微生物浊度法测定三种兽用抗生素效价

分别以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液.将硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3～4 h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、浊度法与管碟法比较及专属性等验证.结果表明硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素的线性浓度范围分别为2.9 ～7.2 、0.6～2.0、44.9～93.2 u/mL,相关系数r分别为0.997 4、0.998 4、0.997 8.硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素所建立的浊度法平均回收率及平均可信限率分别为99.82%,2.48%、 99.66%,2.80%、99.61%,7.62%.管碟法与浊度法所测结果无显著差异.硫酸安普霉素和泰乐菌素浊度法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点;硫酸黏菌素建立的浊度法可信限率与管碟法接近.     

微生物浊度法测硫酸安普霉素及其制剂含量的研究

以抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,金黄色葡萄球菌为试验菌,将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度,寻找其呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性、浊度法与管碟法比较等验证。结果表明:硫酸安普霉素的浓度在2.9～7.2u/ml之间时,其浓度的对数值与相对应的吸光度具有良好的线性关系,相关系数:R2=0.9988。硫酸安普霉素所建立的微生物浊度法平均回收率及平均可信限率为100.00%和1.88%。浊度法与管碟法所测结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于硫酸安普霉素及其制剂含量的测定。     

微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂效价的研究

以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将泰乐菌素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3～4h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性及适用性等验证。结果表明:泰乐菌素的浓度在0.6～2.0u/ml之间,其浓度的对数值与相应的吸光度呈直线关系,相关系数R2为0.9983;经t检验,泰乐菌素浓度的对数值与相应的吸光度回归效果显著;所建立的浊度法平均回收率为100.09%,平均可信限率为1.57%,RSD为1.88%;浊度法与管碟法所测结果无显著性差异。因此,本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点,可用于泰乐菌素及其制剂的效价测定。     

微生物浊度法测定安普霉素及其制剂效价的研究

以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37 ℃培养3～4 h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性及适用性等验证。结果表明,安普霉素的浓度在2.9～7.2 U/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r＝0.9988。经t检验,安普霉素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.82%,平均可信限率为2.48%,相对标准偏差（RSD）为1.86%。管碟法与比浊法所测结果无显著差异。因此,本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点,可用于硫酸安普霉素及其制剂的效价测定。     

浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉效价研究

目的:建立浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉效价的方法。方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制备菌悬液。采用浊度法和管碟法对酒石酸泰乐菌素可溶性粉的效价测定进行比较,并对浊度法进行方法学验证。结果:用浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉的效价,泰乐菌素的浓度范围在0.6-2.0 u/mL之间,其浓度对数与吸收度有良好的线性关系,相关系数r=0.999 0,平均回收率为100.3%,RSD为0.91%;用浊度法与管碟法测定结果无明显差异,方法学验证表明,浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉效价的方法可行。结论:本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速简便等优点,可用于泰乐菌素及其制剂的效价测定。     

微生物浊度法测定硫酸安普霉素及制剂含量的试验研究

以金黄色葡萄球菌为供试菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基.将硫酸安普霉素稀释成不同浓度,寻找浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定硫酸安普霉素及其制剂含量的浊度法.硫酸安普霉素的浓度在3.6～6.0 μ/mL之间,其浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关,相关系数r=0.9909.经t检验,硫酸安普霉素浓度的对数值与相对应的回归效果显著.所建立的浊度法平均回收率为100.73%,平均可信限率为2.94%,RSD为0.31%.     

微生物浊度法测定硫酸安普霉素可溶性粉含量的研究方法

以金黄色葡萄球菌为试验茵,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,将硫酸安普霉素可溶性粉稀释成不同的浓度,寻找浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围。建立测定安普霉素含量的浊度法。安普霉素的浓度在2．9～7．2μg／ml之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r为0．9962。经t检验安普霉素浓度的时数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为100．10％,平均可信限率为3．05％,RSD为0．23％。管蝶法与浊度法所测得结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于安普霉素可溶性粉含量的测定。     

微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂含量的研究

以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,将泰乐菌素稀释成不同的浓度,寻找浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定泰乐菌素及其制剂含量的浊度法。泰乐菌素的浓度在0.6-2.0u/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r为0.9992。经t检验,泰乐菌素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.87%,平均可信限率为2.76%,RSD为0.37%。管碟法与浊度法所测结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于泰乐菌素及其制剂含量的测定。     

HPLC—ELSD法测定硫酸安普霉素含量的研究

建立了HPLC—ELSD法测定硫酸安普霉素、硫酸安普霉素可溶性粉和硫酸安普霉素预混剂中安普霉素的含量。采用XBridge C18柱（4．6×150mm,5μm）,以0．2mol／L三氟乙酸一甲醇溶液（98：2）为流动相,柱温30℃,流速1．0ml／min,雾化器加热级别为60％,漂移管温度为60℃,气体压力为35psi,增益为5。对照品在进样量为0．4-10μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9997）,安普霉素回收率为99．5％-102．7％。该方法简便、准确、快速。适合硫酸安普霉素及其制剂的质量控制。     

微生物浊度法测定硫酸黏菌素E含量的研究

以大肠杆菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,研究比浊法测定硫酸黏菌素及其制剂的含量。硫酸黏菌素的浓度在44.9 u/ml～93.2u/ml之间时,检测菌液接种浓度为0.3%,培养时间为2～3h,其浓度的对数值与相对应的吸光度具有良好的线性关系,相关系数：r＝0.9978。所建立的浊度法重现性较好,具有简便、精确、快速的特点,可用于硫酸黏菌素及其制剂含量的测定。     

硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加乙酰甲喹的HPLC-PDA检测方法的建立

为检测硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加的乙酰甲喹,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠3.0 g,加水1000 m L使溶解,加三乙胺0.5 m L,用饱和氢氧化钠溶液调节p H值至7.0)-甲醇为流动相,二极管阵列检测器(PDA),建立了HPLC-PDA检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,乙酰甲喹与其他物质峰分离良好。按外标法以峰面积计算,乙酰甲喹的平均回收率为98.1%,RSD为0.3%。该检测方法简便、准确、可靠,可用于测定硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加的乙酰甲喹。     

阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液无菌检查方法研究

目的建立阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液的无菌检查方法。方法按《中国兽药典》2005年版一部附录进行试验。结果采用薄膜过滤法,每管培养基中加入不少于100万单位的青霉素酶,以1%聚山梨酯80的0.1%蛋白胨水溶液冲洗液,选择冲洗量为300mL,可消除样品对各菌株的抗菌活性。结论阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液可用该方法进行无菌检查。     

硫酸粘杆菌素的急性毒性及对小鼠骨髓细胞的微核效应

为评价国产硫酸粘杆菌素的安全性 ,进行了改良寇氏法测定LD50 小鼠骨髓细胞的微核试验。结果显示 ,国产硫酸粘杆菌素的LD50 为 71 1 45mg/kg ,属于低毒类化合物 ;小鼠骨髓微核试验结果为阴性 ,表明其不具致突变作用     

硫酸粘杆菌素(Colistin sulfate)对大肠杆菌的抗生素后效应

用微量稀释法潮定的硫酸粘杆菌素(colistinsulfate)对4株大肠杆菌的最小抑茵浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。分剐为0．2～O．8mg／k和0．8～1．6mg／k。2MIC硫酸粘杆菌素对4株大肠杆菌作用2h后。l000倍稀释去除药物。硫酸粘杆菌素对4株大肠杆菌的抗生素后效应(PAE)在1．062-2．017h之间。64、32、16、8、4、2MIC硫酸粘杆菌素对大肠杆菌CMCC44103作用2h后。l000倍稀释去除药物。硫酸粘杆菌素PAE的平均值分别为0．517、2．487、2．037、1．727、1．467、1．057h。PAE与药物浓度呈正相关。     

Toxicity, bioavailability and pharmacokinetics of a newly formulated colistin sulfate solution

We formulated a new colistin sulfate injectable solution and tested its effectiveness, toxicity and pharmacokinetics in vivo on mice, rabbits, and piglets. When intramuscularly injected (i.m.) into rabbits at 0.5 mL per site, the 2.5% colistin sulfate solution caused no reaction at the injection site, but the 5.0% solution caused the muscle circumference to appear erythematic. Tested LD50 in CD-1 mice were 38.72 mg/kg for i.m. and 431.95 mg/kg for oral administration, respectively. At 15.0 mg/kg/day (i.m.) for 5 days, colistin sulfate caused obvious neurotoxicity to piglets with moderate granular degenerations in the epithelial tissues from kidney and liver. These toxic responses were not seen when colistin sulfate was injected at 10.0 mg/kg/day for 5 days. Pharmacokinetic studies revealed Cmax of 3.73 +/- 0.28 and 6.40 +/- 0.18 microg/mL, Tmax of 32 +/- 1.5 and 34 +/- 1.8 min, t(1/2beta) of 256 +/- 14 and 264 +/- 29 min, and absolute bioavailability of 95.94 and 88.45% for colistin sulfate intramuscularly injected to piglets at 2.5 and 5.0 mg/kg, respectively. Serum colistin sulfate concentration followed a two-compartment open model showing first-order absorption. The high bioavailability and the long-lasting serum retention time indicated that the new solution is suitable for i.m. in piglets with a recommended dose of 2.5 mg/kg injected twice daily.     

一例鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定

为确诊某养鸡场发病的原因,采集临床病死鸡的肝脏、脾脏进行细菌分离培养,并通过细菌形态学观察、生化试验、分子生物学鉴定和药物敏感性试验.结果:分离细菌为革兰氏阴性杆菌,菌落形态和生化鉴定特征与大肠杆菌相符;16S rDNA PCR扩增及基因同源性分析确定为大肠杆菌;菌株对安普霉素、泰妙菌素、多西环素、硫酸粘菌素较敏感,对替米考星、泰万菌素、磺胺间甲氧嘧啶、泰乐菌素、阿莫西林存在耐药性.     

管碟法测定硫酸安普霉素效价的不确定度评定

为对管碟法测定硫酸安普霉素效价的不确定度进行评定,根据JJF1059-2019《测量不确定度评定与表示》中的有关规定,建立数学模型,应用测量不确定度评定与表达理论,分析不确定度来源,对各个不确定度分量进行评估,计算扩展不确定度。测定结果的扩展不确定度为U=1.8单位,可表示为(103.6±1.8)单位/mg(k=2)。测量不确定度的主要来源为重复性试验引入的不确定度,其次为溶液稀释过程中引入的不确定度,提示试验人员应注意效价测定试验中稀释定容的操作过程,并注意保持重复性试验条件的一致性。     

阿莫西林和硫酸粘菌素对猪鸡大肠杆菌和沙门氏菌的体外联合抗菌作用

探讨了阿莫西林与硫酸粘菌素对猪鸡的大肠杆菌和沙门氏菌的联合抗菌效果。采用微量稀释法分别测定阿莫西林与硫酸粘菌素单药对大肠杆菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度（MIC）,采用棋盘稀释法测定阿莫西林与硫酸粘菌素联用对大肠杆菌和沙门氏菌的MIC并计算联合指数（FIC）。试验结果显示,对14株试验菌株体外联合抗菌呈协同与相加作用的占78.6%,呈无关作用的占21.4%,无拮抗作用,表明阿莫西林和硫酸粘菌素可联合应用于治疗猪鸡大肠杆菌和沙门氏菌感染。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型、奇异变形杆菌混合感染病例的病原学诊断

为确诊贵州省都匀市某养殖场的猪死亡病因,采集病死猪病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型核酸检测,细菌分离鉴定及药物敏感试验。结果:猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量RT-PCR检测和猪圆环病毒2型PCR检测核酸均为阳性,其余病毒核酸检测均为阴性。细菌分离培养表明存在细菌感染,分子生物学鉴定为奇异变形杆菌;分离菌对硫酸安普霉素、硫酸粘菌素、盐酸大观霉素+盐酸林可霉素、氟苯尼考较敏感,对多种药物产生耐药。结论:确诊病例为猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、奇异变形杆菌混合感染。