细胞培养及避免细胞污染的方法

1细胞培养1.1细胞传代培养当细胞生长至高密度时,即需分瓶至新的培养瓶中,否则就会影响细胞的生长,甚而引起死亡。一般分瓶的稀释比例为1∶3～1∶6,依细胞种类而异。一般步骤是先去除原培养瓶中旧的培养液,用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤细胞2次,加入0.25%胰酶溶液37℃作用数秒至数分钟（时间依不同细胞而异）后,倒置显微镜下观察,当细胞呈圆粒状时,去掉胰酶溶液,加入适量新鲜培养基,以吸管反复吹打瓶壁数次,使细胞脱离瓶壁,均匀悬浮于培养液中。