囊素对猪外周血单个核细胞的免疫刺激活性研究

囊素是存在于禽腔上囊中能诱导B细胞分化的活性肽类物质,其化学组成为三肽Lys-His-Gly-NH2。本试验探讨了猪外周血单个核细胞的分离培养条件,并研究了人工合成的囊素对体外培养的猪外周血单个核细胞（PBMC）的免疫刺激活性。采用猪PBMC体外增殖实验,3H-脱氧胸苷（3H-TdR）掺入法测定刺激指数（SI）。结果表明,用猪淋巴细胞分离液（1.110g/cm3）在1500r/min、30min条件下细胞得率及细胞活力最高,分别为7.26×107、91.5%。体外培养的PBMC经不同浓度的囊素刺激24h后,细胞体积明显增大、数目增多,在同一视野中细胞聚集成团的数目明显增多。4μg囊素/孔与8μg囊素/孔组每分钟脉冲数（cpm值）分别达821.60±6.90和916.70±9.25,刺激指数（SI值）分别达4.32±0.12、4.83±0.15,表明囊素对体外培养的猪PBMC具有明显的免疫刺激活性,且在一定浓度范围内囊素对猪PBMC的免疫刺激活性有剂量依赖关系。     

细胞培养及避免细胞污染的方法

1细胞培养1.1细胞传代培养当细胞生长至高密度时,即需分瓶至新的培养瓶中,否则就会影响细胞的生长,甚而引起死亡。一般分瓶的稀释比例为1∶3～1∶6,依细胞种类而异。一般步骤是先去除原培养瓶中旧的培养液,用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤细胞2次,加入0.25%胰酶溶液37℃作用数秒至数分钟（时间依不同细胞而异）后,倒置显微镜下观察,当细胞呈圆粒状时,去掉胰酶溶液,加入适量新鲜培养基,以吸管反复吹打瓶壁数次,使细胞脱离瓶壁,均匀悬浮于培养液中。     

不同脱除卵丘细胞方式对牛体外胚胎生产效果的影响

为了提高牛体外受精性控胚胎发育率,试验从体外受精（IVF）培养8 ｈ后的胚胎,采用不同的脱除卵丘细胞方式（机械脱除法、酶脱除法、振荡法）脱除卵丘细胞,研究影响牛性控精液体外受精效率的关键技术。结果表明,在体外受精8 h后,采用不同的脱除卵丘细胞方式（机械脱除法、酶脱除法、振荡法）脱除卵丘细胞,受精卵经体外培养48 h后统计胚胎卵裂率分别为（58.8±2.8）%、（58.5±5.7）%、（69.9±3.4）%,体外培养192 h统计囊胚率分别为（26.7±2.7）%、（26.9±3.9）%、（35.8±4.1）%,由此可见,振荡法显著优于机械脱除法和酶脱除法（P〈0.05）。性控精液体外受精时,体外受精8 h后采用振荡法脱除卵丘细胞对于提高性控精液体外受精胚胎发育率具有重要意义。     

鸡贫血病毒感染鸡细胞凋亡研究

用TUNEL法检测了1 日龄SPF雏鸡感染鸡贫血病毒(CAV)后胸腺和骨髓细胞的凋亡情况。结果,接种CAV 后6、10、20 d,骨髓细胞的凋亡率分别达51% 、52% 、57% ;接种后6 d,胸腺细胞凋亡率为53% ,比对照鸡胸腺和骨髓细胞的凋亡率明显升高( P< 0.01)。用流式细胞仪对胸腺细胞悬液所作的细胞凋亡分析结果与TUNEL法检测结果一致。     

鸡囊胚细胞冷冻损伤的评价方法

采用滤纸环法分离鸡囊胚细胞(blastodermal cells,BCs),冷冻复苏后使用二乙酰荧光素(fluorescein diacetate,FDA)测定细胞活率,以及培养24h测定细胞贴壁率简称"贴壁率法",探究2种方法在不同冷冻程序优化试验中对细胞冷冻损伤的评价效果。结果显示,FDA染色法与贴壁率法在冷冻保护剂浓度优化、冷冻及解冻速率优化试验中对细胞冷冻损伤的评价结果差异不显著(P0.05),相关性很好,但也有一定差异;不同冷冻剂浓度优化试验中,5%DMSO冷冻保护液有细胞活率,但无贴壁现象;投入液氮温度对比试验中,-35℃以后,随着投入温度的降低,细胞活率略微升高,但贴壁率呈较明显的下降趋势。因此,2种方法均适合鸡BCs冷冻损伤评价,但贴壁率法能给出更多关于细胞状况的信息,评价结果更加真实可靠。     

离心条件对犬精液冷冻保存精子活率的影响

通过手握法,采集的精液汇集,分成3等份,分别用3种离心条件离心。对离心后的精液进行稀释冷冻。解冻后保存在37℃水浴中,0~6h测定精子活率、对精子活力进行评估。结果表明,解冻后放入37℃水浴中,立即检查,3种离心处理组在0h精子活力、活率差异不显著（P〉0.05）。精子活力、精子活率随保存时间的增加明显下降（P〈0.05）,3组之间变化差异不显著（P〉0.05）。     

年龄和性别对陶赛特×小尾寒羊F1代羔羊屠宰性能与肉品质的影响

试验旨在探讨年龄和性别对陶×寒F1羔羊肉用性能及肉品质的影响。选取同等饲养条件下的7月龄陶×寒F1公羔、母羔;13月龄陶×寒F1公羔各5只,研究其屠宰性能和肉的食用品质。结果表明,13月龄羔羊的宰前活重、胴体重比7月龄高41.85%、56.51%（P<0.01）,屠宰率显著高于7月龄（P<0.05）,13月龄羔羊的屠宰性能高于7月龄。产肉力指标上13月龄羔羊的瘦肉重、眼肌面积、肉骨比较7月龄高30.40%、30.04%（P<0.01）、15.56%（P<0.05）。13月龄羔羊肥肉重、GR值比7月龄高117.23%、263.40%（P<0.01）。肉品质方面,13月龄羔羊背最长肌剪切力值、滴水损失率、胶原蛋白含量、肌纤维直径均显著高于7月龄（P<0.05）。公羔的宰前活重、胴体重比母羔高11.96%、14.36%（P<0.05）,表明7月龄时公羔屠宰性能高于母羔,肉品质指标无显著差异。因此,陶×寒F1羔羊的屠宰性能和肉品质明显受年龄、性别的影响。     

ESR、FSHβ及OPN基因多态性与母猪繁殖性状的关联分析

采用PCR-RFLP法对大白猪和长白猪猪群进行了雌激素受体基因（ESR）、卵泡促激素β亚基基因（FSHβ）和骨桥蛋白基因（OPN）等3个与繁殖性能相关的基因多态性检测,并对不同基因型的总产仔数、产活仔数及出生窝重进行了相关分析。结果表明：①在长白猪中,ESR和OPN基因的优势基因是A等位基因,FSHβ基因的优势基因是B等位基因;在初产母猪中,ESR基因BB型个体比AA型个体总产仔数、产活仔数及出生窝重高,FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数、产活仔数及出生窝重上高,OPN基因BB基因型个体比AA基因型个体总产仔数少1.20头,差异显著（P＜0.05）;在经产母猪中,OPN和FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数和产活仔数高,ESR基因总产仔数、产活仔数规律与初产母猪相反。②在大白猪群体中,ESR基因的优势基因是A等位基因,FSHβ和OPN基因的优势基因是B等位基因;在初产母猪中,ESR基因AA型比BB型个体产活仔数和出生窝重高,OPN和FSHβ基因AA型个体比BB型个体总产仔数和产活仔数高;在经产母猪中,ESR、FSHβ及OPN基因全都表现出BB型比AA型个体总产仔数和产活仔数高的趋势。     

小鼠支持细胞体外培养的一般特性

用组合酶消化法、选择性贴壁法将7～8日龄小鼠的支持细胞分离纯化后进行体外培养,观察其体外培养的一般生物学特性.结果表明,所获细胞悬液中活细胞、死细胞及细胞团的百分率分别为90.08%,9.92%,8.91%,平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞.接种纯化后,可获得均一的、纯度高达90%以上的支持细胞.支持细胞体外贴壁时间为7～8 h,贴壁后伸出3～4个突起,为成纤维型细胞.油红O染色显示,其胞质内含有大量脂漓.     

不同离心条件对犬精液冷冻保存质量的影响

为评估3种离心条件对犬精液解冻后的影响。将手握法采集的精液分成3等份,分别用3种离心条件离心、稀释冷冻,解冻后保存在37℃水浴中,0-6h测定精子活力、活率、畸形率、顶体完整率。结果表明,3种离心处理组的精子0h活力、活率、畸形率、顶体完整率差异不显著（P〉0.05）,但随保存时间的增加明显下降（P〈0.05）,3组之间变化差异不显著（P〉0.05）。     

波尔山羊重复超排FSH用量的调整方法与效果

根据218只2～5岁经产波尔山羊的第1次超排反应及回收胚胎数将第2次超排母羊分为5个组（1组只有卵泡未排卵;2组母羊处理后未发情;3组黄体数≤4个;4组黄体数5～14个;5组黄体数≥15个）,2次连续超排时间间隔60 d以上,采用递减法用FSH（Folltropin V）进行超排处理,第2次FSH给量根据第一次的超排效果进行调整。结果表明,1～5组的有效供体利用率分别为100%、75%、71.88%、93.10%和93.65%,5组有效供体比例差异不显著（P＞0.05）;1～5组的总胚胎数分别为14.00±5.73、12.10±6.78、11.77±7.26、13.84±7.04、18.03±9.06枚,5组的总胚胎数极显著高于其他4组(P＜0.01);1～5组的回收可用胚胎数分别为12.81±6.04、10.33±8.12、10.08±7.14、11.34±6.58和15.37±7.64枚,5组超排后可用胚胎数显著高于2、3、4组(P＜0.05),与1组间差异不显著（P＞0.05）。根据供体首次超排效果调整波尔山羊重复超排FSH给量方案可行,首次超排无反应或超排反应差的个体,重复超排时增加FSH给量,可以使70%以上的个体成为有效供体。     

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究

本试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为1×106个/mL。采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复。液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察。结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异(P0.01),处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异(P0.05),处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异(P0.01);处理4组的贴比率高于处理2、5、6组,存在极显著差异(P0.01)。形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其它组生长状态良好。因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。     

口服福尔马林对羔羊消化代谢与生长的影响

将8只30日龄、体重(6.9±1.0)kg的小尾寒羊×无角陶赛特母羔羊随机分为2组(每组4只),以研究口服福尔马林对羔羊自由采食、消化代谢、屠宰性能和甲醛残留的影响。结果表明,在55～80、95～120和125～150日龄3个日龄段,对照组羔羊的干物质采食量分别为(567.3±27.5)、(752.4±9.01)和(1044.1±30.8)g/(d.头),口服福尔马林组分别增加22.02%(P0.01)、28.75%(P0.01)和41.79%(P0.01);对照组羔羊的氮保留分别为(12.3±0.8)、(13.6±0.2)和(18.0±0.6)g/(d.头),口服福尔马林组分别增加25.20%(P0.01)、41.91%(P0.01)和46.11%(P0.01);对照组羔羊的日增重分别为(157.1±11.7)、(246.4±24.4)和(250.0±8.3)g/(d.头),口服福尔马林组分别增加18.20%(P0.05)、23.21%(P0.05)和27.16%(P0.01);而两组间的日粮消化率无显著差异。240日龄对照组和口服福尔马林组羔羊的胴体重分别为(20.37±1.78)和(24.55±1.14)kg/头(P0.01),屠宰率分别为48.59%±1.08%和50.46%±1.02%(P0.05),瘦肉率分别为65.22%±1.57%和64.84%±1.11%(P0.05)。羔羊血液、肌肉、肾脏、肝脏、瘤胃组织和小肠组织中的甲醛含量对照组分别为(1.84±0.44)mg/L、(0.35±0.26)mg/kg、(1.10±0.67)mg/kg、(0.74±0.34)mg/kg、(0.91±0.72)mg/kg和(0.79±0.41)mg/kg,在试验组分别为(1.47±0.61)mg/L、(0.54±0.34)mg/kg、(1.65±0.71)mg/kg、(0.91±0.38)mg/kg、(2.03±0.71)mg/L和(0.85±0.42)mg/L。因此,口服福尔马林可增加羔羊的自由采食量而不影响消化率,提高羔羊对日粮的消化量和羔羊日增重;以上这种作用随羔羊的日龄增加而增强;口服福尔马林提高羔羊的胴体重、屠宰率,但不影响胴体的瘦肉率;长期口服福尔马林羔羊的组织器官中甲醛的含量低于2.0 mg/kg。     

甜菜粕替代玉米对奶牛生产性能及血液代谢的影响

试验旨在研究用甜菜粕替代玉米作为能量饲料对中国荷斯坦奶牛生产性能及血液代谢指标的影响。选择60头（泌乳日龄为61 d±21.6 d,产奶量为31.2 kg/d±6.2 kg/d）健康的泌乳前期荷斯坦奶牛,随机分为两棚,每棚3个处理,分别为对照组、20SBP组和40SBP组,每组10头牛。各组日粮除玉米和甜菜粕外,其它成分相同。试验结果表明,各个处理间的干物质采食量、产奶量和能量校正乳都差异不显著（P>0.05）。乳蛋白和乳脂等乳成分的产量和百分含量都不受甜菜粕替代玉米比例的影响（P>0.05）,随着甜菜粕饲喂比例的增加,其含量有升高的趋势。血尿氮和葡萄糖浓度显著降低（P<0.01）。各个处理间的非脂化脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHBA）等其他血液生化指标的浓度无显著变化（P>0.05）。因此,在奶牛日粮中用甜菜粕替代玉米作为能量来源,基本不会影响奶牛的生产性能及血液代谢情况,同时降低了奶牛的饲养成本。     

青藏高原地方鸡种——海东鸡与商品鸡蛋品质分析比较

作者对青藏高原地方鸡种—海东鸡与商品新罗曼鸡的蛋品质及蛋中营养成分进行测定并分析比较。结果表明,海东鸡的蛋重、蛋壳重、蛋白重及蛋白重/蛋重极显著低于新罗曼鸡(P0.01);而蛋形指数和蛋黄重/蛋重极显著高于新罗曼鸡(P0.01);蛋壳厚度和蛋壳重/蛋重海东鸡显著高于新罗曼鸡,且海东鸡的哈氏单位显著高于新罗曼鸡(P0.05);蛋黄和蛋壳强度重二者无显著差异。海东鸡蛋全蛋粗蛋白质含量比新罗曼鸡蛋低21.3%,达到极显著水平(P0.01);粗脂肪含量比新罗曼鸡高18.1%,达到显著水平(P0.05)。     

温度和食物对褶皱臂尾轮虫种群增长及繁殖的影响

本试验设3个温度（20、25和30℃）和3个食物浓度（1×106、10×106和20×106 cells/mL）,研究不同温度和不同食物浓度对褶皱臂尾轮虫种群增长及繁殖的影响。试验期为10 d。结果表明,最大种群密度均随温度和食物浓度的升高而先增加后减少。温度为25℃食物浓度为10×106 cells/mL时,最大种群密度为74.39±1.81 ind/mL,与其他组比差异显著（P〈0.05）。随温度升高,轮虫的最大种群密度高峰值出现的时间也呈现逐渐前移的趋势,最大种群增长率则随温度和食物浓度的增加而升高。温度30℃食物20×106 cells/mL时,最大种群增长率为0.70±0.013,与其他组比差异显著（P〈0.05）。食物浓度对轮虫的怀卵率有显著影响,在同一温度下最大怀卵率随食物浓度的升高而增大,食物为20×106 cells/mL的最大怀卵率为56.43±1.07%,与其他浓度组比差异显著（P〈0.05）。在本试验条件下,温度和食物对褶皱臂尾轮虫的种群增长及繁殖均有显著影响。温度25℃食物浓度10×106 cells/mL为培养条件的最优组合。     

复合营养舔砖粗蛋白质瘤胃降解率的研究

为了探讨复合营养舔砖用作反刍动物饲料补充料的饲用价值,我们选用4头装有永久瘤胃瘘管的公牛（丹麦红牛♂×闽南黄牛♀的杂交一代）,利用尼龙袋法对复合营养舔砖粗蛋白质瘤胃降解率进行测定。结果表明,复合营养舔砖粗蛋白质瘤胃降解率,组间差异不显著（P>0.05）,除2 h时间段外、组内差异极显著（P<0.01）。0、2、4、8、16、24、48 h时间段瘤胃降解率分别为（1.79±0.40）%、（9.73±2.12）%、（16.27±2.57）%、（25.96±2.30）%、（43.12±1.20）%、（59.35±0.63）%、（73.21±0.42）%,动态降解率为34.65%。     

二甲基甲酰胺对猪精液冷冻保存效果的影响

用二甲基甲酰胺(DMF)完全替代甘油,比较不同平衡时间和不同DMF添加量对猪精液冷冻保护效果的影响。结果表明,DMF能完全替代甘油,获得较好的冷冻保护效果。最佳平衡时间为90 min,解冻后精子活力为(44.57±0.72)%,显著高于对照组和其他组(P0.05)。当DMF添加量为5%时,冻后精子活力、活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整率分别为(49.91±0.39)%(、46.51±0.26)%、(47.51±0.52)%(、49.84±0.56)%、(46.30±1.61)%,均显著高于2%、3%、6%DMF添加组(P0.05),但与4%DMF添加组相比,冻后精子活力、活率和质膜完整率差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,DMF最适添加量为5%。     

用小麦部分替代日粮玉米对淮南麻黄鸡生产性能的影响研究

 试验旨在研究用不同比例小麦替代日粮玉米的营养水平对淮南麻黄鸡生产性能、肉品质和血清生化指标的影响。选用55日龄淮南麻黄鸡360只,随机分为4组,每组3个重复。试验前期（后期）,试验1、2和3组日粮为用小麦替代对照组日粮中的10%（20%）、20%（30%）和30%（40%）玉米。结果表明：（1）试验全期各组鸡增重、料增重比和屠宰性能差异均不显著（P>0.05）。（2）试验3组鸡胸肌pH₁和 pH₂₄都比对照组低（P<0.01）,试验3组肉色L比对照组高（P<0.01）。（3）试验1组鸡肉中精氨酸含量比对照组高12.50%（P<0.01）;试验2组鸡肉中钙、组氨酸含量比对照组分别高50.00%（P<0.05）和9.66%（P<0.01）;3组鸡肉中蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和组氨酸含量比对照组分别高9.09%（P<0.05）、6.54%（P<0.01）、6.70%（P<0.01）、5.75%（P<0.01）和13.10%（P<0.01）。(4)试验各组鸡血清T3、T4、血糖、尿酸和尿素氮差异均不显著（P＞0.05）。上述结果表明用小麦替代部分玉米是可行的.