2019年黑龙江省兽医实验室检测能力比对

2019年黑龙江省动物疫病预防与控制中心对全省13个市（地）、67个县（市、区）的80个兽医实验室开展了检测能力比对，比对项目包括禽流感抗体检测、猪瘟抗体检测、布鲁氏菌抗体检测、非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示，6个市级实验室和14个县级实验室比对结果正确率为100%，禽流感抗体、猪瘟抗体、布鲁氏菌抗体、非洲猪瘟病毒核酸检测项目结果正确率分别为71.2%、97.3%、73.3%、97.0%。比对结果客观反映了全省兽医系统实验室检测能力，提示应进一步加强实验室建设，加大资金投入，提升技术人员业务能力，规范实验室检测流程。     

2019年山东省兽医系统实验室检测能力比对

2019年山东省动物疫病预防控制中心组织全省98个兽医系统实验室开展检测能力比对工作,比对项目包括非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测和口蹄疫非结构蛋白抗体检测。比对结果显示:总体实验室正确率为70.41%(69/98),其中市级兽医系统实验室正确率为93.75%(15/16),国家动物疫情测报站正确率为68.75%(11/16),县级兽医系统实验室正确率为65.15%(43/66);非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测以及口蹄疫非结构蛋白抗体检测结果正确率分别为87.76%、85.71%、93.88%和97.96%。比对结果提示基层兽医系统实验室应提升检验人员的素质,加大实验室设施设备的投入和管理,结合开展社会化服务来推进实验室建设,确保检测结果客观准确。     

2022年湖南省兽医实验室检测能力比对及非洲猪瘟检测能力验证

实验室检测能力比对与能力验证是评估实验室检测质量的重要手段。2022年4月,按照农业农村部关于检测能力比对的工作部署和要求,湖南省组织全省14个市级77个县级兽医系统实验室开展了检测能力比对,267个实验室开展了非洲猪瘟能力验证。市级开展禽流感病毒H5/H7亚型核酸鉴别检测、非洲猪瘟病毒核酸检测、O型口蹄疫病毒抗体检测3个项目,县级开展非洲猪瘟病毒核酸、O型口蹄疫病毒抗体以及布鲁氏菌抗体检测3个项目,非洲猪瘟检测实验室开展非洲猪瘟病毒核酸检测项目,每个项目各5份盲样。结果显示:12个市级和59个县级系统实验室所有比对项目检测结果全部准确,实验室整体准确率为78.02%,1 355份样品中1 317份样品检测结果准确,样品整体准确率为97.20%;267个参加非洲猪瘟能力验证的实验室中,224个实验室核酸检测结果准确,实验室整体准确率为83.90%,1 335份样品中1 265份样品结果准确,样品整体准确率为94.76%,其中屠宰企业样品准确率最低(93.30%)。结果表明:湖南省兽医实验室检测能力整体良好,但部分县级兽医系统实验室及屠宰企业实验室检测能力有待加强。各地应继续加强实验室检...     

全国省级兽医实验室检测能力比对结果分析

对全国32个省级兽医实验室开展了检测能力比对,比对项目包括H5亚型禽流感抗体(H5-AI Ab)检测、口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体(FMD-3ABC Ab)检测、高致病性猪蓝耳病病毒检测(HP-PRRSV)、新城疫病毒(NDV)检测。比对结果表明,有24个实验室的比对结果全部准确,8个实验室部分项目的比对结果存在较大偏差。其中H5-AI Ab检测项目的合格率为81.3%,FMD-3ABC Ab检测项目的合格率为87.5%,HP-PRRSV检测项目的合格率为96.9%,NDV检测项目的合格率为100%。比对结果说明省级兽医实验室对RT-PCR检测病毒的技术掌握较好,而用ELISA和HI方法检测抗体的技术能力有待提高。     

2016～2020年内江市兽医实验室检测能力比对结果分析

为确保兽医实验室检测结果的科学性和准确性,内江市市级兽医实验室积极参与全省兽医系统实验室检测能力比对试验。2016～2020年,开展了16个比对项目检测,项目类型包含:禽流感病毒抗体检测、口蹄疫病毒抗体检测、猪瘟病毒抗体检测、禽流感病毒核酸检测、口蹄疫病毒核酸检测、非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示:内江市兽医实验室比对结果 5年的准确率均为100%。结果表明,内江市兽医实验室检测水平较高,稳定性也较好,具备较强实验室检测能力。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

为了加强兽医系统实验室能力建设，近期农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对，均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

为了加强兽医系统实验室能力建设，近期农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对，均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

农业部组织开展兽医系统实验室检测能力比对工作

2011年7月,农业部组织完成了省级兽医实验室检测能力比对工作。本次比对共设置了H5亚型禽流感抗体检测、O型口蹄疫抗体检测和高致病性猪蓝耳病病毒检测等3个比对项目。全国32个省级兽医实验室全部参加了比对,均在规定时间内完成了检测并提交了检测结果。     

2016—2020年四川省内江市兽医系统实验室检测能力比对

为提升四川省内江市各兽医实验室检测能力和水平,确保兽医实验室检测结果的科学性、准确性和一致性,2016—2020年内江市动物疫病预防控制中心连续组织开展了全市兽医系统实验室检测能力比对工作。比对项目涵盖高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗体检测以及非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示,各年度实验室比对结果平均准确率分别为100%、94.7%、100%、85.3%、96.7%;荧光聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验、血凝及血凝抑制试验3个检测项目比对准确率分别为100%、96.6%、91.5%。结果表明,内江市兽医系统实验室总体检测水平较高,但稳定性欠佳,实验室能力建设有待进一步加强。     

2014年泉州市原种畜禽场重点疫病本底调查情况

为切实掌握泉州市原种畜禽场重点疫病情况,2014年4～9月,我中心采用问卷调查、现场走访、采集样品检测等方式,对1个原种鸡场、1个原种鸭场（1个场挂3块牌子）、5个原种猪场、1个大型奶牛企业开展重点疫病本底调查。本次调查共采集各类样品1616份（其中鸡血清228份、鸡棉拭子228份、鸡蛋蛋清216份,鸭棉拭子290份,猪血清250份、对应猪扁桃体250份、病料样品54份,奶牛50头及对应奶牛血清50份）,样品累计检测5066份次。结果表明：原种鸡场方面,高致病性禽流感H5亚型、禽流感H7亚型、鸡新城疫病原核酸阳性率均为0%;高致病性禽流感H5亚型、鸡新城疫免疫抗体合格率分别为98.96%.97.92%,禽白血病ALV-AB抗体、ALV-J抗体、禽白血病P27抗原,阳性率分别为45.61%、61.84%、6.94%,鸡白痢抗体阳性率28.51%,说明该场禽白血病和鸡白痢的感染较普遍;原种鸭场方面,高致病性禽流感H5亚型、禽流感H7亚型、鸭瘟病原核酸阳性率均为0%。原种猪场方面,对猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪口蹄疫等5个病种进行抗体和病原检测,猪伪狂犬病gB免疫抗体合格率98.4%,gE抗体阳性率19.6%,猪繁殖与呼吸障碍综合征免疫抗体合格率86.4%,O型口蹄疫抗体免疫合格率76.4%,猪瘟抗体免疫合格率90.8%,组织样品猪伪狂犬病核酸阳性率11.1%,扁桃体样品猪繁殖与呼吸障碍综合征、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪口蹄疫核酸阳性率均为0%,说明我市个别原种猪场中存在猪伪狂犬病病毒感染的情况。奶牛企业方面,布鲁氏茵病及结核病阳性率均为0%。本次调查为我市首次,其结果为今后我市制定种畜禽重点疫病净化实施工作方案,进一步有针对性对原种畜禽场开展动物疫病净化工作提供了参考依据。     

2019～2020年攀枝花市县（区）兽医实验室检测能力比对分析

为全面提升基层兽医系统实验室检测能力和动物疫情监测预警水平,推进各级兽医实验室重视实验室检测工作。2019～2020年,攀枝花市动物疫病预防控制中心组织全市5个县(区)级兽医实验室开展了H5亚型禽流感抗体、O型口蹄疫抗体、猪瘟抗体、小反刍兽疫抗体和非洲猪瘟病毒核酸共5项项目的检测能力比对。结果显示:2019年全市各县(区)检测准确率平均为94%,其中H5-AI Ab检测准确率为88%,猪瘟和小反刍兽疫抗体检测准确率均为100%;2020年全市各县(区)检测准确率平均为95.7%,其中H5-AI Ab检测准确率为96%,O-FMD Ab检测准确率为100%,ASFV核酸检测准确率为90%(其中有一县区不具备检测能力,未开展此项检测)。本研究表明,2019～2020年全市县(区)级兽医实验室的整体检测水平稳步提升,其中用ELISA方法测抗体的技术掌握较好,用HA-HI方法检测的能力也有一定提升,而运用荧光定量PCR检测病毒核酸的技术还有待提高。     

2013—2015年贵州省市、县两级兽医实验室检测能力比对考核结果分析

对2013—2015年由贵州省动物疫病预防控制中心组织实施市、县两级兽医实验室检测能力比对考核工作结果进行分析,参加比对考核的市级兽医实验室9个,占全省市级实验室的100%(9/9),参加比对考核的县级兽医实验室60个,占全省县级兽医实验室的68.2%(60/88),全省比对考核的实验室占市县实验室总数的71.1%(69/97).比对考核实验涉及ELISA、布病虎红平板凝集试验、RT-PCR和H5亚型-HI 4个检测项目,均是当前动物疫病诊断与监测的重要检测方法,3年中ELISA、布病虎红平板凝集试验、RT-PCR、H5亚型-HI的正确率分别是92.8%、86.7%、84%、80.5%.表明本省市级实验室基本掌握了血清学和病原学检测,县级实验室也基本掌握了血清学检测,但与全国省级实验室检测平均水平比较还有一定差距,需加强专项技能培训与学习.     

2021年青海省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

为评估青海省兽医系统实验室检测能力，2021年9月，青海省动物疫病预防控制中心组织全省开展能力比对工作，共有8个市（州）、39个县（市）的47个兽医实验室参加，分别开展了非洲猪瘟病毒核酸检测、高致病性禽流感H5/H7亚型鉴别诊断、口蹄疫病毒O型抗体检测、布鲁氏菌抗体检测和细菌染色镜检。全省8个市（州）、39个县（市）动物疫控中心兽医实验室全部参加了能力比对，共检测盲样700份，检测结果准确559份，总准确率为79.86%(559/700)，其中准确率为100%的实验室有12个，占参与比对实验室总数的25.53%(12/47)。结果表明，青海省兽医系统实验室检测能力总体良好，部分县（市）级兽医实验室因人员不固定、基础设施薄弱、资金支持不足等原因导致检测能力较弱。     

中国猪源HSN1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定

猪是禽流感病毒"禽-猪-人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据.1999～2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海燕等,2002).2002～2003年,我们进一步对来自全国14个省市的1936份血清进行了H9亚型猪流感的检测,同时在广东、福建等省进行了H5亚型猪流感的检测.2002年辽宁、广东、山东及重庆猪血清中出现H9亚型流感抗体,阳性率分别为7.3%、6.8%、5.1%和1.6%.2003年采集的猪血清H9亚型流感抗体均为阴性,同时发现广东、福建两省2003年出现H5亚型流感阳性猪群,阳性率分别为4.7%和8.2%.从2001～2003年收集和送检的样品中分离鉴定了6株H9N2亚型和2株H5N1亚型猪流感病毒,部分序列分析发现H9和H5亚型猪流感病毒均与我国分离的禽流感病毒高度同源.本研究进一步确证了我国猪群中存在H9N2亚型流感病毒,并且首次发现我国猪群已出现H5N1亚型流感病毒,为人类流感及动物流感的防制敲响了警钟.对这两个亚型流感病毒所具有的公共卫生和兽医公共卫生危害性应予以高度重视.     

规模化猪场蓝耳病变异毒株与其他疾病混合感染的诊断及综合防治

对3个规模化猪场送检病料进行蓝耳病病毒和猪瘟病毒PCR、RT-PCR检测和细菌的分离鉴定,其中A场送检的12份病料中检测到变异蓝耳病病毒8份、普通蓝耳病病毒3份、猪瘟病毒2份,分离到致病性大肠杆菌共2株,沙门氏菌1株;B场送检的13份病料中检测到变异蓝耳病病毒6份、普通蓝耳病病毒1份、猪瘟病毒2份,分离到致病性大肠杆菌共3株,巴氏杆菌1株;C场送检的15份病料中检测到变异蓝耳病病毒7份,未检测到普通蓝耳病病毒和猪瘟病毒,分离到致病性大肠杆菌共2株;对发病初送检的血清抗体检测结果显示,A、B、C 3个场的猪瘟和蓝耳病的抗体水平不高,分别为猪瘟65%、42%、64%,蓝耳病71%、53%、79%,说明抗体水平低不能保护猪群是感染病毒的主要原因.还检测到猪群存在圆环病毒病抗体.     

供港猪群流感病毒的分离鉴定及流行病学调查

为了对供港猪群中的猪流感流行情况进行分析,从华南地区供港猪群中用无菌棉拭子采集鼻腔粘液样品,采用鸡胚接种方法,从供港猪群中分离出了2株不同亚型的猪流感病毒株,经国家流感中心鉴定分别为H1N1和H3N2亚型。本研究设计了猪流感常见亚型的HA和NA分型特异性引物,建立了猪流感型特异性RT-PCR检测方法;对分离鉴定的2株猪流感病毒和禽流感H5N1 HI检测抗原进行了RT-PCR检测,并对其部分HA和NA基因进行克隆测序分析。对供港猪群的血清检测结果表明:供港猪群中H1N1和H3N2亚型抗体阳性率分别为26.87%、38.26%,禽流感H5N1和H9N2亚型抗体阳性率均为0%。     

猪高致病性蓝耳病的诊断及其防治措施

目的诊断猪高致病蓝耳病(HPRRS),为猪场的防治提供有效的措施。方法对病死猪进行临床诊断、病理解剖和实验室诊断。结果结合临床、细菌诊断没有发现可疑细菌感染,抗体检测猪瘟抗体能达到有效保护,没有发现猪伪狂犬野毒抗体;RT-PCR结果显示该病例没有感染猪瘟病毒(CSFV)和猪蓝耳病的经典病毒(PRRSV),诊断发现有高致病性蓝耳病病毒(HPRRSV),病毒的培养也进一步证实有高致病性蓝耳病病毒。结论本案例为高致病性蓝耳病感染。     

云南2株H4N6亚型禽流感病毒株的分离与鉴定

采集家禽喉气管作为检测样品,用甲型流感病毒M基因检测引物进行RT-PCR检测,确定样品为甲型流感病毒感染。用已建立的PCR法检测H5、H9亚型及新城疫结果为阴性。在9日龄鸡胚中进行病毒分离培养,收集48 h后死亡鸡胚尿囊液进行血凝和血凝抑制试验,有血凝效价但不能被H5、H7、H9和新城疫阳性血清抑制。为进一步确定病毒的亚型,用甲型流感病毒血凝素基因通用引物进行RT-PCR扩增、克隆及测序,将测得的HA基因序列与血凝素亚型标准序列进行比对,同源性为34.9%～87.3%,与H4亚型的同源性为87.3%;设计神经氨酸酶基因测序引物,将所测序列与神经氨酸酶亚型标准序列进行比对,同源性为47.7%～90.8%,与N6亚型的同源性高达90.8%。通过进行HA和NA基因序列比对,可以确定试验所分离到的2株甲型流感毒株为H4N6亚型禽流感病毒。     

一起初生仔猪先天震颤的诊断

本文对一窝初生发生先天震颤仔猪,分别进行了猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、轮状病毒、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬、猪2型圆环等病毒核酸检测,结果检出高致病性猪蓝耳病和猪2型圆环病毒核酸阳性,未检出传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、轮状病毒、猪瘟、猪伪狂犬等病毒核酸。     

高致病性禽流感实验室检测风险的分析及预防

高致病性禽流感（Highly Pathogenic Avian In-fluenza, HPAI）是由正粘病毒科A型流感病毒属流感病毒引起的以禽类为主的急性传染病。高致病性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物传染病，我国将其列为一类动物疫病。近年在家禽身上分离出了H7N9亚型高致病性禽流感病毒，各地兽医实验室加强了高致病性禽流感的血清学及病原学检测工作。我市的兽医实验室是生物安全Ⅱ级，承担起了辖区内H7亚型高致病性禽流感的感染抗体检测工作，以及高致病性禽流感的病原学检测工作。对于从事检测工作的兽医实验室人员，做好自身防护，不被感染，使得兽医实验室生物安全显得尤为突出。有效的防护不仅体现在对实验室生物安全高度重视，还体现在操作人员对自身的科学防护措施上，笔者将这些经验和知识总结出来，以避免在进行高致病性禽流感抗体和病毒核酸检测时，样本中有害或潜在危害的生物因子对人、环境造成危害或潜在危害。