种猪场猪瘟病原和抗体检测与分析

为了解某规模化种猪场猪瘟野毒感染情况和猪瘟抗体免疫状况,研究分别采用RTPCR、基因测序和阻断ELISA方法对该场36份猪扁桃体样品和102份血样进行了猪瘟病原和猪瘟抗体检测。结果表明:群体猪瘟野毒阳性率为8.3%,其毒株基因型属于2.1c亚型;种母猪群猪瘟抗体阳性率91.7%、离散度23%,猪瘟免疫效果理想;仔猪猪瘟抗体阳性率80%、离散度46%,猪瘟抗体水平较高但参差不齐。该场通过淘汰野毒感染猪、抗体阴性猪群补打疫苗等综合措施实施猪瘟净化,节本增效,净化取得初步成效。     

某规模化猪场猪瘟抗体水平及其野毒感染的检测与分析

为了解某规模化猪场后备种猪群猪瘟野毒感染情况和猪瘟抗体免疫状况,研究分别采用荧光抗体技术和阻断ELISA方法对该场825份猪扁桃体样品和825份血清样品进行了猪瘟病毒和猪瘟抗体检测。结果表明:猪瘟病毒阳性率为2.06%(17/825),猪瘟抗体阳性率为86.06%(710/825),抗体离散度为33.02%。说明该场后备种猪群的猪瘟免疫情况较理想,猪瘟病毒阳性率较低,并且猪瘟抗体免疫合格率较高,但抗体离散度偏高。分析猪瘟抗体水平和感染猪瘟野毒之间的相互关系可知,无论猪瘟免疫抗体水平是否合格,均有可能感染猪瘟野毒,但感染率随着猪瘟抗体阻断率的升高而逐渐降低。     

河南新乡某规模化猪场猪瘟抗体水平检测分析

为了解河南省新乡市某规模化猪场猪瘟疫苗的免疫抗体水平,本试验采用猪瘟疫苗抗体阻断ELISA检测试剂盒,对该猪场不同日龄的保育猪、妊娠母猪、后备母猪及公猪进行猪瘟抗体水平检测。结果显示:妊娠中后期母猪的抗体阳性率均为100%,离散度分别为16.13%、17.01%,离散度相对稳定,免疫效果好。后备母猪、哺乳母猪抗体阳性率达100%,离散度分别为0.65%、8.80%,相对偏低,免疫效果好,猪群比较稳定。公猪的整体抗体阳性率为100%,猪场3个区中公猪的抗体离散度分别为3.23%、3.51%、6.11%,公猪免疫效果好且抗体整齐度高。保育仔猪前期的猪瘟抗体阳性率最高达100%,保育中期抗体阳性率最低,为50%,保育后期抗体阳性率是80%,保育中后期离散度分别为24.77%、32.98%,离散度相对不稳定,免疫水平不均一,存在感染野毒的风险,不同个体间抗体水平差异比较大。结合试验猪场具体情况,在保育猪30～55日龄之间再检测,确定仔猪的最佳首免时间,提高仔猪的免疫效果。本文通过对某规模化猪场不同阶段猪群的猪瘟抗体水平检测分析,为该猪场生产中防控猪瘟提供理论依据。     

云南省部分猪场猪伪狂犬病血清学调查

为调查了解云南省猪场伪狂犬病疫苗免疫抗体水平和野毒感染情况,采用ELISA-gB和ELISA-gE抗体检测方法对云南省部分猪场送检的602份血清样品进行了检测分析。结果表明:检出疫苗免疫猪场伪狂犬病的抗体阳性率为92.73%,未免疫疫苗的猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率为38.46%。说明猪伪狂犬病野毒感染在云南省猪场中普遍存在,疫苗免疫过的猪场伪狂犬病的抗体水平较高,但不同阶段猪的抗体水平存在一定的差异。     

某规模化猪场母猪猪瘟抗体和病原检测与分析

为了探讨母猪的猪瘟疫苗免疫情况和猪瘟病毒之间的关系,本研究采用阻断ELISA技术和RT-PCR技术,对某规模化猪场随机采取57头母猪的血清样品和扁桃体样品进行了猪瘟抗体水平和猪瘟病毒检测。结果表明：猪瘟抗体阳性率为74.07%,抗体离散度为41.79%,表明猪瘟抗体阳性率刚达到国家规定的标准,抗体离散度偏高。猪瘟抗体和猪瘟病毒之间存在一定关系,无论猪瘟疫苗免疫是否合格,均有可能感染猪瘟野毒,猪瘟抗体阴性组,以及抗体阻断率大于90%组中的猪瘟病毒阳性率较高。     

猪伪狂犬病野毒阳性场gE和gB抗体检测以及与阴性场gB抗体对比分析

试验分别采集某猪伪狂犬病野毒阳性场和阴性场6个阶段共409份血清样品,通过ELISA(酶联免疫吸附试验)方法检测阳性场g E和g B抗体水平、阴性场g B抗体水平。阳性场结果显示:g E抗体总阳性率为49%,每个阶段猪群均有伪狂犬病野毒感染,经产母猪和公猪g E抗体阳性率分别为40%和16%;30~150日龄g E抗体阳性率逐渐上升,从14%上升到100%,g E抗体S/N值呈下降趋势。说明仔猪在保育和肥育阶段再次感染了伪狂犬病野毒,提示转群是猪伪狂犬病野毒攻击点。g B抗体总阳性率为89%,其中种猪群高达100%,30~40日龄g B抗体阳性率为93%,与母猪抗体水平一致,60~70日龄母源抗体急剧下降,g B抗体阳性率只有50%,90日龄后抗体水平逐渐上升,到150日龄时高达100%,说明伪狂犬病g B母源抗体在60~70日龄消失,而90日龄后抗体上升,可能是野毒感染和免疫抗体综合作用所致。阴性场结果显示:g B抗体总阳性率为92%,比阳性场高,其中种猪群g B抗体阳性率均高达100%,30~40日龄g B抗体阳性率为83%,60~70日龄时母源抗体开始消退,g B抗体阳性率只有60%,70日龄后经过两次疫苗免疫,g B抗体水平显著提升,到90日龄后阳性率一直保持100%。阳性场和阴性场g B抗体比较而言,g B抗体水平种猪群都比较稳定;仔猪母源抗体都在60~70日龄消退,母源抗体下降趋势基本一致;阳性场的g B抗体总体阳性率比阴性场低,S/P平均值反而更高,因此离散度大,阴性场g B抗体水平的整齐度更好;阳性场S/P4.0的比例比阴性场高6个百分点;阳性场肥育猪疫苗免疫效果不及阴性场明显,疫苗第1次免疫后g B抗体水平提升速度比阴性场慢,第2次免疫后g B抗体均能达到理想水平,都具有很好的保护性,但阳性场g B抗体无法区分是来自于疫苗免疫还是野毒感染。综上分析,猪伪狂犬病野毒阳性场和阴性场疫苗免疫不能"一刀切",而应该根据其血清学检测结果及阴、阳性场的特殊性制定合理的免疫程序,对于阳性场还要狠抓野毒攻击点,以期达到伪狂犬病净化的目的。     

2020年河南鹤壁地区某猪场猪伪狂犬病病毒抗体和猪瘟病毒抗体检测与分析

为调查河南省鹤壁地区某规模化猪场妊娠阶段母猪的猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒等的抗体水平,及时掌握猪场的免疫效果和流行病学动态,分别随机选取此规模化养殖场3个分场中,妊娠前期、中期、后期母猪的血清样品共176份进行抗体检测。结果显示,一分场、二分场母猪妊娠前期、中期、后期的猪瘟抗体阳性率均为100%。3分场妊娠前期、中期、后期母猪的猪瘟病毒抗体阳性率分别为95%、100%、95%,抗体水平较高且整齐。一分场妊娠前期、中期、后期母猪的猪瘟病毒抗体离散度分别为7、11和14,二分场母猪3个阶段的离散度分别为9、10和7,三分场母猪3个阶段的离散度分别为16、20、和20。离散度波动较小（≤20%）,猪群比较稳定,猪瘟抗体的保护效果良好。在猪伪狂犬病病毒gE抗体的检测中,二分场母猪妊娠中期阳性率为94%,妊娠前期和后期的阳性率分别为90%、89%,一分场妊娠母猪前期、中期后期的猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率分别为75%、80%和90%,猪场伪狂犬病野毒的流行状况非常严重,妊娠阶段猪群存在严重野毒感染。三分场母猪妊娠前期和后期猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率分别为35%、30%...     

规模猪场疫病实验室诊断分析实例

对某猪场送检的血清和病料进行了猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病野毒抗体以及猪瘟、蓝耳病原的检测。结果表明,该场母猪猪瘟抗体水平很差;蓝耳病毒抗体水平较高,但为野毒感染产生;伪狂犬病毒抗体方面,有3份样本存在野毒抗体;保育猪没有猪瘟病毒感染,但蓝耳病毒检测结果为阳性。最后,笔者对该猪场的免疫情况以及发生的疫情进行了全面的分析讨论,提出了猪场疫苗免疫接种工作的思路与方法。     

2013-2018年福建省部分规模化猪场猪伪狂犬病病毒野毒感染的流行病学调查

为了解2013-2018年福建省西南地区规模化猪场猪群伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染情况,本研究分别采用PCR和ELISA检测方法,对2013-2018年该地区787个规模化猪场送检的1320份疑似发病猪群组织样品、3041场次的猪场67660份猪血清样品进行PRV病原学、血清学检测。结果显示:送检病例猪组织样品PRV野毒感染总阳性率为50.83%,场阳性率为52.60%;送检猪血清样品野毒感染抗体总阳性率为29.25%,场阳性率为61.13%。对检测数据进行分类统计,分析不同年份和不同猪群送检病例组织样品PRV野毒感染情况,发现2014年和2015年是福建省西南地区规模化猪场不同猪群猪伪狂犬病病毒野毒感染最严重时期;分析不同年份和不同猪群血清样品PRV野毒感染gE抗体,发现2015-2018年PRV野毒感染的猪场阳性率处于较高水平。不同猪群的猪存在一定比例的PRV-gE抗体阳性猪,但差别不明显。结果表明,福建省西南地区猪伪狂犬变异毒株流行后,规模化猪场猪伪狂犬病野毒防控形势更加严峻,提示应进一步加强伪狂犬病疫苗免疫的预防控制水平,并定期做好病原学、血清学监测,实时调整疫苗免疫程序,减少其他疫病的混合感染导致的猪场疫病控制更加复杂化。     

北京市部分规模化猪场伪狂犬病和猪瘟的血清学调查

为掌握现有防疫体系下北京市的猪伪狂犬病和猪瘟的感染和免疫情况,采用HerdChek PRV gI、gB和CSFV Ag、Ab-ELISA检测试剂盒,对2009年10月送检的北京市10个规模化猪场的300份血清样品进行伪狂犬病和猪瘟的抗原和抗体检测.结果显示,有6个猪场为PRV野毒阴性或野毒感染率较低(<10%),其中有4个场的PRV gB免疫抗体合格率在85%以上;所有这10个猪场均为猪瘟野毒阴性或野毒感染率较低(≤10%),母猪群猪瘟抗体的平均阳性率和平均合格率皆在85%以上.结果显示了这些猪场的母猪群具有较低的猪伪狂犬病毒和猪瘟野毒感染水平,而且具有很整齐的猪瘟抗体水平.     

清远市部分规模化猪场四种疫病的抗体检测与分析

为评价清远市部分规模化猪场猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪圆环病毒病(PCVD)和猪伪狂犬病(PR)疫苗免疫水平,从7家规模化猪场采集了322份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病病毒gB抗体和gE抗体。结果表明:猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性率分别为93.48%、89.13%、90.37%、92.24%,离散度分别为22.69%、56.61%、36.13%、31.12%。说明这7家猪场四种疫病疫苗免疫效果良好,其中有1家猪场怀疑伪狂犬野毒流行。     

某猪场3种重大疫病的抗体检测分析

为评估某猪场猪瘟、蓝耳病及伪狂犬病三大疫病的免疫状况及感染状态,及时发现潜在风险,为重大疫病的预警防控提供理论依据,应用中国兽医药品监察所猪瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒、IDEXX与法国LSI蓝耳病抗体检测试剂盒以及SVANOVIR伪狂犬野毒抗体检测试剂盒,对采自某猪场各阶段猪只的50份血清进行了抗体检测。结果显示,该猪场猪瘟、蓝耳病、伪狂犬gE抗体总体阳性率分别为92.0%、38.0%(IDEXX)、90.0%(LSI)和42.0%;猪瘟抗体阳性率很高但整体抗体滴度较低且离散度较大,免疫效果一般;2种蓝耳病抗体检测试剂盒的检测结果在一定程度上具有一致性,指示生长育肥猪蓝耳病病毒的感染压力较大;种猪群伪狂犬gE抗体的阳性率偏高,说明该场伪狂犬野毒感染情况严重。通过对抗体的监测及其结果的科学分析,能够及时发现猪场存在的问题,以便针对性地采取防控措施,指导养猪生产。     

猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。     

新疆规模化猪场伪狂犬病净化方案的初步应用研究

采用PRV-gE ELISA方法对342份抽检血清进行伪狂犬野毒流行病学调查和分析,结果该规模场伪狂犬野毒感染率为9.4%。随后根据检测结果制定了净化方案,对A场所有育成后备猪和产后母猪共计1988头进行了伪狂犬野毒感染筛查,累计淘汰阳性猪98头。间隔6个月,再从该场抽样180份检测PRV-gE抗体,并利用PRV-gB ELISA试剂盒评价了疫苗免疫效果。结果表明,通过该净化方案实施后伪狂犬野毒感染率已降为2.2%,净化效果显著;疫苗免疫抗体阳性率100%,免疫效果较好。     

某规模化猪场主要猪繁殖障碍性传染病抗体检测及分析

为了解某规模化猪场猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)的抗体水平以及猪伪狂犬病野毒感染情况,研究应用ELISA检测技术对该场307份血清进行了CSFV、PRRSV抗体检测,63份血清进行了PRV-gB、PRV-gE蛋白抗体检测,猪群总体CSFV抗体阳性率为81.11%;PRRSV抗体阳性率为90.23%;PRV-gB蛋白抗体阳性率为95.24%;PRV-gE蛋白抗体阳性率为69.84%,并对不同类别猪群的抗体水平做出具体分析。该结果为了解该猪场3种常见传染病的整体免疫水平,进一步制定合理的免疫程序和防治措施提供参考。     

常州金坛区猪伪狂犬病的流行病学调查

为了解金坛区规模化猪场伪狂犬病(PR)免疫和感染现状,为该病的净化提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该区内8个乡镇47个规模化猪场的634份猪血清样品进行伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染抗体和疫苗免疫抗体的检测。结果显示,全区有3个乡镇存在PRV野毒感染,47个规模场中4个为阳性场,共8份样品为野毒g E抗体阳性,总体阳性率为1.26%。全区免疫场比例不到一半,各镇免疫抗体阳性率参差不齐,为44.44%~95.56%。说明该地区存在PRV野毒感染,但并不严重;各镇PR免疫水平差别较大,提示应进一步提高免疫质量,降低PR发生和流行隐患。     

长沙市对伪狂犬病野毒感染的调查

为了解长沙市规模猪场伪狂犬病流行情况,对市内47个规模猪场送检的1534猪血清样品和22个已免疫伪狂犬基因缺失苗规模场送检的1300份血清样品,用ELISA方法对猪伪狂犬病野毒感染抗体（gpI抗体,下同）和免疫抗体（gB抗体,下同）进行检测。结果表明,长沙市规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率为20.9%,场阳性率为44.7%;22个免疫猪伪狂犬基因缺失苗规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率下降1.8%,场阳性数下降4.6%。结果表明,通过利用猪伪狂犬病基因缺失疫苗科学免疫,同时配合伪狂犬野毒抗体检测技术可以控制和净化规模猪场猪伪狂犬病流行。     

猪伪狂犬病阳性场gE与gB抗体监测及风险评估

采集衡阳某猪场119份血清样品进行伪狂犬病gE-ELISA（酶联免疫吸附试验）与gBELISA抗体检测。gE抗体检测结果表明,该猪场所检测猪群除公猪外都有伪狂犬病野毒阳性,是伪狂犬病阳性场,总阳性率为47%。公猪伪狂犬病野毒抗体阳性率为0,说明公猪暂时还没有感染伪狂犬病野毒,属于阴性猪;母猪群伪狂犬病野毒（gE）阳性率达50%~60%;30~40日龄及60日龄阶段猪群gE抗体阳性率分别为30%和55%,加上可疑的数量达到40%~65%,这阶段野毒抗体阳性估计主要受母源gE抗体的影响,且与母猪阳性背景基本一致,但也不能排除个别仔猪阳性抗体来自病毒感染;90~120日龄阶段gE阳性率不降反升,达到100%,说明90~120日龄阶段猪群是在保育转至肥育舍后被伪狂犬病野毒再次感染,gE抗体S/N值显著下降,抗体水平较高。gB抗体结果表明,该猪场伪狂犬病gB抗体阳性率为98%,公猪伪狂犬病gB抗体阳性率为100%,且公猪的gE抗体阴性,说明公猪gB抗体来源于疫苗免疫;母猪群伪狂犬病gB抗体水平高且整齐,可能是野毒感染和疫苗免疫综合作用的结果;30~40日龄阶段gB抗体水平整齐,这是由于母猪群gB抗体水平高且均匀整齐,其仔猪母源抗体相应较好;60日龄阶段gB抗体水平不整齐,这与母源抗体消退有关;90~120日龄阶段gB抗体水平显著提升,这可能是后期野毒感染所致,因为其gE抗体不降反升。综合该猪场gE和gB抗体检测结果分析表明,该猪场伪狂犬病在种猪群得到了有效控制,生产比较稳定,但种猪带毒且散毒,肥育猪的感染压力加大,造成病毒不断循环,肥育猪伪狂犬病野毒感染的控制成了稳定伪狂犬病阳性场的关键。目前,猪伪狂犬病阳性场应定时监测gE和gB抗体,根据猪场血清学检测结果,结合临床实际情况实时调整免疫程序,以便稳定生产和预防伪狂犬病的暴发。     

猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验对猪瘟血清抗体的检测

应用猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）对青海省4个县的免疫猪场629份猪血样进行检测。结果，检出抗体阳性42份，平均阳性率为6.68%。提示经猪瘟疫苗免疫猪群感染了猪瘟强毒。     

江苏省猪伪狂犬病流行病学调查及两种疫苗免疫效果评估

为了掌控江苏地区规模化猪场伪狂犬病野毒的感染情况及其流行性趋势,比较变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的免疫防控效果。于2017年5月份至2019年1月份对江苏地区59个规模场进行采样,通过间接ELISA方法检测猪群中的gE抗体来鉴定猪群是否被伪狂犬病野毒感染。另外,在一猪伪狂犬病阳性的规模猪场进行变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的防控效果的实验,通过检测猪伪狂犬病gE,gB抗体及中和抗体来判定猪群的猪伪狂犬病抗体保护水平。显示4 608份检测血样中,gE阳性1 681份,阳性率36%,母猪群gE阳性率46%,育肥猪群gE阳性率28%,59个猪场中育肥阶段gE阳性的猪场22个,占比37%。在其中一个商品猪群gE抗体100%阳性猪场进行2组猪伪狂犬病疫苗的实验,通过实验2组商品猪gE抗体18周龄至出栏前均为阴性,同时检测发现变异株疫苗(C株)对经典株和变异株的中和抗体效价均高于Bartha-K61疫苗。结果表明,江苏地区猪伪狂犬病感染压力较大,另外C株疫苗相对于进口的Bartha-K61株疫苗在本场的免疫效果更佳。