北京市部分规模化猪场伪狂犬病和猪瘟的血清学调查

为掌握现有防疫体系下北京市的猪伪狂犬病和猪瘟的感染和免疫情况,采用HerdChek PRV gI、gB和CSFV Ag、Ab-ELISA检测试剂盒,对2009年10月送检的北京市10个规模化猪场的300份血清样品进行伪狂犬病和猪瘟的抗原和抗体检测.结果显示,有6个猪场为PRV野毒阴性或野毒感染率较低(<10%),其中有4个场的PRV gB免疫抗体合格率在85%以上;所有这10个猪场均为猪瘟野毒阴性或野毒感染率较低(≤10%),母猪群猪瘟抗体的平均阳性率和平均合格率皆在85%以上.结果显示了这些猪场的母猪群具有较低的猪伪狂犬病毒和猪瘟野毒感染水平,而且具有很整齐的猪瘟抗体水平.     

规模化猪场母猪群猪瘟抗体血清学调查

采用Herdchek猪瘟抗体检测试剂盒检测全国30个规模化养猪场的母猪群血清,评价假定猪瘟阴性群和阳性群母猪的猪瘟抗体状况。结果显示,在假定猪瘟阴性场,母猪群的平均抗体合格率达到90％以上,变异系数在25％以下;假定猪瘟阳性场的猪瘟抗体合格率相对较低,变异系数也在30％以上。因此,在猪瘟控制比较好的猪场,母猪群猪瘟抗体合格率可达到90％以上,变异系数在25％以下。     

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD 4 和CD 8 T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异。用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30%(3/10),死亡率为10%(1/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为40%(4/10)。体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。     

规模化猪场母猪群PRV抗体血清学调查

采用美国IDEXX公司生产的Herdchek PRV gl抗体检测试剂盒和DHerd Chek PRV gB抗体检测试剂盒对来自于20个种猪场母猪群的血清分别进行野毒抗体和免疫抗体检测。结果显示,有10个猪场的样品均为野毒阴性或野毒感染率较低,其中7个场的PRV免疫抗体合格率均在90％以上,另外有两个场的抗体合格率在80％以上。但对于野毒感染率均在10％以上另外10个场,有3个场由于高野毒阳性率（84％～100％）造成40倍稀释后免疫抗体仍然100％阳性,其余7个场样品阳性率都在20％～73％之间。从上面20个猪场的检测结果来看,管理良好的种猪群可以做到无野毒感染且免疫合格率达到90％以上。     

抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定

根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列，采用SOE技术，设计合成了CAP18的编码基因，将其克隆至pMD18-T载体，进行序列测定后亚克隆至pET-32a（＋）表达载体中，在E．coil BL21（DE3）中表达融合蛋白CAP18。经Ni^2＋亲和层析后回收CAP18融合蛋白，纯度达到了85％以上。对纯化的融合蛋白进行酶切，用液体生长抑制方法检测切割后样品的活性，结果表明重组抗菌肽CAP18对大肠杆菌具有抑制活性。     

共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒部分生物学特性测定

将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)接种4周龄SPF鸡,免疫3周后用异源病毒LSC99I株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中很快出现抗体;外周血中CD4 和CD8 T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组,但这种差异并不显著。LSC99I株IB病毒攻击后的保护率结果表明,免疫组的发病率为50%(5/10),死亡率为20%(2/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为50%(5/10);另外免疫鸡的病理损伤程度与非免疫对照组相比,二者差异不明显,在排毒时间和排毒量上也没有明显变化。体重分析结果显示,攻毒前免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗虽然能在动物体内很好地表达,但不能对实验动物产生很好的保护作用,而鸡干扰素-γ基因能在动物体内表达并发挥其免疫调节作用,减轻了重组疫苗对体重增长的影响。     

抗禽流感或传染性喉气管炎两种重组鸡痘病毒疫苗联合免疫的相互影响

“表达H5N1禽流感病毒HA和NA基因的重组鸡痘病毒（rFPV—AI）疫苗”以及“表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒（rFPV—ILT）疫苗”均已在实现商业化生产。由于两种疫苗使用了相同的载体病毒,如何使用才能减少相互干扰而产生最好的免疫效果。本研究设计了三个试验组：1）免疫rFPV—AI后间隔4周接种rFPV—ILT;2）rFPV—AI和rFPV—ILT混合后接种;3）将rFPV—AI和rFPV—ILT分别在两个翅膀同时免疫。结果表明,试验鸡接种rFPV—AI后4周接种rFPV—ILT,对传染性喉气管炎病毒WG株攻击的保护率为60％（6／10）,低于rFPV—ILT单独免疫组的保护率（100％,10／10）;rFPV—AI和rFPV—ILT混合后免疫组对禽流感病毒强毒攻击的保护率为80％（8／10）,对传染性喉气管炎病毒强毒攻击的保护率为70％（7／10）,而rFPV—AI和rFPV—ILT分两点同时接种对两种病毒攻击均能产生完全保护。本试验结果建议将这两种相同载体的重组病毒疫苗分两点同时接种以避免相互之间的干扰。