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腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定 总被引:36,自引:8,他引:28
从1997年在辽宁省大连市某鸡场发生的一种以腺胃肿大为特征的鸡的传染病病例中收集腺胃组织(D971)接种SPF鸡胚,传至13代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID50为10-6.48/0.2ml。D971毒株感染SPF鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为80~120nm,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。D971毒株经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能特异的被D971多抗所抑制。用反转录聚合酶链反应获得了D971毒株免原(S1)基因cDNA,经1%琼脂糖凝胶电泳可见1.7kb的特征性条带。用D971毒株接种SPF鸡,能引起与自然病例相似的病理变化,并分离到病毒。用D971毒株可直接感染SPF鸡胚成纤维细胞。结果证实从腺胃病变型IB鸡群中分离的D971毒株是冠状病毒科IBV成员。 相似文献
2.
鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定 总被引:8,自引:0,他引:8
19份鸡传染性支气管炎可疑病料通过SPF鸡和鸡胚感染试验,血凝试验,气管环培养感染试验,单克隆抗体ELISA和电镜形态学观察,初步证明其中13份病料含IB病毒,在用其中9份接种8-9周龄SPF鸡进行的发病试验中,全部呈现临床症状,其中3份引起高死亡率(60-80%),接种后5周从存活鸡采血作IBV血凝抑制试验,结果均为阳性。 相似文献
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表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免?… 总被引:3,自引:0,他引:3
以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因的重组鸡痘病毒FPV-VP2,该病毒性在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒,经翅皮下5×10^5PFU/羽免疫1日龄SPF鸡,免疫后4周以100LD50/羽IBDV超强毒株G株攻毒,获得了5/6的保护,但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩,实验结果证明了VP2是IBDV的宿主保护性抗原,提示T细胞介导的免疫可能在IBDV 相似文献
4.
用三种不同鸡传染性法氏囊病强毒株,对BWEL-SPF鸡群1-10个家系3周龄鸡进行敏感性试验,观察比较鸡群各家系对不同敏感性,测定不同毒株的毒价。广西强毒株(IBDV-GX株)〈LD50为10^5.0/0.2ml;湖南强毒株,LD50为10^5.2/0.2ml;吉林强毒株(IBDV-JL株),LD50为10^5.5/0.2mml,以100LD50攻毒剂量,对BWEL-SPF鸡1 ̄10家系的致死率为 相似文献
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表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因的重组鸡痘病毒FPV-VP2,该病毒在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒,经翅皮下5×105PFU/羽免疫1日龄SPF鸡,免疫后4周以100LD50/羽IBDV超强毒株G株攻毒,获得了5/6的保护,但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩。实验结果证明了VP2是IBDV的宿主保护性抗原,提示T细胞介导的免疫可能在IBDV的免疫中起着较为重要的作用。本研究为IBDV重组病毒疫苗研制进行了有益探索。 相似文献
6.
腺胃病变型鸡传染病支气管炎病毒分离株(IBV—D971)对SPF?… 总被引:3,自引:1,他引:2
用腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒分离株IBV-D971毒株接种1日龄SPF鸡,可引起60%死亡。该毒在SPF鸡体传2代后,接种1日龄SPF鸡,可引起100%死亡。对人工感染病例进行了系统的病理学观察,主要的眼观病理变化为腺胃胃壁增厚,乳头消失或乳扁平,乳头顶部凹陷坏死,肾肿大,尿酸盐沉积。 相似文献
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应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
用鸡传染性贫血病病毒(CIAV)MSBI-TK5803毒株感染的MDCC-MSB;细胞涂片为抗原,建立了检测CIAV抗体的间接免疫荧光法(IIFA)。应用该IIFA方法对人工感染的SPF鸡进行了检测15只1日龄SPF鸡在接种后第7、14天时均呈阴性反应;21天时2只鸡呈弱阳性反应,28天时均呈弱阳性反应,21天时2只鸡呈弱阳性反应,28天时均呈弱阳性反应,35天时呈明显阳性反应;14只40日龄SP 相似文献
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1997年3月下旬,上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫,通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果:感染鸡群产蛋下降的幅度可高达50%;新城疫HI抗体滴度高达12log2或以上;用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒(NDV),初代尿囊液的ELD50为10-7.5(0.2mL),1日龄SPF鸡胚脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄SPF鸡静脉接种致病指数(IVPI)分别为1.725和2.32,其毒力接近标准毒株—NDV北京株F48E9。 相似文献
10.
我们对国外引入的IBD弱毒疫苗进行了分离,复制和测定,该病毒可接种SPF鸡胚增殖,致难胚死亡,并产生IBD病变;在SPF鸡胚CFF上繁殖,产生CPE变化,并可被行异性IBD抗血清中和;琼脂扩散与IBD(+)血清有明显的沉淀线,因此说明所分离的毒株是IBD病毒,并测得其毒价为10^-6TCID50。 相似文献
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鸡肾病变型传染性支气管炎病毒分离及免疫的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
对自然发生的鸡肾病变型传染性支气管炎病例,进行了流行病学及病理化方面的检验。以新鲜病死鸡肾脏为材料,通过接种易感发育鸡胚尿囊腔的途径,进行病毒的分离与传代,分离到5株病毒(分别记作IVB-HQC9601、IBV-HQC8604、IBV-HQL9606、IBV-HQC9610、IBV-HTL9611),经初步检验及对易感鸡的感染发病试验,表明为鸡肾病变型传染性气管炎病毒。用鸡肾病变型传染性气管炎T毒株分离毒株,制备灭活疫苗,初步试验表明具有良好的特异免疫保护效果。 相似文献
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应用RT—PCR技术扩增禽传染性支气管炎病毒S1基因的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
选择S1基因做为目的基因,运用RT-PCR技术分别扩增12株以非免疫鸡胚繁殖并通过超速离心浓缩的鸡胚尿囊液中的IBV,所用引物为IBV Beaudette株S1基因两侧的对应序列,跨幅为1.72kb。结果6株IBV毒株(SAIB3、F、D41、H52、Holte)扩增出了长约1.7kb的S1基因片段,而另6株IBV毒株虽经4次RT-PCR重复后也显阴性。用HaeⅢ内切酶对6个毒株的RT-PCR产物 相似文献
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新城疫V4株弱毒变种的选育 总被引:1,自引:0,他引:1
应用有限稀释法通过SPF鸡胚传代,从新城疫V2弱毒中克隆出一个变各,即20代以后的继代毒,命名为新城疫V4克隆20弱毒株,(ND-V4C20)。毒以10^-1-10^13×0.1ml接种10日龄SPF鸡胚尿囊腔150小时内,鸡胚极少死亡。每个滴度5个胚有尿液均可凝集鸡红血球。第10代和第20代的每个滴度5个胚有的混合尿液以10^-6×0.5ml一次饮水免疫鸡,即能引起HI抗体反应,也能抵抗新城疫强 相似文献
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从疑似IBD病鸡的法氏囊组织中分离到1株ARV 总被引:5,自引:2,他引:3
从暴发类似传染性法氏囊病(IBD)的江苏省某鸡场采集病鸡法氏囊组织制成组织悬液,接种鸡胚卵黄囊,部分鸡胚3~5d死亡,部分鸡胚不死亡但有病变。用感染胚卵黄囊和绒尿膜混合物,接种鸡胚成纤维细胞(CEF),盲传3代后,发现以合胞体为特征的细胞病变(CPE)。感染细胞做超薄切片电镜观察,可见细胞浆内病毒粒子呈整齐的晶格状排列。用免疫沉淀法提取病毒抽提核酸,经SDS-PAGE电泳,可见规律排列的10条带,呈3-3-1-3排列。与禽呼肠孤病毒(ARV)参考毒株S1133株的核酸谱带的数目和位置相同。血清学试验与ARV呈阳性反应,与传染性法氏囊病病毒(IBDV)呈阴性反应。证明分离病毒为ARV 相似文献
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用传染性喉气管炎(ILT)强毒株感染10个家系150日龄BWEL-SPF鸡,观察比较临床症状和剖检所见病变;用传染性支气管炎(IB)强毒株和新城疫(ND)疫苗株分别接种这10个家系的鸡胚,收获胚液并测定其毒价,从而评估这三种呼吸道病毒在每个家系鸡或鸡胚上的敏感性。 相似文献
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鸽新城疫病毒的分离及其生物学特性测定 总被引:18,自引:0,他引:18
用SPF鸡胚从疑似鸽新城疫(鸽ND)病鸽群中分离到一株病毒QL株,该病毒株能凝集鸡红细胞(RBC),这种凝集作用能被抗新城疫病毒(NDV)阳性血清抑制;用抗NDV单抗PEG夹心ELISA测定分离株为阳性。分离株经肌肉注射能使鸽发病和死亡,出现与自然发病鸽一致的症状和病变,但肌注SPF鸡只感染,不见临床症状。对该分离株作进一步生物学特性鉴定,按照国际上规定的NDV毒力判定标准,测定了该毒株最低致死量致死鸡胚的平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄雏鸡静脉接种致病指数(IVPI),结果MDT为105小时、ICPI为1.33、IVPI为1.0。试验结果表明本分离株为鸽新城疫病毒。 相似文献
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鸡胚气管环纤毛对不同类型AIBV毒株的敏感性 总被引:3,自引:0,他引:3
以鸡胚气管环纤毛运动作指示系统,应用鸡胚气管环组织培养不同血清型的7个标准AIBV毒株及5个不同致病型的分离毒株。采用50CD50病毒量IBV毒株感染鸡胚气管环培养物,观察感染后不同时间气管环纤毛的存活率。结果表明,鸡胚气管环纤毛对不同血清类型的AIBV毒株敏感性各具特征。 相似文献
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选择S1基因做为目的基因,运用RT-PCR技术分别扩增12株以非免疫鸡胚繁殖并通过超速离心浓缩的鸡胚尿囊液中的IBV,所用引物为IBVBeaudette株S1基因两侧的对应序列,跨幅为1.72kb。结果6株IBV毒株(SAIB3、F、D41、M41、H52、Holte)扩增出了长约1.7kb的S1基因片段,而另6株IBV毒株虽经4次RT-PCR重复后也显阴性。用HaeⅢ内切酶对6个毒株的RT-PCR产物进行酶切,结果显示M41、H52、D413个IBV毒株的S1基因包含两个HaeⅢ位点,F株与Holte株S1基因包含1个HaeⅢ位点,而SAIB3株S1基因则已丢失HaeⅢ位点。实验结果表明:运用RT-PCR技术检测IBV时,由于S1基因的核酸序列具有较高的变异率,因此S1基因不宜做为目的基因。 相似文献