干扰TP53INP2抑制牛成肌细胞分化

【背景】肌肉可以维持哺乳动物运动功能并调节机体代谢,它的数量和分布对肉质有重要影响,骨骼肌的生长发育及其遗传特性在很大程度上影响甚至决定家畜的产肉量和肉品质,研究骨骼肌的生长发育具有重要意义。TP53INP2对自噬的调控作用以及对前体脂肪细胞分化的调控机制已有研究,而对于牛成肌细胞分化的影响尚未报道。【目的】探究TP53INP2对秦川牛成肌细胞分化的影响,为肉牛肉用性状分子育种工作提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR）技术检测了TP53INP2在24月龄秦川牛不同组织中的表达特性,同时分析了其在体外培养的牛骨骼肌成肌细胞不同分化时期的表达规律;合成TP53INP2基因siRNA并转染秦川牛成肌细胞,转染后12h进行诱导分化,观察成肌细胞表型变化,并利用RT-qPCR技术和Western Blot技术分别检测其在诱导分化第四天时分化标志基因和蛋白的表达情况。【结果】1.RT-qPCR结果显示,TP53INP2在成年秦川牛背最长肌组织中表达量最高,在小肠组织中表达量最低。TP53INP2在成年牛心脏、肝脏、肾脏、网胃、瘤胃中表达量较高,在其余组织中表达量较低（与背最长肌相比）。2.随着成肌细胞的分化,该基因在第0—4天表达量呈上升趋势且在第4天达到峰值,随后表达量呈下降趋势。3.在成肌细胞中干扰TP53INP2后,试验组肌管的数量和长度均显著低于对照组。4.干扰TP53INP2并提取细胞总RNA,RT-qPCR结果显示,成肌细胞分化标志基因肌细胞生成素（MYOG）和肌球重链蛋白3（MYH3）相对于对照组表达量显著降低。5.干扰TP53INP2并提取细胞总蛋白,Western Blot结果显示,试验组MYOG、MYH3、MYOD的蛋白表达量均降低且与对照组相比差异极显著。【结论】干扰TP53INP2对牛成肌细胞的分化具有抑制作用,提示该基因可能对秦川牛肌肉组织的生长发育具有重要的调控作用,可对其进行深入的功能研究以期用于肉牛的分子育种实践中。     

上坝河印象

上坝河森林公园开园了。宁陕县调度了几辆客车专门在“五一”黄金周为旅客服务。一位老跑县城至广货街的公共汽车司机被抽去，他一边熟练地开着车．一边极富热情地介绍着上坝河旅途的景点。     

B超影像学在奶牛早期妊娠诊断中的应用

应用兽用B超仪对224头奶牛在配种后30d内进行了扫描早期妊娠诊断，探索了兽用B超诊断奶牛早期妊娠的准确率，描绘奶牛妊娠典型影像图特征。结果表明：奶牛配种30d内，应用B超法进行早期妊娠诊断，比直肠检查方法提前30d以上，诊断符合率达98．83％。本实验为牛场应用B超早期妊娠诊断提供了参考资料。     

浅谈生物节水在城市园林绿化和水土保持中的意义

本文论述生物节水在城市园林绿化节约用水、以及水土保持环境治理方面的重要意义。     

利用芦笋渣饲喂奶牛试验

<正> 我县既是芦笋的主要产区,又是济南市的奶牛基地。芦笋营养丰富,产品主销日本。围绕芦笋加工兴建的3个芦笋罐头厂,每年做罐头的下脚料—芦笋渣达40万公斤。在当前奶牛饲养业由于饲草饲料价格不断上涨,而使牛奶成本提高,效益下降的情况下,能否利用芦笋渣作奶牛饲料,国内外均无报导。为此,本试验利用芦笋渣饲喂奶牛,对其产奶性能、增重等影响,以及饲喂效益进行了探讨,以期达到对芦笋渣开发利用的目的。试验取得了较好效果,现总结报告如下:材料与方法一、供试芦笋渣由历城区遥墙芦笋罐头厂提供。经驻济化工部饲料添加剂技术开发服务中心分析,主要成分为:水分91.17％、蛋白质2.82％、非蛋白含氮物0.84％、脂肪0.19％、碳水化合物3.63％、纤维素0.69％、灰分0.66％以及VA、VB_1、VB_2、Vc、芦丁、芸香碱等。成本合计为每公斤2分。     

奶牛围产期的饲养管理要点

围产期是指奶牛产犊前后的各15天之内的一段时间。由于奶牛这一个月的特殊生理状况。使这一时期成了奶牛饲养管理最容易出现问题的阶段。因此，加强该阶段的饲养管理，可以有效地降低奶牛的发病率和死淘率，提高奶牛的生产性能和繁殖性能，显著地增加奶牛养殖场（户）的经济效益。     

胰岛素诱导牛成肌细胞成脂分化的研究

【目的】建立稳定成熟的牛成肌细胞胰岛素诱导成脂分化体系,为肉牛肉脂品质的改良提供参考。【方法】取1日龄荷斯坦公牛犊后腿肌肉,用Ⅳ型胶原酶消化法分离成肌细胞,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化,以未添加胰岛素的培养基为对照组,检测成肌细胞成脂分化过程中细胞形态的变化,并分析与成肌细胞和脂肪细胞分化相关基因(C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ、Myf5、MyoD)分别诱导第3,6,9,12,15天相对表达量的变化,分析牛成肌细胞的诱导分化情况。【结果】成功分离培养了牛原代成肌细胞。胰岛素处理组细胞中脂滴的油红O染色明显,C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ和MyoD相对表达量明显增高,C/EBPα和Myf5基因相对表达量则下降;用DMEM高糖培养基+体积分数10%胎牛血清(FBS)培养时,C/EBPs基因相对表达量总体高于DMEM高糖培养基+体积分数20%FBS+体积分数10%马血清(HS)。【结论】成功分离并鉴定了牛成肌细胞,建立了适于牛成肌细胞的体外培养体系,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化效果好。     

胚胎移植受体牛的选择方法探讨

牛胚胎移植的妊娠率与受体的选择密切相关。本文按照 4个步骤 (受体牛的初步选择 ,发情的选择 ,第 7d黄体的选择 ,测定乳或血中孕酮含量选择 )对受体牛进行了选择并分别进行了探讨。三年来 ,采用此法选择受体进行移值 ,妊娠率达 5 9.7% ( 82 13 7) ;而未完全采用该方法选择受体进行移植 ,妊娠率仅为 3 4.6% ( 72 2 0 8) ,经t检验差异极显著(P <0 .0 1)。     

50%葡萄糖溶液加抗生素治疗奶牛轻度子宫疾病效果显著

子宫疾病是引起奶牛不孕的主要原因。有效预防和治疗子宫疾病是提高奶牛受胎率的关键，特别是有效地治疗轻度子宫疾病更显意义重大。患这类疾病的奶牛，往往屡配不孕，但发情大都正常，子宫形态、分泌物一般也没有很明显的变化。如不仔细诊断，很容易被忽视。故及时有效地治疗此类疾病，不仅缩短产犊间隔，而且可以减免浪费性饲养，甚至避免病情进一步恶化的可能。对于此类疾病常规的治疗方法是“子宫灌注抗生素”，但此法只适用于子宫确有炎症，而对于非传染性繁殖疾病（如产后子宫恢复不好或内存滞留液等）却没有作用。本人所采用是加抗生…