脐带血检测技术在猪瘟等5种生产中重要病毒性疫病上的诊断应用

研究采用荧光RT-PCR/PCR方法,对上海市10个规模猪场524份脐带血进行了猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪流行性腹泻病毒5种猪生产中重要病毒性疫病的病原检测,结果检出阳性率分别为0、0.38%、0.76%、0.19%和0.38%,并根据检测结果进行了临床追溯发现,均一定程度呈现与检出疫病相吻合的临床病症。结果表明,脐带血检测可有效评估生产母猪猪瘟等生产中重要疫病的感染状况,为准确诊断病原、科学制订防疫措施提供了技术支持。     

屠宰猪常见病毒隐性感染情况的监测与分析

为评估常见猪病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对采自13个屠宰场的1 224份健康猪淋巴结、1 194份健康猪扁桃体进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等主要猪病病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内健康猪群中的病原阳性率分别为PRV 7.5%、PRRSV 4.5%、HPPRRSV 1.4%、CSFV 0.2%,表明健康猪群中有部分猪携带有致病性病原。     

2007年猪病诊断回顾和2008年流行趋势预测

1 2007年猪病诊断回顾 2007年笔者共为300多个猪场提供猪病诊断服务,其中病原检测2 400多份、抗体检测18 000多份、饲料检测300多份.现将检测结果(表1)小结如下,供大家参考.     

脐带血检测技术是母仔疾病同防的最佳方案

正胎盘屏障不影响母和仔血的物质和气体交换,但能够阻止母血中大分子物质进入胎儿血液循环。猪胎盘屏障的存在使正常的脐带血内不存在任何病源和抗体等大分子物质。由于仔猪体内缺乏各种疾病的抗体,只要有病原的侵袭,就会在体内迅速而大量的繁殖,通过检测脐带学就可以判断很多疾病。脐带血技术可以快     

2019年平凉地区某猪场猪群口蹄疫、高致病性猪蓝耳病和猪瘟定点监测与分析

目的:为适时掌握平凉地区规模化养猪场口蹄疫、高致病性猪蓝耳病和猪瘟病原感染情况和血清抗体水平。方法:选取平凉地区散养户密集的高风险区猪场,在5月、8月、11月份随机采集猪血清30份,猪扁桃体30份,采用实时荧光定量PCR检测试剂盒检测血清和扁桃体中口蹄疫、高致病性猪蓝耳病和猪瘟核酸,采用ELSIA检测试剂盒检测血清中以上三种病原免疫和非免疫抗体。结果:2019年平凉地区猪群定点监测口蹄疫、高致病性猪蓝耳病和猪瘟病原学监测均为阴性,口蹄疫抗体水平较低,发生该病的风险较高;高致病性猪蓝耳病非免疫抗体较高,猪瘟免疫抗体水平较高。结论:该监测点发生口蹄疫风险较高,应加强口蹄疫免疫和防控,持续定期进行猪瘟和猪蓝耳病病原学监测,适时退出免疫。     

副猪嗜血杆菌、PCV2及PRRSV多联RT-PCR检测方法的建立及其应用

副猪嗜血杆菌(H.parasuis)、猪圆环病毒2型(PCV2)及猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)是引起猪呼吸系统疫病的3种重要病原,根据GenBank中这3种病原的基因组序列,选择基因序列的高保守区,分别设计合成了3对特异性引物进行3种病原的多重PCR,并对反应条件进行优化。利用建立的多重PCR方法,对河北省2012-2013年发生呼吸系统疾病的412份猪病料进行检测,并随机选择其中的57份,同时进行单一PCR检测,以确定2种方法检测结果的符合程度。结果表明,3对引物能特异扩增出大小分别为469,829,219bp的目的条带。灵敏度检测试验表明,H.parasuis,PCV2和PRRSV的最低检测量分别为52.7,335.0,137.0pg。412份临床样品检测结果显示,H.parasuis在2012年的阳性率为44.2%,2013年为45.1%,提示这2年引起猪呼吸道疫病的主要病原是H.parasuis。     

2007年猪病诠断回顾

2007年我们共为300多个场次提供猪病诊断服务,其中病原检测2400多份次、抗体检测18000多份次、饲料检测300多份次。现将我们的检测结果小结如下,供大家参考：     

2007年猪病诠断回顾

2007年我们共为300多个场次提供猪病诊断服务，其中病原检测2400多份次、抗体检测18000多份次、饲料检测300多份次。现将我们的检测结果小结如下，供大家参考：     

宜昌部分地区高致病性猪蓝耳病RT-PCR检测

从宜昌部分地区猪散养户中随机抽取部分猪血样及疑似高致病性猪蓝耳病病例血样共计181份,进行高致病性猪蓝耳病RT-PCR的检测,结果显示23份为阳性。试验初步证明,随机抽取的181头猪中有部分猪感染高致病性猪蓝耳病病原。     

全新的“脐带血”采样方式及其在临床应用中的潜在价值

兽医临床工作中,因哺乳动物胎盘屏障的缘故,正常的“脐带血”中是没有病原体和抗体物质的,因此,临床工作中,利用“脐带血”这个部位来检测病原和抗体,确定相关病原是否感染,在临床中有较好的应用价值。     

新疆规模化屠宰场猪肺炎支原体感染的检测分析

为了解新疆猪支原体肺炎的流行及其与其他病原混合感染的情况,对新疆5个规模化屠宰场进行了调查,采用28分评分法对913份肺脏进行猪支原体肺炎病变评分,选取其中高于10分的病变肺脏进行猪肺炎支原体(Mhp)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和胸膜肺炎放线杆菌(APP)的检测。结果:913份肺脏中,猪肺炎支原体阳性730份,阳性率为80%(730/913);评分高于10分的肺脏77份,其中Mhp与PRRSV、PCV2或APP的混合感染率为57.1%。检测结果表明新疆地区猪肺炎支原体感染率较高,且存在多种病原的混合感染。     

2019年河南省猪繁殖与呼吸综合征抗体与病原监测

为了解2019年河南省猪群猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）免疫抗体水平和病原流行情况，对河南省3 231场次的108 070份猪血清和714场次的18 746份猪组织样品，分别进行免疫抗体和病原学检测，并按季节、区域和场点类别，对检测结果进行了统计分析。抗体检测结果显示：2019年河南省平均个体免疫合格率为83.53%，场群免疫合格率为90.75%；不同季节、不同区域和不同场群的抗体水平均在70%以上，但散养户（70.21%）水平偏低。病原检测结果显示：2019年河南省个体病原阳性率为0.99%，场群病原阳性率为4.06%；一年四季均有病原检出，且春季阳性率最高；豫北地区个体和场群的病原阳性率均最高，而豫西地区未检出病原；无害化处理厂和散养户的病原阳性率较高。结果表明：河南省猪群PRRS免疫效果良好，但应加强散养户猪群的免疫；病原具有一定的时间、空间和群间分布特征，可依据其分布特点和规律，分类指导防控，以种猪场为中心，梯度推进净化工作。     

猪猝死症4种重要病原多重连接探针扩增鉴别检测技术的建立与应用

为了快速检测引起猪猝死的病原,本研究针对临床引起猪猝死症的4种疾病病原(猪尼帕病毒、非洲猪瘟病毒、猪产气荚膜梭菌和猪胸膜肺炎放线杆菌)分别设计特异性探针,建立了同时检测这4种病原的多重连接探针扩增技术(MLPA)。对扩增产物进行毛细管电泳分析,结果显示该方法,探针之间没有交叉反应,特异性强。对不同病原核酸的最低检测限可以达到140拷贝μ/L～370拷贝μ/L,敏感性较高。应用该MLPA方法对129份临床样品进行检测,并与国家相关标准进行比较。结果显示,两种方法的符合率为100%,且该方法检测猪产气荚膜梭菌和猪胸膜肺炎放线杆菌的特异性和敏感性均达到100%,Kappa值均为1。该方法的检测结果与国家或行业标准PCR的检测结果一致性较高,且克服了后者无法同时进行多重检测的缺点,最多可以同时检测45种病原,对于复杂症候群的快速和高通量检测具有重要临床意义。该方法可推广到其它多重病原体的检测中,显示出广阔的应用前景。     

天气异变致母猪流产的诊断与分析

为了诊断云南曲靖区域2015年12月份母猪流产的原因,笔者对云南省曲靖市2个出现母猪流产现象的规模化猪场进行调查,采集流产胎儿脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结等组织器官和母猪血清,进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪细小病毒病的病原核酸检测,对母猪血清进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬抗体检测和流行病学调查。结果表明:猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪细小病毒病的病原核酸均为阴性,正常母猪和流产母猪猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬血清抗体基本一致。说明2015年12月份曲靖区域母猪流产主要原因为天气异变。     

2017年河南省病死猪常见病原分布调查

为了解河南省病死猪常见病原分布规律,采用横断面研究方法,对2017年河南省病死猪常见病原分布情况进行调查。以病死猪聚集地——无害化处理厂为采样单元,按病死猪体重进行分层抽样,采集不同阶段病死猪的扁桃体、淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏等样品进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、副猪嗜血杆菌（HPS）和弓形虫（TP）的病原学检测,并对检测结果进行时间、空间和群间分布分析。结果显示：共检测样品526份,未检出FMDV、TGEV和PEDV,其他7种病原的检出率在0.76%~58.17%之间;春夏季节检出的病原种类较多,检出率也较高,秋冬季较少;不同区域病原种类分布情况差异较大,豫西检出病原种类最少,豫中检出病原种类最多,不同区域内各病原检出率差异较大;不同体重猪群的病原种类数量有差异,体重越小,检出病原种类越多。调查结果表明,河南省常见猪病病原复杂,不同区域、不同季节、不同生长阶段猪群的病原流行情况并不一致,需通过加强监测,制定相应的防控措施。     

怀化市屠宰场常见病毒隐性感染情况的监测与分析

为了评估怀化市屠宰场健康猪群病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对市内2个屠宰场共360份健康猪扁桃体进行了口蹄疫病毒(FMDV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)等主要猪病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内外观健康猪群中的病原阳性率分别为PCV2 82.78%、PRRSV 13.61%、HP-PRRSV 3.89%、PRV 3.89%、FMDV 3.06%、CSFV 0。表明健康猪群中携带PCV2比较普遍,其他病原也有一定的携带率。     

川渝地区患病猪群中伪狂犬病毒感染情况的检测

为了了解川渝地区猪伪狂犬病的感染情况,利用PCR的方法,对川渝地区2012年9月份至2013年9月份期间的32个猪场采集的54份病料进行了猪伪狂犬病毒（PRV）的检测。结果显示共有10份病料呈阳性,占所检样品的18.5%。这说明目前川渝地区发病猪群中猪伪狂犬病毒是一个非常重要的病原。     

四川部分猪场PEDV、TGEV、GARV和PKV感染状况调查

为了解四川省部分猪场4种猪腹泻病毒的感染情况,为本地区猪腹泻的诊断和治疗提供依据,采用RT-PCR方法,分别对来自四川省成都、绵阳、德阳、眉山、资阳、雅安、内江、宜宾、达州等地9个规模化猪场的90份临床健康猪和130份腹泻猪的粪便样品,进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪嵴病毒(PKV)和猪A群轮状病毒(GARV)的检测。结果表明,在所有9个猪群中PEDV和PKV检出率达100%(9/9),且在部分猪群腹泻样本中的检出率可达到60%以上,表明此2种病原在检测猪场感染比较普遍。此外腹泻样本中TGEV和GARV阳性率分别为11.54%(15/130)、7.69%(10/130),表明该2种病原在本地区猪场仍有感染情况存在。对PKV的检测结果表明腹泻猪粪便中PKV的阳性率为43.85%(57/130),显著高于外表健康猪粪便样本23.33%(21/90),且PEDV和PKV的混合感染在4种病原混合感染类型中所占比例最大,推断PKV与猪只腹泻具相关性,PEDV和PKV具有协同致病的可能。     

猪蓝耳病与副猪嗜血杆菌感染的相关性分析

众所周知,副猪嗜血杆菌(HPS)被称为猪蓝耳病(PRRS)的影子病,但极少有文献报道二者之间相关性的确切数据。为了解同一猪只PRRSV与HPS感染的相关性,遂对江苏省农科院动物疫病诊断检测中心2017年5-8月份临床接诊的32份猪样品同时进行PRRSV和HPS的检测。结果显示:32份样品的PRRSV病原阳性率为37.5%(12/32),HPS检出率为28.1%(9/32),二者共同感染率为58.3%(7/12),即58.3%的PRRSV感染猪分离到HPS,而只有10%的未感染PRRSV猪分离到了HPS,同时,77.8%分离到HPS的样品为PRRSV病原阳性,检测结果表明:副猪嗜血杆菌(HPS)被称为猪蓝耳病(PRRS)的影子病是"实至名归",为江苏省PRRS和HPS的防控提供了流行病学数据。     

2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发流行性腹泻的调查

2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发腹泻,通过在山西太原、祁县、介休、昔阳、临汾、翼城、离石、朔州8个地市的10个临床表现腹泻症状的规模化种猪场进行调研,对乳猪病死情况进行了统计分析,并采集39份病死猪的小肠内容物进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)检测;同时采集109份血清和85份乳汁进行PEDV IgA抗体检测。结果显示:1—3月份10个猪场共有8 326头乳猪发生腹泻,死亡6 266头,死亡率为75.26%;病原检测PEDV阳性率为64.1%,TGEV阳性率为2.56%;血清中PEDV IgA抗体的阳性率为32.11%,乳汁中PEDV IgA抗体的阳性率为96.47%。病原检测结果表明,2016年春季山西省规模化种猪场乳猪腹泻的主要病原为PEDV,乳汁中PEDV IgA抗体水平与PEDV疫苗免疫效果或野毒感染呈正相关。