口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗免疫安全性和抗体消长规律研究

为摸清口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗免疫安全性和抗体消长规律,对试验猪群进行免疫,观察其健康状况,采用口蹄疫非结构蛋白ELISA检测非结构蛋白抗体,采用液相阻断ELISA检测O型和A型口蹄疫抗体。结果显示,疫苗免疫后,猪群健康状况良好,各时间点口蹄疫非结构蛋白抗体均为阴性;免疫前、一免后29 d、61 d、95 d、123 d,二免后30 d、64 d、92 d,A型口蹄疫抗体阳性率分别为7.14%、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%,O型口蹄疫抗体阳性率分别为0、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%。表明该疫苗免疫猪只后,安全性好,不会诱导动物机体产生口蹄疫非结构蛋白抗体,诱导产生的高水平A型、O型口蹄疫抗体可以维持较长时间,实施一免可维持至少4个月,实施二免可维持至少3个月。     

不同猪口蹄疫O型疫苗免疫效果的对比试验

为研究猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果,试验选择40~45日龄保育猪160头,随机分为两组,分别注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗,免疫后25 d采集血清、检测抗体效价。结果表明,合成肽疫苗组抗体合格率为90%,出现应激反应的比例为0;灭活疫苗组抗体合格率为75%,出现应激反应的比例为3.75%。结论:注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗比灭活疫苗的效果好、出现应激反应的仔猪少。     

口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫高效灭活疫苗与猪O型口蹄疫合成肽疫苗免疫28~35日龄商品猪,采用正向间接血凝试验和VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14 d、28 d、35 d、42 d、56 d及二次免疫后7 d、14 d、28 d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射两种疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7 d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%~94.12%。O型口蹄疫灭活免疫抗体不适宜用此检测方法。     

猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫合成肽疫苗与猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫30-40日龄商品猪,免疫采用正向间接血凝试验、液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14d、28d、35d、42d、56d及二次免疫后7d、14d、28d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%-100%。与注射高效灭活苗组比较表明:合成肽疫苗临床使用的安全性较高,免疫抗体合格率明显优于猪O型口蹄疫高效灭活苗。     

最新4种猪口蹄疫O型灭活疫苗及O型-A型二价灭活疫苗免疫效果评估

试验选用政府招标的2家公司生产的猪口蹄疫O型灭活疫苗及猪口蹄疫O型-A型二价灭活疫苗共4种疫苗对健康仔猪按免疫程序进行试验,采用ELISA方法检测不同阶段抗体水平,以期评估不同猪口蹄疫疫苗的免疫效果。试验结果表明,2种O型疫苗免疫21 d后,其抗体阳性率就达70%,二免后抗体效价可达8log2～9log2,抗体合格率高达100%,抗体保护力持久;O型-A型二价灭活苗需2次以上免疫,才能产生较好的抗体保护力度。政府招标购买的疫苗均能产生较好的免疫效果,O型灭活苗免疫效果优于O型-A型二价灭活苗;建议口蹄疫免疫实行二次免疫,间隔28～30 d,必要时进行三免。     

猪O型口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫抗体群体合格率比较

应用口蹄疫病毒VPl结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒测定沈阳地区4家规模猪场O型合成肽疫苗免疫后猪只血清样品的免疫抗体水平,计算群体合格率,并与O型口蹄疫浓缩灭活疫苗免疫后的群体合格率进行比较。结果表明,灭活苗一免、二免后28d免疫抗体群体合格率分别为47．5％、92．5％;合成肽疫苗一免、二免后28d免疫抗体群体合格率分别为92．5％、100％。     

不同毒株制备的两种猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果对比试验

本试验采用2种不同毒株的口蹄疫灭活疫苗分别对120头35日龄仔猪进行了免疫效果试验。结果显示:首次免疫时,猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组。75日龄二免时,使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组。表明两种疫苗各有其优缺点,对不同日龄段仔猪的免疫效果存在一定的差异。     

口蹄疫疫苗对奶牛保护力的研究

本试验比较了口蹄疫三价灭活疫苗（亚洲-I型、A型、O型）与口蹄疫二价灭活疫苗（亚洲-I型、O型）＋口蹄疫A型灭活疫苗对奶牛的免疫效果。选取8～16月龄的荷斯坦母牛300头,随机分为两组,每组150头,分为三价疫苗组及二价疫苗＋A型疫苗组,皮下免疫,三价疫苗免疫组注射剂量为3mL／头;二价疫苗＋A型疫苗免疫组注射剂量分别为3mL／头和2mL／头;免疫后第21天采集尾根动脉血液,利用液相阻断ELISA测定1：7蹄疫亚洲-I型和A型抗体效价,IHA方法测定口蹄疫。型抗体效价。结果显示,口蹄疫亚洲-I型抗体效价在1：128以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗组为55．33％,三价疫苗组为58．00％,差异不显著（P〉0．05）;口蹄疫A型抗体效价在1：128以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗组为56．67％,三价疫苗组为60．00％,差异显著（P〈0．05）;1：7蹄疫。型抗体效价在26以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗免疫组52．67％,三价疫苗免疫组为79．34％．差异极显著（P〈0．01）。     

内蒙古地区牛羊口蹄疫灭活疫苗的免疫效果比较研究

为准确掌握牛羊口蹄疫疫苗免疫效果,2012年对内蒙古自治区的牛羊口蹄疫O—AsiaI型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗免疫效果进行了监测。采用液相阻断ELISA方法。共检测了8个旗县23018份免疫牛羊口蹄疫O—AsiaI型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗15日、30日、60日的血清中口蹄疫免疫抗体水平。结果显示,牛羊口蹄疫疫苗免疫效果总体良好,免疫抗体合格率超过了70％。规模化奶牛养殖场免疫效果稳定,散养地区免疫效果稳定性差,且不同厂家的疫苗免疫效果不同,加强免疫后A、B、D三个厂家抗体合格率能达到100％,C厂家的免疫效果较差,抗体合格率为93-3％。采用3ABC—ELISA检测试剂盒对部分地区牛羊进行感染抗体检测,结果为阴性。     

规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验

为比较猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果,选择健康仔猪134头,选用猪口蹄疫O型合成肽疫苗及由政府招投标的3家公司生产的猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗进行免疫效果试验。经试验,134头健康仔猪在60日龄、90日龄、120日龄分别注射不同种类的疫苗,于免疫后30 d抽取血样进行抗体检测。结果表明,经二免后的抗体合格率均能达到农业部规定的抗体合格率≥70%要求,表明采用O型合成肽疫苗及不同厂家生产的O型Ⅱ灭活疫苗经二免后猪群都能产生良好的抗体保护率。     

Immune Effect of Inactivated Vaccines against Foot-and-Mouth Disease and Their Interference on Differential Diagnosis

Vaccination with inactivated vaccine is an important measure to prevent and control foot-and-mouth disease (FMD), however, the immune effect and antigenic purity of inactivated vaccines are two major concerns for the establishment and evaluation of FMD free zones with vaccination. In this study, four groups of FMD type O and type A bivalent inactivated vaccines from 3 FMD vaccine manufacturers (designated as A, B and C) were selected to inoculate healthy juvenile cattle of FMD free. All cattle were immunized 3 or 4 times at a 1-month interval. Serum samples were collected before and after 1 month of every vaccination to determine the level of antibody to structural protein and non-structural protein. Results：(1) The qualified rates of antibody to structural protein: in group a1 (vaccine from company A, different batches), the antibody qualified rate could reach 100% for type O and type A, respectively after each vaccination. In group a2 (vaccines from company A, same batch), the antibody qualified rates were 36.7%, 98.3% and 100% for type O, and 15%, 86.7% and 100% for type A after the first to the third vaccination, respectively. In group b (vaccine from company B, same batch), the antibody qualified rates were 18.3%, 97% and 100% for type O, and 1.7%, 45% and 53.3% for type A after the first to the third vaccination, respectively. In group c (vaccines from company C, same batch), the antibody qualified rates were 26.7%, 96.7% and 100% for type O, and 21.7%, 71.7% and 100% for type A after the first to the third vaccination, respectively. (2) Antibody positive rate to non-structural protein 3ABC (confirmed with second ELISA test): In group a1, the positive rates were 0.7%, 1.4%, 9.5% and 4.8% after the first to the fourth vaccination, respectively; In group a2 and c, no 3ABC antibody-positive animal was detected after 3 repeated vaccination; In Group b, only one animal with a positive rate of 0.6% was detected after the third vaccination. The antibody qualified rates to the structural protein of FMDV in 3 of the 4 groups were far less than 70% after the primary vaccination, however, those were increased significantly after boost and repeated vaccination. The antigen purity of vaccines in three groups (a2, b and c) can meet the requirement of OIE standard on the FMD vaccine, however, the seroconversion to 3ABC antibody was obvious in animals from group a1 after repeated vaccination, which would cause some extent of interference to differential diagnosis. Also, a combination of a primary screening test and a confirmatory ELISA test can further improve the accuracy of differential diagnosis. This study provides an important scientific basis to make a rational program for establishment and evaluation of FMD free zone with vaccination.     

猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗有效免疫试验初探

为推广猪瘟、猪口蹄疫和高致病性猪蓝耳病3种疫苗有效免疫,在前期开展"猪瘟疫苗(脾淋源)、猪O型口蹄疫疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗有效免疫试验"确定新的免疫程序基础上进行扩大试验,进一步验证猪瘟疫苗1头份免疫剂量足以产生可靠的免疫保护;先免疫接种猪瘟疫苗,1周后免疫接种口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗,二者有明显的协同促进作用,适宜在农村散户中使用;3种疫苗同时分点注射,相互之间干扰较大,猪瘟病毒抗体产生时间推迟,不宜推广使用。     

牛O型、亚洲Ⅰ型口蹄疫疫苗不同免疫次数免疫后群体抗体合格率比较

本研究选取沈阳地区饲养管理正规的牛规模场,采用液相阻断ELISA试验方法测定牛血清样品中O型-亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体水平,并计算免疫抗体的群体合格率。用O型-亚洲Ⅰ型二价苗一免、二免、三免的牛在免后28d时牛O型-亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率研究结果表明,O型口蹄疫免疫抗体群体合格率分别为82.5%、100%、100%;亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率分别为57.5%、97.5%、97.5%。一免后O型和亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率下降速度均较快,一免后60dO型免疫抗体群体合格率降到72.5%,免后80d时O型、亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率分别降为47.5%、12.5%。二免以上的牛口蹄免疫抗体群体合格率在28～120d内均较一免组高,而且抗体持续时间也长,三免后120d时O型、亚洲Ⅰ型口蹄疫免疫抗体群体合格率仍高达77.5%、75%。     

规模奶牛场O型口蹄疫疫苗抗体消长规律研究

[目的]通过免疫抗体监测,掌握其在奶牛体内消长规律;建立适合本区奶牛口蹄疫疫苗常规免疫程序,提高有效免疫保护;探索延平区内两个常用口蹄疫疫苗的抗体产生时间和免疫抗体持续时间,为有效科学免疫,预防口蹄疫疫情提供科学依据。[方法]血样采集使用一次性真空采血管,抗体检测采用液相阻断ELISA检测方法,抗体效价判定依据畜牧兽医主管部门动物疫病监测方案。[试验对象]选择福建省南平市延平区两个分别常年免疫政府采购疫苗（中牧实业）、自行采购疫苗（内蒙金宇）的A、B规模化牛场,各选取一定数量的初生犊牛（犊牛20 头及对应母牛20 头）。[结果]A场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达100%,第四周达到峰值后开始下降,至12周抗体合格率降至50%,确定首免时间为犊牛出生后12 周,首免后第6周抗体合格率降至55%,确定二免时间为首免后第6周;B场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达95%,第四周达到峰值后开始下降,至9周抗体合格率降至55%,确定首免时间为犊牛出生后9 周,首免后第3周抗体合格率降至28%,确定二免时间为首免后第3周。[结论]根据监测试验结果,A场的免疫程序设计为犊牛出生后12 周开始首免,首免后第6周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次;B场的免疫程序设计为犊牛出生后9 周开始首免,首免后第3 周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次。     

猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病疫苗最佳免疫方法研究

为探索生猪重大疫病的科学免疫方法,确定最佳免疫程序,笔者设计并开展了口蹄疫（FMD）合成肽苗（或灭活苗）、猪瘟（HC）脾淋苗、高致病性蓝耳病弱毒疫苗（或灭活苗）的不同组合注射、单独注射、不同疫苗类型注射的试验研究.结果表明：3种疫苗不同组合注射或单独注射,以及使用不同类型疫苗注射,其免疫副反应均无明显差异;平均免疫抗体效价及群体合格率各组间存有差异;采用猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病3种疫苗同时分点注射,以及仔猪首免口蹄疫、猪蓝耳苗,再免疫口蹄疫、猪瘟苗的免疫效果最佳.     

山羊痘灭活疫苗免疫持续期试验

将实验室制备的3批山羊痘油佐剂灭活疫苗,分别免疫接种一定数量无羊痘抗体的山羊,山羊于免疫接种后4.5个月、7个月、9.5个月和12个月用AV40株强毒进行攻击。结果显示,3批疫苗接种的山羊免后4.5个月攻毒均100%保护,免后7个月攻毒平均80%保护,免后9.5个月攻毒平均60%保护。实验表明,此山羊痘灭活疫苗免疫后6个月能够维持较高的抗体水平,其免疫持续期可规定为6个月。     

Dose-response effects of inactivated Newcastle disease vaccines: influence of serologic assay, time after vaccination, and type of chickens

Knowledge of the dose-response relation of inactivated vaccines and of the factors that influence this relation is essential for the evaluation of existing vaccine potency assays and the development of new potency assays that are based on the antigen content of the inactivated vaccines. We quantified the relation between vaccine dose, serologic response, and clinical protection after vaccination for three different inactivated Newcastle disease (ND) vaccines. Qualitatively, similar dose-response curves were obtained for the three vaccines when either the serologic response or the clinical protection of specific-pathogen-free (SPF) chickens was plotted against the different vaccine doses applied. However, the vaccines differed quantitatively: doses of vaccines that induced similar antibody titers or clinical protection differed 2-8-fold. In contrast with the narrow range of antibody titers induced by a full vaccine dose, a very broad range of titers was obtained after dilution of the vaccines. At least 95% of the SPF chickens with detectable antibody in the serum were protected against a challenge with virulent Herts ND virus. The relation between the dosage of two different ND vaccines and the serum antibody titers remained markedly constant between 3 and 18 wk after vaccination. Vaccination of broilers instead of layers with a dilution series of inactivated ND vaccine resulted in significantly lower antibody levels and less clinical protection against virulent challenge. In conclusion, despite quantitative differences, we found comparable dose-response relations for the three inactivated ND vaccines studied.     

肉牛口蹄疫免疫抗体、3ABC抗体、RT-PCR核酸检测结果分析

[目的]为了掌握肉牛口蹄疫免疫抗体检测结果、口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体检测结果、口蹄疫O-P液RT-PCR核酸检测结果三者的相关性,[方法]张掖市动物疫病预防控制中心对甘州区28头肉牛开展相关检测。[结果]检测结果表明:O型口蹄疫免疫抗体合格率28份,合格率100%,3ABC抗体阳性27份,阳性率96.4%;对3ABC抗体阳性的27头牛分2次进行实时荧光RT-PCR核酸检测,被检的27头牛均为阴性。     

不同免疫方式对仔猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫三种疫苗抗体水平的影响

采用不同的免疫方式,对38头36~38日龄健康仔猪进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗进行免疫,分别于免疫前（0 d）和免疫后15、30、45、60、90 d采血进行这3种疫病抗体检测。结果发现效果最好的方法是先免疫猪瘟和口蹄疫疫苗14 d后再免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗;其次是猪瘟疫苗和高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗分别释稀后混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时分点注射;免疫效果最差的是高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗同时分3点注射。