淫羊藿提取物内控方法初探及初步饲喂试验

为了建立淫羊藿提取物内控方法并摸索临床饲喂剂量,试验利用水提法制作淫羊藿提取物,用薄层色谱法鉴别淫羊藿苷;用高效液相色谱法检测淫羊藿苷含量;在妊娠母猪饲料中添加低剂量(500 g/t饲料)、中剂量(1 000 g/t饲料)、高剂量(1 500 g/t饲料)淫羊藿提取物,在妊娠期使用14 d,并设立对照组,在母猪分娩后统计母猪分娩率、活仔数、仔猪初生重等,分析淫羊藿提取物对母猪生产性能的影响。结果表明:薄层色谱法所得荧光斑点对应整齐且明显;高效液相色谱法所得线性回归方程为y=10 930x+95 789,R~2=0.990 6,检测设备精密度RSD为0.35%,检测方法重复性的RSD为1.5%,检测样品中淫羊藿苷的含量为1.0 mg/g;饲喂试验低、中、高剂量组的活仔数显著高于对照组(P0.05),饲喂试验中剂量组和高剂量组初生重显著高于对照组(P0.05),而中剂量组和高剂量组初生重差异不显著(P0.05),低剂量组初生重虽然高于对照组,但差异不显著(P0.05)。说明薄层色谱法可以作为淫羊藿提取物质量控制的方法之一;高效液相色谱法检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量的方法可以为其在生产加工和临床应用中提供数据支持;淫羊藿提取物作为饲料添加剂可以改善母猪生产性能,建议添加剂量为1 000 g/t。     

催情散质量标准研究

为提高和完善催情散的质量标准,增加了方中君药淫羊藿的薄层鉴别方法,并采用HPLC法测定淫羊藿苷含量。薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰。淫羊藿苷对照品浓度在0.0510~0.2550 mg/mL(r=0.9992,n=5)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.24%,RSD为0.29%。该方法简便、准确、重现性好、精密度高,可作为催情散的质量控制方法。     

HPLC法测定催情助孕液中淫羊藿苷含量的研究

催情助孕液是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制的中药制剂,主要由淫羊藿、阳起石、丹参、红花等药物组成,临床用于治疗奶牛卵巢疾病性不孕症。淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物,淫羊藿苷为其活性成分之一。为了控制催情助孕液的质量,试验采用高效液相色谱法对该制剂中淫羊藿苷含量的测定方法进行了研究。     

复方淫羊藿散的薄层色谱鉴别

建立复方淫羊藿散的质量控制标准,采用薄层色谱法对复方淫羊藿散中的淫羊藿、女贞子、白术、茯苓进行定性鉴定。试验结果表明,淫羊藿、女贞子、茯苓的指标成分在与对照品或对照药材色谱相应位置上有相同的斑点,阴性对照无干扰。该方法专属性好、结果准确、重复性高,为复方淫羊藿散的质量控制建立了定性鉴别方法。     

三仙脱力丹质量标准研究

目的:建立三仙脱力丹的质量标准。方法:采用薄层色谱法对三仙脱力丹组方中药材五味子、淫羊藿进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定淫羊藿苷的含量,色谱柱为InertSil ODS-SP C_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈-水(30∶70),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长270 nm。结果:薄层色谱鉴别斑点清晰,专属性强,阴性对照无干扰;高效液相色谱法测定淫羊藿苷在0.209 6～1.048 0μg呈良好的线性关系(r=0.999 8),加样回收率为99.43%,RSD为1.84%(n=5)。结论:本研究建立的检测方法既能定性又能定量,操作方法简便,专属性强,重复性好,可作为制剂三仙脱力丹的质量标准。     

扶正解毒散中淫羊藿苷的鉴别和含量测定

建立扶正解毒散中淫羊藿苷的薄层鉴别法和含量测定方法;色谱条件:Waters XBrige~(TM)C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈∶水(30∶70)为流动相;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长270 nm;进样体积10μL。该薄层鉴别方法专属性好,无干扰;淫羊藿苷线性回归方程为Y=3E+06X-64 363(r=0.999 7),淫羊藿苷在0.202 2～2.022 0μg范围内线性关系良好,淫羊藿苷的平均回收率为99.98%(RSD=1.3%)。所建立的方法专属性强,方便操作,结果准确,可用于扶正解毒散中淫羊藿的质量控制和标准提高。     

高效液相色谱法测定促孕灌注液中淫羊藿苷含量

以高效液相色谱法分离测定促孕灌注液中有效成分淫羊藿苷含量。采用Shim-PackVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(55∶45)为流动相;流速1 mL/m in,检测波长270 nm。淫羊藿苷分离良好,线性范围在0.1~4μg(r=1.000),平均回收率为99.9%,RSD为2.4%(n=6)。方法简便、准确,可以控制促孕灌注液的质量。     

芪贞增免颗粒质量标准提高

目的:提高芪贞增免颗粒质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)芪贞增免颗粒中黄芪、淫羊藿进行定性鉴别;采用高效液相色谱—蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定制剂中黄芪甲苷含量;采用波长切换高效液相色谱法(HPLC)同时测定制剂中特女贞苷和淫羊藿苷的含量。结果:定性鉴别分离度较好,专属性强;黄芪甲苷含量测定线性范围为进样量0.840~5.040μg (r=0.9997),平均加样回收率为100.39%(RSD=1.09%,n=9);特女贞苷含量测定线性范围为10.0012～250.0300μg·m L-1(r=1),平均加样回收率为100.56%(RSD=1.28%,n=9);淫羊藿苷的含量测定线性范围为10.0185～250.4625μg·mL-1 (r=0.9997),平均加样回收率为99.80%(RSD=1.01%,n=9)。结论:本文所建立方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可用于芪贞增免颗粒质量标准的提高。     

高效液相色谱法测定不同粒径淫羊藿中淫羊藿苷的溶出量

本研究旨在建立高效液相色谱法测定不同粒径淫羊藿中淫羊藿苷的溶出量。采用Shimadzu VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈:水(25:75,V/V)为流动相,流速为1 mL/min,在270 nm波长下进样10 μL进行检测,结果显示淫羊藿苷在0.08～0.40 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),相对标准偏差(RSD)为1.62%,平均回收率为97.11%～101.08%,该含量测定方法简单、快速,所测定的淫羊藿苷溶出量随着淫羊藿粒径的变小而增加,但粉碎到100目以上时,淫羊藿苷的溶出量不再随粒径的减小而增加。     

清宫灌注液质量标准研究

建立清宫灌注液质量控制标准。用薄层色谱法(TLC)对清宫灌注液中淫羊藿、地榆、苦参展开薄层鉴别,并应用高效液相色谱法对制剂中淫羊藿苷的含量进行测定。色谱条件:流动相为乙腈-水(30∶70),检测波长为270 nm,流速为1.0 mL/min,柱温35℃。结果表明,在选定的色谱条件下,淫羊藿、地榆、苦参含有的指标成分在与其对照品或对照药材在色谱图相应位置显示相同颜色斑点,阴性对照无干扰。在清宫灌注液淫羊藿苷含量测定时,进样量处于0.178 98～1.342 35μg范围内时,具有良好的线性关系(R2=0.999 8),平均加样回收率为98.39%,RSD为0.71%。说明该方法既能定性又能定量检测本制剂质量,且方法操作简单,特异性强,重复性好,可控制清宫灌注液的质量。     

清脂胶囊质量标准研究

目的:建立清脂胶囊的质量控制方法。方法:对清脂胶囊中白术、白芍、柴胡进行薄层色谱鉴别;采用HPLC法对芍药苷进行含量测定。结果:薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;芍药苷进样量在0.104-1.040μg范围内线性关系良好(r=0.998 5),平均回收率为98.92%,RSD为0.61%(n=9)。结论:本研究建立的TLC和HPLC法专属性强、准确度高、重复性好,可用于清脂胶囊的质量控制。     

甜地丁中槲皮素的薄层鉴别和含量测定

为完善甜地丁质量标准,采用薄层色谱法对甜地丁中槲皮素的鉴别进行了研究,并用高效液相色谱法测定其含量。薄层色谱以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（7：5：0．5）为展开剂,高效液相法色谱柱为C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-0．3％磷酸溶液（50：50）,检测波长为360nm,流速1mL／min,柱温25℃,进样量10μL。结果表明薄层色谱法能对槲皮素实现有效分离,高效液相色谱法槲皮素进样浓度在5。100μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=O．9997）;样品平均回收率为96．1％（n=6）,RSD为0．7％。本方法为进一步控制甜地丁的质量提供了依据。     

HPLC法测定抗骨增生片中淫羊藿苷含量研究

为建立抗骨增生片中淫羊藿苷含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,采用LC-10ATVP型高效液相色谱仪,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(27∶73),流速:1.0 mL/min,检测波长:270 nm。结果显示,淫羊藿苷在0.104-0.520μg范围内呈良好线性关系(r=0.999 9);淫羊藿苷含量不少于0.20 mg/片;平均回收率为98.497%,RSD为1.217%。表明该方法简便,专属性强,重复性好,可用于该产品的质量控制。     

兽用中成药四味穿心莲散质量标准提高研究

目的：开展四味穿心莲散的质量标准提高研究.方法：采用薄层色谱法对处方中大青叶进行定性鉴别.用高效液相色谱法对四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯进行含量测定,色谱条件：Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,穿心莲内酯检测波长为225 nm,脱水穿心莲内酯检测波长为254 nm,流速为1.0 mL/min.结果：该薄层鉴别方法分离度良好,专属性强.穿心莲内酯的含量测定范围为0.052 6-0.526 1μg（r=0.999 3）,脱水穿心莲内酯的含量测定范围为0.051 7-0.517 3μg（r=0.999 7）.穿心莲内酯的加样回收率为99.2％,RSD为2.4％;脱水穿心莲内酯加样回收率为101.2％,RSD为1.6％.结论：该方法简便、准确、重现性好,可用于四味穿心莲散的质量控制.     

防己散质量控制方法研究

对《中国兽药典》2005年版防己散的质量标准进行修订,采用薄层色谱法对制剂中防己药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行了含量测定。建立了同时测定防己散中2种成分含量的方法,粉防己碱和防己诺林碱的线性范围分别为52．55～525．5μg／ml（r=0．9995）和27．30～273．0μg／ml（r=0．9996）;平均回收率（n=9）分别为98．1％（RSD=1．9％）和97．9％（RSD=2．2％）。该方法简便、准确、重复性好,为防己散的质量控制提供了定量方法。     

黄芩注射液的制备工艺及质量标准的初步研究

目的:研制以黄芩和柴胡为主药的注射剂,并建立质量控制标准。方法:以传统的水提醇沉法制备该注射剂,采用薄层色谱法对黄芩甙进行鉴定,并用紫外分光光度法测定黄芩甙的含量。结果:采用水提醇沉法制备得到的该注射剂符合药典关于注射剂的各项检查。实验结果表明:黄芩苷含量在1.6μg/mL～8.0μg/mL与吸光度成良好的线性关系,相关系数0.9996,平均回收率99.4%,相对标准偏差为0.6%(n=5)。黄芩甙的薄层色谱鉴别,薄层色谱斑点清晰、空白无干扰,重现性好。结论:该制剂生产工艺简单,质量标准简单易行,产品质量容易控制。     

露水草提取物质量标准的研究

建立了露水草提取物的质量标准。用薄层色谱法对其主要成分β-蜕皮激素进行鉴别;以高效液相色谱法对露水草提取物中β-蜕皮激素进行定量分析,流动相为乙腈-甲醇-水（1：2：4）,流速为1mL／min,检测波长为243nm。结果薄层色谱无干扰,专属性强;β-蜕皮激素质量浓度在0．6～4．2mg／mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0．99997（n=7）,加样回收率为99．7％,RSD为0．6％（n=6）。所用方法简便、准确、重现性好,可用于露水草提取物的质量控制。     

六味地黄散中牡丹皮的薄层鉴别及含量测定研究

对《中国兽药典》2005年版二部收载品种六味地黄散组方中牡丹皮进行了薄层色谱法鉴别和有效成分丹皮酚含量测定研究。用薄层色谱法鉴别组方中牡丹皮的有效成分丹皮酚,分离效果较好（Rf=0.648）,斑点显色清晰且无干扰;用高效液相色谱法测定牡丹皮中丹皮酚在0.005-0.08 mg/mL峰面积与浓度呈良好线性关系,γ=1,回收率为99.1%,完善了六味地黄散质量标准的质量控制。     

苦玄参提取物中苦玄参苷ⅠA质量控制方法的建立

[目的]建立苦玄参提取物中苦玄参苷ⅠA的鉴别和含量测定方法。[方法]采用薄层色谱法对苦玄参苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定提取物中苦玄参苷ⅠA的含量,色谱条件为：Waters Symmetry C18（4.6×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈—水（35∶65）,流速1.0 m L/min,检测波长264nm,柱温35℃,进样量20μL。[结果 ]苦玄参苷ⅠA的薄层色谱鉴别方法专属性强;苦玄参苷ⅠA在20.06～104.10μg/m L的质量浓度范围内线性关系良好（R2=0.9992）,平均加样回收率为99.90%,RSD=0.53%。[结论]建立的方法专属性强,定量准确性高,适用于苦玄参提取物的质量控制。     

中草药饲料添加剂“连藤”合剂质量标准的初步研究

选择中草药连翘、鸡血藤等配伍组成“连藤”合剂,建立“连藤”合剂的质量标准.采用薄层色谱法对处方中的连翘苷和芒柄花素进行鉴别,并采用高效液相色谱法对其含量进行测定,色谱条件为phenomenex luna C18（250 mm×215;4.60 mm,5μm）色谱柱,柱温25 ℃,乙腈-0.3％磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为254 nm和277 nm.结果表明,薄层鉴别的色谱分离良好,斑点清晰;连翘苷在进样量为25～100 μg范围内线性关系良好（R^2=0.999 5）,平均回收率为96.40％（n=6）;芒柄花素在进样量为12～120μg范围内线性关系良好（R^2=0.999 8）,平均回收率为95.13％（n=6）.该方法专属性强,且准确、快速、结果可靠,适用于“连藤”合剂的质量控制.