注入辣根过氧化物酶及兔巴氏杆菌后兔圆小囊的形态学研究

３０ 只２ 月龄健康兔,随机分为三组,活体结扎圆小囊,分别注入辣根过氧化物酶（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ, Ｈ Ｒ Ｐ）、兔巴氏杆菌等抗原及生理盐水（对照组）后,于收稿日期：１９９９０５１０基金项目：中国国家自然科学基金资助项目（３９８７０５８４） 不同时间剖杀取材,观察圆小囊的形态学变化。结果表明：注入示踪物质后１ ｈ,兔圆小囊圆顶上皮同普通粘膜上皮融合,圆顶及滤泡中淋巴细胞减少,后期,深部淋巴组织及滤泡中细胞排列疏松,生发中心淋巴细胞成片排空,呈“星空”样变;圆顶上皮内淋巴细胞增多。扫描电镜下,粘膜上皮及圆顶上皮细胞间连接松散,圆顶上皮的 Ｍ细胞减少。 Ｈ Ｒ Ｐ组粘膜表面及圆顶表面有较多渗出物,损伤较轻;巴氏杆菌组粘膜上皮及圆顶上皮损伤严重,呈现不规则的微孔和严重出血;粘膜上皮局部可见固有膜裸露,圆顶变性、坏死、脱落。圆顶淋巴组织中巨噬细胞明显增加。试验结果表明,注入 Ｈ Ｒ Ｐ后,免圆小囊主要表现为以防御为主的形态学变化;而注入兔巴氏杆菌后,兔圆小囊主要表现以损伤为主的形态学改变。     

注入辣根过氧化物酶及巴氏杆菌后兔圆小囊的细胞化学研究

30只2月龄健康兔，随机分为3组，活体结扎圆小囊，分别注入辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase，HRP）、兔巴氏杆菌等抗原及生理盐水（对照组）后，于不同时间剖杀聚材，观察圆小囊的细胞化学变化，并对其上皮内淋巴细胞及杯状细胞数量变化进行了统计分析。结果表明：注入HRP及兔巴氏杆菌后，均可见到圆顶表面贴附一层PAS阳性反应物，并且在圆顶上皮被包裹的细胞中可见少数阳性细胞，小囊内淋巴组织中阳性反应物增多。研究采用Gomorl技术，对圆小囊的碱性磷酸酶的分布进行了观察，发现对照组及HRP组圆小囊黏膜上皮碱性磷酸酶活性均较弱，圆顶上皮呈阴性。硝酸银反应进一步证实了在动物的肠道淋巴组织中存在嗜银细胞，注入示踪物后可见圆小囊内嗜银细胞显著增加，弥散于淋巴组织内，在滤泡处呈片状分布。同时，圆小囊圆顶两侧黏膜上皮内淋巴细胞及杯状细胞的数量在总体上呈增加趋势，但HRP组较巴氏杆菌组更为明显。注入HRP及兔巴氏杆菌后所引起的圆小束的组织细胞化学的不同结果提示，圆小囊的主要功能不是吸收营养物质，它对上述两种不同抗原的刺激有不同的反应机制并且圆小囊内嗜银细胞的数量变化与兔肠道黏膜局部免疫有一定关系。     

注入外源性抗原后兔圆小囊的形态学研究

３０ 只２ 月龄健康兔,随机分为 ３组,活体结扎圆小囊,分别注入辣根过氧化物酶（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ, Ｈ Ｒ Ｐ）、兔巴氏杆菌等抗原及生理盐水（对照组）后,于不同时间剖杀取材,观察圆小囊的形态学变化。结果表明：注入示踪物质后１ ｈ,兔圆小囊圆顶上皮同普通粘膜上皮融合,圆顶及滤泡中淋巴细胞减少,后期,深部淋巴组织及滤泡中细胞排列疏松,生发中心淋巴细胞成片排空,呈“星空”样变;圆顶上皮内淋巴细胞增多。扫描电镜下,粘膜上皮及圆顶上皮细胞间连接松散,圆顶上皮的 Ｍ细胞减少。 Ｈ Ｒ Ｐ组粘膜表面及圆顶表面有较多渗出物,损伤较轻;巴氏杆菌组粘膜上 皮及圆顶上皮损伤严重,呈现不规则的微孔和严重出血;粘膜上皮局部可见固有膜裸露,圆顶变性、坏死、脱落。圆顶淋巴组织中巨噬细胞明显增加。试验结果表明,注入 Ｈ Ｒ Ｐ后,兔圆小囊主要表现为以防御为主的形态学变化;而注入兔巴氏杆菌后,兔圆小囊主要表现以损伤为主的形态学改变。同时,还揭示 Ｈ Ｒ Ｐ 除可以通过圆顶上皮进入深部淋巴组织外,还可能通过粘膜上皮细胞的间隙进入固有膜,再由固有膜进入粘膜下淋巴组织。     

兔圆小囊及肠道组织中抗菌肽的免疫组织化学和免疫电镜细胞化学定位

采用免疫组织化学和免疫电镜细胞化学技术观察了兔圆小囊及其他肠道组织中产抗菌肽细胞的分布定位。免疫组织化学观察发现,产抗菌肽细胞在兔圆小囊的黏膜上皮、圆顶上皮以及淋巴组织的滤泡生发中心、圆顶区和帽区均有分布;在兔感染多杀性巴氏杆菌后,圆小囊及其他肠道组织中的抗菌肽免疫组织化学阳性细胞数量明显增多,阳性反应增强。免疫电镜细胞化学观察结果显示,除肠道黏膜上皮细胞、异嗜性白细胞、巨噬细胞中存在抗菌肽免疫组织化学阳性反应信号外,在淋巴细胞内也发现阳性反应信号,尤其是在圆小囊淋巴组织中的DNES细胞内发现抗菌肽免疫组织化学阳性反应信号。表明圆小囊的DNES细胞和淋巴细胞均可产生抗菌肽。     

兔圆小囊免疫功能及其与肠道粘膜局部免疫关系的研究 Ⅳ.实验性感染肠球虫兔的圆小囊上皮间淋巴细胞及杯状细胞定量观察

本研究对半月龄、５周龄和２月龄兔口服感染４种兔肠球虫后，圆小囊绒毛粘膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞以及圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞的数量变化情况进行了观察分析。结果表明：感染后，５周龄组第４天、第５天圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞、２月龄组绒毛粘膜上皮间淋巴细胞显著增加，其余组上皮间淋巴细胞同对照组相比，差异不显著。杯状细胞数量的变化呈现相对的不规律性：半月龄组和５周龄组圆顶两侧粘膜上皮间杯状细胞数量呈增加趋势，而在２月龄组和５周龄组绒毛粘膜上皮间杯状细胞数量则呈减少趋势。这些结果表明，圆小囊的局部细胞免疫机制可能在机体抗球虫免疫中起着非常重要的作用。     

兔圆小囊免疫功能及其与肠道粘膜局部免疫关系的研究：Ⅳ.实验性…

本研究对半月龄，５周龄和２月龄兔口服感染４种兔肠球虫后，圆小囊绒毛粘膜上皮间淋巴细胞和怀状细胞以及圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞和怀状细胞的数量变化情况进行了观察分析。结果表明：感染后，５周龄组在，第５天圆顶两侧粘膜上皮间淋巴细胞、２月龄组绒毛粘膜上皮间淋巴细胞显著增国中，其余组上皮间淋巴细胞同对照组相比，差异不显著。怀状细胞数量的变化呈现相对的不规律性；半月龄组和５周龄组圆顶两侧粘膜上皮间杯状细胞数     

感染球虫兔圆小囊淋巴组织内嗜银细胞的观察

用硝酸银反应法对15、35和60日龄健康兔及同日龄感染艾美球虫兔圆小囊内的嗜银细胞的分布进行了初步观察。结果表明，随着健康兔日龄 的增大，圆小囊内嗜银细胞从无到有、从少到多；而同日龄兔感染球虫后的嗜银细胞数量增多，并成群成片出现于淋巴组织各处。表明嗜银细胞的出现及数量变化除了与兔日龄有关外，还与兔受到抗原刺激密切相关，即圆小囊内嗜银细胞的数量变化与兔肠道黏膜局部免疫有一定关系。提示嗜银细胞可能与弥散神经内分泌系统（DNES）有关。     

兔淋巴球囊和盲肠的组织学与组织化学及机能探讨（Ⅰ）

用组织学与组织化学法证明：兔淋巴球囊由圆球囊与盾形淋巴团组成。其结构如肠壁，但粘膜下层充满淋巴集结。Ａｌｉｃｉａｎ蓝ＰＡＳ法显示，粘膜上皮柱状细胞含中性糖类，杯状细胞分泌酸性糖类，淋巴集结分泌中性糖类物质。淋巴球囊主要行使体液免疫与消化吸收功能。兔盲肠有发达的螺旋形皱襞，行发酵、消化、吸收的功能，且与软粪形成及食粪癖（ｃｏｐｒｏｐｈａｇｙ）相关。     

绵羊自然感染贝氏莫尼茨绦虫对小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化

运用组织学和组织化学染色法,分别对自然感染贝氏莫尼茨绦虫的成年绵羊（感染组）与正常成年绵羊（对照组）的小肠各肠段的上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞的分布和数量变化进行了比较研究。结果显示：感染组小肠各段上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞数量均显著高于对照组,其中感染组十二指肠、空肠和回肠的上皮内淋巴细胞数量分别比对照组增加了169.11%、230.38%和233.42%（P〈0.01）;嗜酸粒细胞数量分别比对照组增加了116.78%、123.87%和164.51%（P〈0.01）;浆细胞数量分别比对照组增加了127.34%、72.97%和328.26%（P〈0.01）;杯状细胞数量分别比对照组增加了33.40%、41.42%和133.17%。对照组和感染组上皮内淋巴细胞和杯状细胞从十二指肠到回肠均逐渐减少,相反,对照组和感染组嗜酸粒细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多,对照组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到空肠增加,空肠到回肠减少,感染组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多;对照组十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞、上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）;感染组十二指肠、空肠、回肠的上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）,感染组上皮内淋巴细胞空肠与回肠差异极显著（P〈0.01）,但十二指肠与空肠差异不显著（P〉0.05）。研究结果表明,贝氏莫尼茨绦虫感染成年绵羊后,成年绵羊通过特异性黏膜免疫细胞上皮内淋巴细胞增生加强细胞免疫水平,浆细胞增生加强体液免疫水平,同时还通过非特异性黏膜免疫细胞,嗜酸粒细胞和杯状细胞的增生进一步加强黏膜免疫水平以抵抗贝氏莫尼茨绦虫对绵羊的感染。可见绵羊可以通过黏膜免疫相关细胞增生加强局部免疫力以监视虫体免疫逃逸来抵抗寄生虫的感染。     

感染巴氏杆菌的兔蚓突、圆小囊组织病理学观察

试验应用常规石蜡切片,HE染色,对感染兔多杀性巴氏杆菌的蚓突、圆小囊这两个兔所特有的肠道淋巴组织进行组织病理学观察。结果表明：蚓突的病变主要在黏膜层,黏膜上皮细胞脱落、淋巴细胞增生、固有层毛细血管充血、肠腺内有细胞分化增生;间区内血管充血。圆小囊的病变主要也是在黏膜层,黏膜上皮细胞脱落、淋巴细胞增生、固有层毛细血管充血严重、肠腺大量增生、肠腺内有细胞分化增生;间区内血管充血。这些病变对研究兔巴氏杆菌病有重要意义。     

貉,蓝狐,银狐的胃及十二指肠内嗜银细胞形态分布的研究

本文应用Ｆｏｒｔａｎａ—Ｍａｓｓｏｎ嗜银颗粒染色法研究了貉、蓝狐、银狐的胃及十二指肠内嗜银细胞的形态分布。结果表明：三种动物胃幽门腺中，嗜根细胞数量最多，呈锥状，嗜银颗粒较粗，密度大、染成深黑色。在胃底及胃贲门腺区、嗜银细胞数量少。在十二指肠部嗜银细胞呈蝌蚪形，嗜银颗粒细，呈黑褐色，密度较小。嗜银细胞的分布密度在三种动物中具有一定的差别。     

巴氏杆菌弱毒苗和鸡新城疫弱毒苗饮水免疫蛋鸡后分泌型免疫球蛋白A细胞的分布

用巴氏杆菌弱菌苗和鸡新城疫弱毒苗通过饮水分别免疫１２月龄的蛋鸡，以葡萄球菌Ａ蛋白—辣根过氧化酶（ＳＰＡＨＲＰ）和兔抗鸡分泌型免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）间接组化染色，显示消化道相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）、呼吸道相关淋巴组织（ＲＡＬＴ）及脾中ＳＩｇＡ细胞的产生和分布。结果显示：巴氏杆菌弱毒菌苗免疫组的蛋鸡在十二指肠和盲肠扁桃体中ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后３５天出现较多，并一直持续增加到首免后５６天。鸡新城疫弱毒苗免疫组的蛋鸡的ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后２８天数量明显增多，首免后３５天达最高峰。呼吸道和脾中同时也出现较多的ＳＩｇＡ阳性细胞。     

巴氏杆菌弱毒苗和鸡新城疫弱毒苗饮水免疫蛋鸡后分泌型免疫球 …

用巴氏杆菌弱菌苗和鸡新城疫弱毒苗通过饮水分别免疫１２月龄的蛋鸡，以葡萄球菌Ａ蛋白－辣根过氧化酶（ＳＰＡ－ＨＲＰ）和兔抗鸡分泌免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）间接组分染色，显示消化道相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）呼吸道相关淋巴组织（ＲＡＬＴ）和脾ＳＩｇＡ细胞的产生和分布，结果显示：巴氏杆菌弱毒苗免疫组的蛋鸡在十二指肠和盲肠扁桃体中ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后３５天出现国多，并一直持续增加到首免后５６天，鸡新城疫弱毒苗     

大肠埃希菌感染对家兔圆小囊组织结构及VIP表达的影响

应用组织病理学、免疫组织化学等方法,探讨大肠埃希菌感染对实验兔圆小囊的组织病理学损伤及血管活性肠肽(VIP)在兔圆小囊组织内的分布。结果显示,与对照组相比,感染组圆小囊黏膜层出现了明显的病理性损伤,黏膜下层淋巴滤泡的长度极显著变短(P0.01)。免疫组织化学染色结果显示,感染组兔圆小囊组织中的VIP的表达显著高于对照组(P0.05)。上述结果表明,大肠埃希菌感染可引起兔圆小囊组织结构明显的病理损伤,并导致圆小囊组织中VIP的表达明显增多。     

家禽肠道黏膜的作用及保护

家禽肠道黏膜由黏膜上层、固有层和黏膜肌层构成。黏膜上皮为单层柱状上皮,上皮细胞之间分布有许多杯状细胞,还有银亲合细胞,特别是十二指肠前段,这种细胞更多。固有膜由含有较多细胞成分的结缔组织构成,其中有血管、神经和肠腺,有时还有弥散性淋巴组织,在局部     

滑鼠蛇肠道组织结构及杯状细胞和嗜银细胞分布特点

为揭示滑鼠蛇(Ptyas mucosus)肠道黏膜组织结构以及杯状细胞和嗜银细胞的分布特点和规律，本试验制作肠道石蜡切片，通过苏木精-伊红(H.E.)染色、过碘酸-阿利斯新蓝(AB-PAS)染色和Grimelius嗜银染色方法阐明滑鼠蛇肠壁显微结构和特殊细胞型的分布特点。H.E.染色结果显示，滑鼠蛇肠壁结构分为4层，从内到外依次是黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层；黏膜上皮主要由柱状细胞和杯状细胞组成，肠皱襞发达，肠绒毛数量和长度在前肠、中肠、后肠呈递减趋势，且各组间差异显著(P<0.05);前肠肌层最厚，显著高于中肠和后肠(P<0.05),中肠与后肠相比差异不显著(P>0.05)。AB-PAS染色结果显示，杯状细胞镶嵌在柱状细胞之间，其数量在前肠、中肠和后肠中逐渐增加，且各组间差异显著(P<0.05)。Grimelius银染结果显示，嗜银细胞形状多样，分布在黏膜上皮基部和上皮细胞之间，在各段肠壁内均有分布，其数量在前肠、中肠和后肠中呈递增趋势，且各组间差异显著(P<0.05)。本试验结果可为滑鼠蛇消化生理学研究和野生资源保护提供参考。     

脑炎原虫病兔免疫器官的病理形态学观察

研究脑炎原虫病兔外周免疫器官的形态学变化,采集20只病兔和12只对照兔的淋巴结、脾脏和圆小囊,通过临床检查,病理剖检,病理切片的HE染色、吉姆萨染色和免疫组织化学染色进行了比较观察。结果表明病兔淋巴结内的淋巴小结数量增多,生发中心明显,髓索增粗,副皮质区增宽。脾脏的脾小结增多,变大,具有明显的生发中心,边缘区明显增宽,动脉周围淋巴鞘明显变大,聚集大量淋巴细胞。圆小囊的淋巴小结增大,数量增多,生发中心明显,淋巴小结周围弥散大量淋巴细胞。通过α-ANAE和sABC染色,在淋巴结、脾脏和圆小囊中均可检出大量T细胞、巨噬细胞和IgG阳性细胞。据此认为患脑炎原虫病时,病兔的体液免疫和细胞免疫均增强,但以细胞免疫反应更强。     

贝氏莫尼茨绦虫感染绵羊对小肠局部黏膜淋巴组织的影响

为了研究贝氏莫尼茨绦虫自然感染绵羊对小肠黏膜免疫组织的影响,分别从宏观、微观及亚微观水平对自然感染贝氏莫尼茨绦虫的成年绵羊(感染组)肠道进行了细致地观察,并与正常成年绵羊(正常组)进行了比较.结果显示,感染组肠道所见虫体平均长度为1.5m,头节主要吸附在空肠淋巴集结分布丰富的部位,一般寄生数量为1～2条.眼观,虫体寄生部位黏膜增厚,表面有大量灰白色黏液附着,其间可见点状出血.镜下,局部黏膜上皮脱落,而在完整的黏膜上皮处,其上皮细胞、上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量都明显增多;固有层内毛细血管充血,淋巴细胞、浆细胞、弥散淋巴组织以及肠腺杯状细胞均有不同程度的增生,头节寄生处部分肠腺坏死;黏膜下层淋巴小结、淋巴集结显著增生,部分增生凸入固有层形成新的圆顶区;固有层与黏膜下层以及黏膜肌层可见大量嗜酸性粒细胞浸润.扫描电镜下,感染组肠黏膜上皮脱落;贝氏莫尼茨绦虫头节呈椭球状,有4个吸盘,无顶突,小沟,表面覆盖一层致密的微绒毛.研究结果表明,肠黏膜增厚,主要是局部黏膜免疫相关细胞在寄生虫虫体表面覆盖的微绒毛的不断刺激下,机体抗感染自身组织增生所致.成年绵羊对抗贝氏莫尼茨绦虫的感染可能是通过黏膜免疫相关组织增生来加强局部免疫力而实现的.     

蜱感染后兔体炎性细胞数量的变化

通过应用免疫增强剂或免疫抑制剂改变兔体的非特异性免疫功能，观察长角血蜱幼虫感染后兔体炎性细胞数量的变化，结果发现免疫增强组兔淋巴细胞和嗜中性粒细胞在长角血蜱幼虫感染前和感染后变化不大；免疫抑制组淋巴细胞数量降低，而嗜中性粒细胞数量增加；不用药组幼虫叮咬后相比淋巴细胞数量稍降低，嗜中性粒细胞数量稍增加，嗜酸性粒细胞、单核细胞和嗜碱性粒细胞数量变化不明显。     

家兔主要黏膜免疫器官肥大细胞的免疫组化及超微结构特征

为了探讨家兔黏膜免疫器官肥大细胞（MC）的分布、超微结构及巴氏杆菌感染后特征，对家兔空肠及圆小囊MC进行不同时间甲苯胺蓝染色与血管活性肠肽（VIP）和／或P物质（SP）免疫组化检查，并进行光、电镜观察。结果发现，采用不同固定液和染色方法所获得的MC数量不同，家兔黏膜免疫器官肥大细胞主要分布于黏膜固有层或黏膜下层结缔组织中；当巴氏杆菌感染时MC数量显著增加，这可能对机体的抗感染有重要意义。电镜下，MC胞浆内充盈大量呈电子密度不同的均质状物基质颗粒，未见特殊超微结构。