猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。     

狂犬病病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为评价狂犬病病毒抗体纳米荧光试纸条的性能,使用该试纸条,对A、B、C 3组不同免疫阶段犬血清进行抗体检测,并对122份临床犬血清,同时使用试纸条、SYNBIOTICS试剂盒、北京世纪元亨ELISA试剂盒进行抗体检测。结果显示:未免疫狂犬病疫苗的A组,抗体水平极低;免疫1个月后的B组,抗体水平迅速升高;免疫2个月后的C组,抗体水平出现回落。试纸条与SYNBIOTICS试剂盒的阳性符合率为92%,阴性符合率为91.67%,总符合率为90.17%;与北京世纪元亨试剂盒的阳性符合率为96.16%,阴性符合率为97.15%,总符合率为96.73%。结果表明,试纸条可以真实反映不同免疫阶段的狂犬病病毒抗体变化,与国内外商品试剂盒符合率高,可应用于狂犬病疫苗免疫后的临床效果评估,指导临床建立合理的免疫策略。     

亚洲玉米螟Bt抗性种群的遗传多样性分析

近20年来,在北美、西欧、南美、菲律宾等20多个国家大面积商业化应用Bt玉米防治欧洲玉米螟Ostrinia nubilalis(Hübner)等鳞翅目害虫的实践证明,其不可避免地胁迫靶标害虫产生遗传分化,出现新的抗性种群。研究精准有效的抗性检测方法,将为抗性监测和抗性治理策略的有效性提供科学依据。本研究基于高通量测序获得的亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)转录组数据,应用MISA (MicroSAtellite)软件搜索SSR位点,从61 622条EST(Expressed Sequence Tag)序列中获得了3 467个SSR位点。通过设计、筛选,共获得3 316对特异性引物,从中挑选了150对引物进行PCR扩增,共有51对扩增出目的条带,对亚洲玉米螟敏感种群(ACB-BtS)及5个Bt毒素抗性种群(ACB-AbR、ACB-AcR、ACB-AhR、ACB-FR、ACB-IeR)进行多态性检测,最终得到20条高多态性引物。利用这20对微卫星引物共检测到126个等位基因,平均每个位点6.3个。不同Bt抗性种群间产生了一定程度的遗传分化,种群间的平均遗传分化系数(F_(st))为0.195 9,即说明种群间的遗传变异为19.6%。根据遗传距离建立了UPGMA系统发育树,显示6个种群的相似度,即ACB-AbR与ACB-AcR相似度高。种群变异相似度规律与已报道的亚洲玉米螟对各Bt毒素的交互抗性规律相一致。本研究发现的SSR位点可作为亚洲玉米螟不同Bt毒素抗性种群的分子检测方法。     

马齿苋多糖体内外抗氧化作用的研究

为了研究马齿苋多糖(POL-P)体内外的抗氧化作用,试验采用水提醇沉方法获得POL-P,在宫颈癌U14实体瘤小鼠左前肢腋窝皮下接种0.2 m L不同浓度的POL-P,建立宫颈癌小鼠模型,给药后测定各组小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;在体外化学模拟条件下,测定POL-P对超氧阴离子(O2-·)、羟基自由基(·OH)和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除活性。结果表明:体内POL-P的抗氧化作用表现为能显著提高荷瘤小鼠血清中SOD、GSH-Px、CAT、AKP活性(P0.05),降低LDH活性和MDA含量;POL-P具有体外清除自由基活性的作用,且为剂量依赖形式。说明POL-P的抗肿瘤作用与抗氧化活性有关,其抗氧化性机制主要是通过增强SOD等抗氧化酶活性,从而清除自由基,降低MDA含量。     

矮牵牛组织培养繁殖技术研究

以矮牵牛种子为外植体,将其接种在MS+6-BA1mg/L+NAA0.03mg/L的培养基中进行培养,7～10d种子开始萌发,15～20d新芽被诱导成愈伤组织,30d左右愈伤组织被诱导分化出丛生芽,再将丛生芽接种于MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L的培养基中进行继代培养出成苗,最后将成苗接种于1/2MS+NAA0.03mg/L培养基中,5-7d可生根,7～10d生根率可达100%。     

猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为探究猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用效果,对181份未免疫猪瘟疫苗、71份已免疫猪瘟疫苗的临床猪血清,采用本研究试纸条和北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒分别进行抗体检测,对4头存在母源抗体的不同免疫时间仔猪血清、不同阶段的猪血清,采用本研究试纸条进行抗体检测,并对检测结果进行分析统计。结果显示,本研究试纸条与北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒的阴性符合率为100%,阳性符合率为95.77%,经Kappa检验两者一致性良好;初生仔猪首免后,猪瘟抗体滴度有所下降,30 d后加强免疫,抗体滴度逐渐升高,试纸条检测结果与猪瘟抗体衰减变化过程呈正相关;不同阶段猪群的猪瘟抗体阳性率均为100%,抗体平均值较高,离散度较整齐,与规模化养猪场合理免疫程序相吻合。综合表明,本试纸条的临床应用效果较好,可用于实时监控猪群的猪瘟抗体变化,适用于基层规模化猪场的猪瘟抗体快速检测。     

长春地区古树名木资源与生长状况研究

利用GPS定位和现地实测等方法,对长春地区的古树名木资源进行了调查和生长状况分析。结果表明:长春地区共有古树名木10科13属14种1299株,其中树龄在300 a以上的国家二级古树有3株,其余均为3级古树;古树名木的平均年龄为147 a,平均胸径为84.9 cm,平均高为15.8 m,平均冠幅为11.9 m;古树名木健康状况一般,部分古树急待抢救和加强保护。     

FH-1和NJ-1混合菌发酵液缓解铅与莠去津复合胁迫下的大豆生长

为探究FH-1和NJ-1混合菌发酵液缓解铅(Pb²⁺)与莠去津复合胁迫对大豆种子及幼苗生长发育的影响。本研究采用液相色谱法测定了不同Pb²⁺浓度下FH-1和NJ-1 (3∶2)混合细菌对莠去津降解的影响。结果表明：添加0.02,0.04,0.06,0.08,0.1和0.2mol·L^-1 Pb²⁺后，第1天时低浓度0.02mol·L^-1 Pb²⁺对莠去津降解率有促进作用，随着Pb²⁺浓度的增加莠去津降解率均受到抑制作用；当培养第3天和第5天时，添加各浓度Pb²⁺后莠去津降解率均受到抑制作用。同时种子萌发试验和幼苗盆栽试验进一步表明，Pb²⁺与莠去津复合胁迫对大豆种子萌发、幼苗生长及根部发育均有显著抑制作用(P<0.05),且高于单一胁迫；而加入FH-1和NJ-1混合菌发酵液后，大豆种子发芽率和发芽长度分别提高了36.36%和46.76%。幼苗的相对茎叶干重和根长分别恢复38.60%和60...