme Activity of Schistosomulum

[Objective] The paper was clear the effects of ferulic sesquiterpene compounds on enzyme activity of schistosomulum.[Method]Mice infected with schistosome cercariae were orally administrated with ferulic sesquiterpene compounds at the dose of 300 mg/kg on the 6 thday post infection once a week for 4 weeks.Schistosomula were collected and ground into homogenate on the 3 rdand 5 thday after every time of administration.Thin layer starch gel electrophoresis was used to observe the activity of enzymes in the homogenate.Control group was also designed(drug free mice).[Result] The activities of malic dehydrogenase,6-phophate mannosease and acid phosphatase were obviously inhibited in the drug group,but the activity of phosphoglucoisomerase was not inhibited.[Conclusion] Ferulic sesquiterpene compounds have inhibitory effect on energy metabolism of schistosomulum and digestion of red blood cells.     

日本血吸虫基因重组抗原rSj06868对小鼠的免疫保护效果

为克隆、表达日本血吸虫假想蛋白SJCHGC068068编码基因（暂命名为Sj06868）并观察重组抗原的免疫预防效果。应用PCR技术从日本血吸虫7 d童虫、14 d童虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆到Sj06868基因的46-438 bp DNA片段,BLASTn分析未发现其他物种中的同源性序列,也未发现其保守序列和相关功能结构域。以pET32a为表达载体、Sj06868基因在大肠杆菌Rosetta（DE3）中获得高效表达,表达产物rSj068068分子量为36 kDa,能被感染血吸虫14 d兔血清识别。将纯化的重组抗原与佐剂ESSAI ISA 206 CELL混合后免疫BALB/c小鼠,与佐剂对照组和PBS对照组相比,分别获得了31.63%、29.19%减虫率以及55.63%、56.27%肝脏虫卵减少率。用ELISA检测各组血清中抗rSj068068特异性抗体结果显示,免疫组在攻击感染前、佐剂对照组和PBS对照组在感染后均产生了较高水平的特异性抗体。本研究结果说明,Sj068068是日本血吸虫特有的童虫期高表达基因,rSj068068在抗血吸虫疫苗和血吸虫感染的诊断方面均有潜在应用价值。     

东方田鼠感染日本血吸虫前后血常规和血清生化指标的动态变化

东方田鼠具有天然抗日本血吸虫病特征,为了探索东方田鼠抗日本血吸虫机制,本研究分析了东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫尾蚴前后血液细胞以及生化指标的动态变化。东方田鼠和BALB/c鼠定量感染日本血吸虫尾蚴,于感染后第0、1、3、5、8、12、16、21、28、35、42 d分别采集抗凝血和血清,进行血常规和血清生化分析。血常规检测结果表明,东方田鼠感染后第3~16 d,WBC数量显著升高(Neu数量显著升高),而小鼠血常规检测结果正常;血清生化结果显示,东方田鼠感染日本血吸虫后ALB、HDL-C显著升高,小鼠各指标变化不明显。本研究结果显示东方田鼠天然免疫细胞Neu和血清ALB可能与其抗日本血吸虫特性相关,对补体杀伤日本血吸虫机制研究具有重要的指导意义。     

东方田鼠肺脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

目的寻找与东方田鼠抗性相关的血吸虫靶基因。方法以东方田鼠肺脏裂解物为探针,亲和淘洗筛选日本血吸虫成虫（44d）噬菌体展示cDNA文库。三轮筛选后．随机挑取76个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析。结果共获得了13个有效EST序列,其中8条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,5个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。功能预测结果显示．这13个有效EST编码蛋白主要与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。结论东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达,进而影响血吸虫的发育,可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。     

Characterization of a novel vaccine candidate and serine proteinase inhibitor from Schistosoma japonicum (Sj serpin)

Serine proteinase inhibitors (serpins) represent an important superfamily of endogenous inhibitors that regulate proteolytic events active in a variety of physiological functions. Immunological screening of a Schistosoma japonicum adult worm cDNA expression library with sera of Microtus fortis, a naturally resistant vertebrate host, has identified one clone that encoded for a sequence homologous to those of the serpin superfamily. The full-length sequence encoding S. japonicum serpin (Sj serpin) was amplified from adult worm cDNA by using 5'-RACE-PCR and subsequently cloned into the prokaryotic expression vector pET28c. The full-length Sj serpin fusion-protein with his-tag was expressed in E. coli, purified by affinity chromatography and used to immunize New Zealand white rabbits. Sj serpin is located on the tegument in S. japonicum adult worms. C57BL/6 mice immunized with Sj serpin induced the production of high levels of specific IgE and IgG1 subclass antibodies as well as a marked IL-4 response. Lymphocyte surface marker analysis revealed proliferation of CD19 expressing B cells, indicating a predominant Th2-type response to Sj serpin. Immunized mice developed moderate protection against infection of S. japonicum as demonstrated by a 36 and 39% reduction in the recovery of adult worms and eggs, respectively. These data suggested a role for Sj serpin as a vaccine candidate or as a novel target for anti-schistosome drugs.     

东方田鼠抗日本血吸虫病现象的观察

本试验分别应用１０００条、２００条和４０条日本血吸虫尾蚴人工攻击感染东方田鼠,金黄地鼠和Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,在攻击后第１、２、３、４、７、９、１２、１５、１６、１８、１９、２１、２２、２４、４２天时分别将其剖杀,集虫、观察。结果观察到血吸虫在东方田鼠体内不能发育成熟,在攻击后１９天时虫体已全部死亡。而黄金地鼠和Ｂａｌｂ／ｃ小鼠的虫体回收率分别为６５％和６０．６％。在虫体移行时,东方田鼠肺组织和肝组织     

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种扫描电镜观察及与其它血吸虫的比较

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种分别收集于四川和黑龙江省,按常规电镜方法处理后,以日立JSM-800扫描电镜观察并摄片.观察显示中华血吸虫体表无结节,其雄性成虫体表结构近似于日本血吸虫等亚洲血吸虫,与文献描述的采集于泰国的中华血吸虫也无明显差异.观察同时表明土耳其斯坦东毕吸虫结节变种与程氏东毕吸虫基本无差别,二者的感觉球种类与土耳其斯坦东毕吸虫一致,但数目较后者为多.同时结合已发表的有关裂体属血吸虫SEM研究结果,对裂体属血吸虫SEM超微结构特点列表进行了比较.按照Rollinson的分组方法,中华血吸虫属于无结节组,而东毕吸虫属于不带棘的有结节组.